VEGFR-2贩运协同素−/−和肌球蛋白VI−/−原代内皮细胞(A) VEGFR-2的内化在联凝蛋白和肌球蛋白VI中相似+/+和−/−内皮细胞:将汇合后的血清饥饿细胞用生物素进行表面标记,并用VEGF-A刺激。剥离剩余的细胞表面生物素后,用中性亲和素珠沉淀细胞裂解物,并用Western blot检测VEGFR2,以确定内化的VEGFR2。另请参见图S2.
(B–D)VEGFR2贩运:缺乏血清的合成蛋白+/+和−/−或肌球蛋白-VI-+/+和−/−用VEGF-A处理标记有抗VEGFR2(绿色)的AEC细胞5-30min。然后固定,渗透,用抗EEA1标记(红色),并用免疫荧光显微镜观察。显示了在不同时间点VEGFR2/EEA1共定位的联凝集素的定量+/+和−/−面板C和肌球蛋白-VI中的AEC+/+和−/−面板D中的AEC(平均值±标准偏差,*P<0.05)
(E) 含VEGFR-2的小泡在连接蛋白中的运动−/−澳大利亚大学城:用VEGF-A处理标记有抗VEGFR-2的血清饥饿细胞,并用延时显微镜追踪标记的囊泡。每隔30秒采集一次图像,持续30分钟,并使用图像J测定囊泡的平均速度和增量(平均值±标准偏差,*P<0.05)。塞雷也图S3