图5

（A） 新生儿矢状缝区增殖标记物Ki67的免疫检测Icap-1^+/+和Icap-1^−/−颅骨Icap-1^−/−小鼠Ki67阳性细胞数量减少。方框表示用于（B）中KI-67和BrdU量化的区域。棒材为25μm。（B） 对照和突变动物成骨前沿Ki67-和BrdU-阳性细胞的定量。误差条代表S.D.星号表示Icap-1^+/+和Icap-1^−/−（**，P<0.0001）。（C） 不朽颅骨成骨细胞。ICAP-1缺陷细胞（SV2.1-Icap-1^−/−)与野生型细胞相比，BrdU标记指数显著降低（SV6.5-Icap-1^+/+). 逆转录病毒转染Icap-1cDNA导入Icap-1^−/−细胞挽救增殖缺陷（SV2.1-Icap-1^重新扫描)（**，P<0.0001）。（D） SV2.1和SV2.1-Icap-1^重新扫描细胞在1%FCS中培养24小时，然后将其移植到10μg/ml FN上。铺展5小时后，用PBS清洗细胞，并用RIPA缓冲液直接裂解到培养皿上。凝胶分离每个泳道30μg的蛋白质，然后转移到PVDF膜上，然后用抗细胞周期蛋白D1抗体进行蛋白质印迹。用抗肌动蛋白多克隆抗体对同一凝胶进行印迹，以使蛋白质负荷正常化。