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图3。

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DAB2IP通过PR域与p85交互。(A类)DAB2IP与p85结合域的体外分析。用各种cDNA构建物转染293细胞后,使用GST-p85-SH3融合蛋白进行下拉试验。每个输入裂解物的5%被用作负荷控制。(B类)DAB2IP复合物的体内分析。在相同的转染和处理条件下,293细胞的细胞裂解液用Flag、p85和ASK1抗体进行co-IP探针检测。(C类)与活动ASK1和非活动Akt相关的DAB2IP复合体。用DAB2IP-F或VC转染293细胞,将细胞裂解物与Flag抗体进行co-IP,然后用第页-ASK1(T845或S83)或第页-Akt(S473)抗体。(D类)DAB2IP中p85结合关键脯氨酸残基的体外分析。DAB2IP中的四个脯氨酸簇加下划线,并用丙氨酸替换以生成AA1、AA2和AAA。用GST-p85-SH3融合蛋白拖出细胞裂解产物,并用Flag抗体进行检测。

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