在ER中鉴定新型BCL-2相互作用伙伴NAF-1(A类)仅BH3的BIK在ER处置换BCL-2复合物的一个子集。将模拟感染或感染Ad-BIKb5的H1299 HA-BCL-2b5细胞纯化的LM与BMH交联，并通过免疫印迹观察。星号(*)表示BCL-2交联产品，由BIK取代。粗体箭头表示包含交联NAF-1/BCL-2的区域。(B类)NAF-1的氨基酸序列。质谱鉴定的肽序列用双下划线表示。TM域由粗体单下划线表示。细胞溶质域中的半胱氨酸残基用星号表示(*). CDGSH域以灰色突出显示，预测的2Fe-2S配位Cys-3-His-1 aa以粗体标记。向下箭头（∨）表示Flag表位插入的位置。双线箭头（⇓）表示突变（E37Q）时引起WFS2的Glu残基。使用人类蛋白质参考数据库（HPRD）中的磷酸基序查找器发现的预测磷酸化位点在方框中以粗体显示；β-肾上腺素能受体激酶底物基序（aa 25–29）、PKA和PKC激酶底物模序（aa32–34和67–69）以及酪蛋白激酶II底物模式（aa 34–37）。(C类)推导了NAF-1的膜拓扑结构。灰色矩形表示CDGSH域。(D类)从H1299 neo和HA-BCL-2b5细胞中纯化的内源性NAF-1在内质网与BCL-2交联。LM经BMH交联，并用抗NAF-1抗体进行免疫沉淀。用抗BCL-2免疫印迹法分析沉淀。(E类)NAF-1由BCL-2替换为BH3-only BIK。H1299 HA-BCL-2b5细胞要么被模拟感染，要么被Ad-BIK感染。纯化的LM按(D类).
