FasL诱导内膜的整体运动。(一)ERGIC53免疫标记后，使用Alexa Fluor488-HPA（绿色）进行双重高尔基染色，与，使用红色荧光二级抗体证明。用60倍物镜采集31个z断面的投影图像，并用Deltavision RT软件进行10个周期的去卷积。HPA染色是在没有凝集素预吸收的情况下进行的，以清晰地定义细胞轮廓。注意这种表面染色在FasL处理的细胞中的扩散。(b条)德克萨斯州红结合HPA（HPA外部，20μg/ml）与FasL（0.5μg/ml）转移到活细胞中，并在37°C的RB中孵育40分钟。清洗后，将细胞固定、渗透，然后用GM130（左）和ERGIC53（仅右合并图像）进行免疫染色，如。获得了34个z截面的投影图像，如下所示(一). (c（c）)Jurkat细胞首先加载50 nM MTR（参见。)然后离心并附在盖玻片上，用未标记的HPA（52）进行固定和淬火μg/ml），渗透，然后用2μg/ml Alexa Fluor488-HPA（绿色）显示细胞内膜，优先于表面染色（与一). 获得了56个z截面的投影图像，如下所示(一). (d日)用从处理过的小鼠肝脏分离的线粒体定量测量HPA与膜的结合体外带FasL（参见。38)在与淋巴瘤细胞诱导细胞死亡相同的条件下。得克萨斯州红色共轭HPA（50μg/ml）与40μg/ml线粒体蛋白和8μg/ml高尔基蛋白（黑色直方图，从大鼠肝脏中纯化的高尔基是曼彻斯特大学M Lowe博士赠送的礼物）在37°C的分析缓冲液中放置30分钟。然后通过离心分离和清洗膜，在分析缓冲液中重新悬浮，并转移到四个孔中，以便在平板读取器中进行荧光测量（544 nm激发，590 nm发射）
