图1

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FasL处理后高尔基体和线粒体膜的混乱。()采用CaspGLOW荧光素活性半胱氨酸蛋白酶染色法,通过流式细胞术测定CEM细胞中caspase-8的活性(见材料和方法)。该测定利用与FITC结合的特异性胱天蛋白酶抑制剂IETD-FMK来标记完整细胞内的活性胱天蛋白酶8。每个面板中的数字是指由于活性半胱氨酸蛋白酶-8而显示增强荧光的细胞百分比。通过双参数分析,在FasL治疗的1小时内,细胞凋亡的基础水平(<2%的细胞)没有显著增加。(b条)未经处理或经FasL处理的CEM细胞的三色免疫荧光图像(1小时,如)采用IVM技术采集,即使用CCD摄像机和一个×100物镜进行拍摄,然后使用图像分析软件(OPTILAB,Graftek,法国)进行背景处理。37细胞核用Hoechst染料染色,高尔基染色用抗GM130单克隆抗体(红色)染色,并结合线粒体染色(MTR-Green,MTR)。注意黄色染色,表明高尔基体/线粒体重叠,以及处理细胞中线粒体的部分极化(第二排)。(c(c))同一处理细胞的TEM分析(b条)显示FasL促进的水泡事件。请注意高尔基体柄与线粒体之间的紧密接触(左图),囊泡向线粒体方向出芽(中图),小囊泡与线粒体合并(右图)。插图:中间面板中盒装区域的高倍率(×40000)