图1

（A、B）ERK激活A： 合成素总细胞裂解物的蛋白质印迹^+/+和^−/−内皮细胞。按照50ng/ml VEGF-A指示的时间刺激汇合的、血清饥饿的细胞。合成素中p44/42 MAP激酶对VEGF-A-的反应磷酸化降低^−/−与联结蛋白相关的细胞^+/+细胞。B： 4个独立实验中ERK激活的定量（平均值±标准偏差，*P<0.05）

（C、D）VEGF受体表达VEGFR1和VEGFR2在联凝集素中的表达^+/+和^−/−澳大利亚大学城。C： 细胞表面生物素化和用中性亲和素珠沉淀200ug蛋白裂解物后，对总细胞裂解物进行蛋白质印迹。注意合成素中VEGFR-1和2的可比细胞表面水平^+/+和^−/−内皮细胞。D： 用中性亲和素珠沉淀200 ug蛋白裂解物后，用VEGFR2抗体对生物素化细胞提取物进行蛋白质印迹。右侧面板代表VEGFR-2非特异性沉淀的对照，并表明在没有生物素化的情况下，VEGFR2不会沉淀。

（E、F、G）VEGFR2激活：VEGF-A激活VEGFR2 Y¹¹⁷⁵但不是Y^1054/1059合成蛋白减少^−/−AEC：合成素总细胞裂解物的蛋白质印迹^+/+和^−/−血清饥饿和50ng/ml VEGF-A刺激后的AEC^−/−澳大利亚大学城。G： VEGFR2 Y的定量分析¹¹⁷⁵基于4个独立实验的位点磷酸化。（平均值±标准差，*P<0.05）（H）可编程逻辑控制器γ激活：VEGF-A激活合成素中的PLCγ^−/−AEC：从合成素中分离的总细胞裂解物的Western blotting^+/+和^−/−血清饥饿和50ng/ml VEGF-A刺激后的AEC^−/−澳大利亚大学城。G： VEGFR2 Y的定量分析¹¹⁷⁵基于4个独立实验的位点磷酸化。（平均值±标准偏差，*P<0.05）

（H）可编程逻辑控制器γ激活：VEGF-A激活合成素中的PLCγ^−/−AEC：从合成素中分离的总细胞裂解物的Western blotting^+/+和^−/−血清饥饿和50ng/ml VEGF-A刺激后的AEC。注意合成素中酪氨酸783上PLCγ1的磷酸化降低^−/−澳大利亚大学城。另请参见图S1.

（一）钙助熔剂：VEGF-A诱导的合成素中的钙水平^−/−AEC：结合蛋白中的钙通量^+/+和^−/−隔夜饥饿后，在VEGF-A（250ng/ml）刺激后，在加载5uM Indo-1-AM的细胞中测量AEC。注意合成素中钙通量减少^−/−澳大利亚大学城。（平均值±标准偏差，*P<0.05）。另请参见补充资料.