图5

A类，PTIP复合物甲基化组蛋白H3。表达F-PTIP的HeLaS细胞核提取物中抗FLAG M2-糖免疫沉淀蛋白(左侧面板)或F-PA1(右侧面板)以重组组蛋白H3或核心组蛋白为底物进行HMT分析。分析产物在SDS-PAGE上分离，用考马斯蓝染色，然后进行荧光照相。B类，PTIP复合物甲基化K4上的组蛋白H3。四个μg组蛋白H3甲基化A类进行了40次Edman降解和闪烁计数。组蛋白H3残基的位置在底部.C类，内源性PTIP复合体亚基与HMT活性强健相关。HeLaS核提取物与所示抗体进行免疫沉淀。免疫沉淀物对未修饰组蛋白H3肽（残基1–20）进行HMT分析。D类用表达F-PA1或载体的HeLaS细胞制备的核提取物用抗FLAG M2-糖免疫沉淀，然后进行HMT分析。E类，相关HMT复合物的酶活性不需要PTIP。SV40T永生化巴基斯坦国家石油公司^{flox/flox公司}用逆转录病毒表达载体感染MEF细胞系(Vec公司)或Cre删除巴基斯坦国家石油公司基因。制备核提取物，并用所示抗体进行免疫沉淀。免疫沉淀物对未修饰组蛋白H3肽（残基1–20）进行HMT分析(左侧面板)和Western blot分析(右侧面板).