抑制网格蛋白介导的内吞减少自噬体的形成答：。转染两轮对照、epsin 1、clathrin重链、AP2或AP1 siRNA的HeLa细胞5 d后，要么不处理，要么用Bafilomycin A1（+/-BafA1）处理4 h，然后用抗LC3和抗ubulin抗体对其进行western blot分析。注意，在我们使用的蛋白质提取条件下，与HeLa细胞中的LC3-II相比，LC3-I通常非常微弱。但这不是问题，因为建议将LC3-II与微管蛋白/肌动蛋白联系起来13,14.B。LC3-II与对照组、epsin、clathrin重链、AP2或AP1敲除后的微管蛋白的比率，无论是否使用Bafilomycin A1，都是通过三个独立实验（两个实验用于epsin）进行量化的，并在图中表示。*-p<0.01，**-p<0.001，***-p<0.0001。C、。稳定表达GFP-mRFP-LC3的HeLa细胞17用两轮对照组或甲氰菊酯重链siRNA转染5 d，在此期间，未经处理（UT）或用Bafilomycin A1（BafA1）处理15 h。然后将细胞固定并在细胞组学阵列扫描系统上进行分析。图中显示了不同条件下每个细胞自噬空泡（AV）或自溶体（AL）的定量p<0.01，NS-不显著。n=2000个单元。D。将转染有对照、氯氰菊酯重链、AP1或AP2 siRNA的HeLa细胞在Hanks平衡盐溶液（HBSS）中培养4d，6h后固定细胞，并进行内源性LC3免疫染色。如图所示，对具有50个以上LC3囊泡（用箭头标记）的HeLa细胞的百分比进行计数。***-p<0.0001。n=500个单元。图中的所有误差条代表SEM。
