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2009年12月10日在线发布。 数字对象标识:10.1038/emboj.2009.369

图5

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BCL-2抑制Beclin 1依赖性自噬需要NAF-1。(A类)NAF-1有助于BCL-2和Beclin 1之间的相互作用。用Flag-Beclin 1和LUC或NAF-1 siRNA转染H1299 HA-BCL-2b5细胞。裂解细胞并用抗BCL-2抗体进行免疫沉淀。使用抗Beclin 1和抗BCL-2通过免疫印迹对沉淀进行分析。所有通道都来自相同的凝胶和相同的暴露。细白线表示车道已被移除的位置。(B)NAF-1缺失可阻止BCL-2b5对抗饥饿诱导的自噬。用LUC或NAF-1 siRNA转染H1299 GFP-LC3和BCL-2b5/GFP-LC3细胞,并饥饿4 h图4C. (C)用LUC或NAF-1 siRNA处理的H1299 neo和HA-BCL-2b5细胞的代表性电子显微照片,有或没有随后的饥饿。比例尺代表10μm。细胞裂解物通过免疫印迹分析。所有通道都来自相同的凝胶和相同的暴露。细白线表示车道已被移除的位置。电子显微镜观察到的自噬水平(C)量化并表示为含有自噬空泡的细胞百分比(D类)或每个细胞的自噬体数量(E类). 每个样本至少计数100个细胞;结果表示平均值±标准误差。

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