美国国家科学院院刊。1988年10月；85(19): 7177–7181.
编码人类DNA拓扑异构酶II的cDNA的克隆和测序，并将该基因定位到染色体区域17q21-22。
哈佛大学生物化学和分子生物学系，马萨诸塞州坎布里奇，02138。
摘要
用两种独立的方法鉴定了编码人类DNA拓扑异构酶II的两个重叠cDNA克隆。在一个研究中，通过与混合寡核苷酸探针杂交，筛选噬菌体lambda中的人cDNA文库，该探针编码在酵母和果蝇DNA拓扑异构酶II中发现的七个氨基酸；另一种方法是，在lambda gt11表达载体中筛选不同的人类cDNA文库，以表达由人类DNA拓扑异构酶II特异性兔抗体识别的抗原决定簇。人类DNA拓扑异构酶II基因的整个编码序列由这些克隆和几个额外的克隆确定，通过使用克隆的人类TOP2基因序列作为探针进行鉴定。克隆序列与mRNA和基因组DNA之间的杂交表明，人类酶是由单拷贝基因编码的。通过将克隆片段原位杂交到中期染色体，并通过与一组鼠-人杂交细胞系进行杂交分析，将该基因定位到染色体17q21-22上，每个细胞系都保留人类染色体的一个子集。
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