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图3

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vBcl-2突变蛋白的抗自噬活性。

(A) 用GFP-LC3转染稳定表达WT的NIH3T3细胞和突变型vBcl-2。在转染后18小时,细胞在正常或饥饿条件下培养4小时。自噬被量化为三个独立实验综合结果的平均值±SEM。**,<0.0001. (B) 用GFP-LC3转染表达WT或所示vBcl-2突变形式的NIH3T3细胞,并用2µM雷帕霉素处理6 h。使用倒置荧光显微镜(顶部)检测GFP-LC3。自噬被量化为三个独立实验综合结果的平均值±SEM。比例尺,5µm;**,<0.01。(C) 如图所示,用2µM雷帕霉素处理稳定表达野生型或突变型vBcl-2的NIH3T3细胞。然后用抗LC3抗体的免疫印迹法测定LC3-I和LC3-II水平(顶部)。底部显示了正常和雷帕霉素处理条件下LC3-II/LC3-I比率的密度定量。从三个独立的实验中获得了类似的结果。

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