麦格纳森医学。作者手稿；PMC 2009年1月5日提供。
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美国国立卫生研究院：NIHMS83785
乳酸和丙氨酸作为前列腺癌代谢生物标志物的评价1活检组织的H HR-MAS光谱
,1,4 ,1 ,1 ,1 ,1 ,2,三 ,2 ,4 ,1 ,1 ,5和1,4,*
梅·布里特·特塞姆
1美国加利福尼亚州旧金山加利福尼亚大学放射系
4美国加利福尼亚州旧金山加利福尼亚大学旧金山分校泌尿系
马克·G·斯旺森
1美国加利福尼亚州旧金山加利福尼亚大学放射系
Z.劳拉·塔巴塔拜
2美国加州大学旧金山分校病理学系
三美国加利福尼亚州旧金山退伍军人管理医疗中心
Katsuto Shinohara公司
4美国加利福尼亚州旧金山加利福尼亚大学旧金山分校泌尿系
英格丽德·S·格里布斯塔德
5挪威特隆赫姆挪威科技大学循环与医学成像系
约翰·库哈内维奇
1美国加州大学旧金山分校放射科
4美国加利福尼亚州旧金山加利福尼亚大学旧金山分校泌尿系
1美国加州大学旧金山分校放射科
2美国加州大学旧金山分校病理学系
三美国加利福尼亚州旧金山退伍军人管理医疗中心
4美国加利福尼亚州旧金山加利福尼亚大学旧金山分校泌尿系
5挪威特隆赫姆挪威科技大学循环与医学成像系
摘要
本研究的目的是研究乳酸和丙氨酸作为前列腺癌代谢生物标志物的用途，使用1snap冷冻经直肠超声（TRUS）引导前列腺活检组织的高分辨率魔角旋转（HR-MAS）光谱。使用长回声时间转子同步Carr-Purcell-Meiboom-Gill（CPMG）序列，包括体内浓度电子参考（ERETIC）标准，测定82例良性和16例恶性活检中的乳酸和丙氨酸浓度（平均占核心的26.5%±17.2%）。在良性前列腺活检中观察到低浓度的乳酸盐（0.61±0.28 mmol/kg）和丙氨酸（0.14±0.06 mmol/kg），良性前列腺活检（主要是腺性前列腺活检）之间没有显著差异(N个=54）和基质(N个=28）患者之间的活检(N个=38）和不带(N个=44）临床活检阳性。在前列腺癌的活检中(P（P）<0.0001）乳酸（1.59±0.61 mmol/kg）和丙氨酸（0.26±0.07 mmol/kg.）增加，良性活检中与乳酸浓度重叠最小。这项研究首次证明良性前列腺活检组织中的乳酸和丙氨酸浓度非常低。含有5%癌症的活检组织中乳酸和丙氨酸浓度的显著增加可用于超极化13前列腺癌患者的C光谱成像（SI）研究。
关键词：乳酸、丙氨酸、HR-MAS、ERETIC、超极化13C类
对前列腺癌患者进行的MRI和三维MR波谱成像（MRI/3D-MRSI）联合研究表明，可以显著改善前列腺癌的临床定位(1-6)，改善囊外扩张（ECE）的预测(7,8)并提供前列腺癌侵袭性的测量(9,10)和治疗反应(11-13)。然而，随着血清前列腺特异性抗原（PSA）筛查和系统性经直肠超声（TRUS）引导的活检的广泛应用，近年来前列腺癌的早期检出率增加，分期显著降低(14,15)。因此，越来越需要额外的生物标记物和多参数成像方法，以预测早期癌症的转移潜力，并在积极监测、传统治疗和新兴治疗的临床试验期间用于监测患者。
虽然目前市场上可买到的临床MRI/MRSI前列腺检查依赖于胆碱、柠檬酸盐和多胺代谢的变化，但由于难以抑制前列腺周脂质重叠的大信号，乳酸和丙氨酸在很大程度上被忽视(16)。新超极化13C MRS技术(17-19)降脂和光谱编辑的进展1H MRS公司(20,21)提供机会观察临床MRI/MRSI检查中乳酸和丙氨酸的变化。转基因小鼠前列腺癌（TRAMP）的研究(22)前列腺癌模型显示极化增强超过50000倍13丙酮酸C，提供足够的信噪比（SNR）以实现高时空分辨率13原发性和转移性前列腺癌区域代谢产物乳酸和丙氨酸的C MRS(18)。这些研究表明，在前列腺癌小鼠模型中，乳酸显著增加，这与病理分级有关。
以前的生物化学(23)和1组织提取物的H光谱研究(24-26)、和更新的1高分辨率魔角旋转（HR-MAS）光谱研究(27)据报道，前列腺癌组织与良性前列腺组织中乳酸和/或丙氨酸的变化不一致。这些差异可能由不同的实验方法和使用的组织来源引起，即术后、经尿道电切术（TURP）或活检。手术后的前列腺组织是在一种未知的代谢降解状态下获得的，因为在组织采集之前，前列腺可以从其血液供应中移除≥3小时。在缺血期间，会发生显著的厌氧糖酵解，显著影响葡萄糖、丙氨酸和乳酸的浓度(27)。由于活检组织可以在几秒钟内采集和冷冻，因此它们提供了体内乳酸和丙氨酸代谢的更准确的离体“快照”。在本研究中，定量1H HR-MAS光谱，使用电子参考获取体内浓度（ERETIC）方法(28,29)，应用于快速冷冻前列腺活检组织，以在对相同组织进行病理分析之前确定乳酸和丙氨酸的浓度。对含有良性腺体和间质组织的活检组织、活检结果阳性和阴性男性的良性样本以及含有≥5%前列腺癌的活检组织中的乳酸和丙氨酸浓度进行比较，以确定这些代谢物是前列腺癌的可靠标记物。
材料和方法
受试者和TRUS引导的活检程序
这项研究得到了我们机构审查委员会（IRB）的批准，并获得了所有患者的知情同意。共对82名未经治疗的患者进行了130次TRUS引导的前列腺活检（平均年龄=64±10岁[范围：35-83岁]；平均PSA=5.6±18.4μg/升[范围：1.6-115.9μg/升]）。在活检过程中，患者被置于侧卧位，并使用表面麻醉剂（胡里卡因®凝胶；Beutlich Pharmaceuticals，Waukegan，IL，USA）用于直肠指诊。将5.0-7.5 MHz TRUS探头放入直肠，由经验丰富的泌尿科医生获得灰度和彩色多普勒超声图像。然后将1%利多卡因（10 ml）从前列腺底部到顶端注射到前列腺两侧的侧缘。在TRUS的指导下，使用18号针（~15 mm×1 mm）进行8-10芯样活检以进行临床诊断，然后从可疑癌症的低回声区域和周围区的对侧采集两次额外的研究活检。活组织切片立即放置在单个冷冻瓶中，并在干冰（≤15 s）上进行snap冷冻，然后储存在-80°C下，并在收获后2周内进行分析。
样品制备和1H HR-MAS光谱学
在样品制备时，从活检芯两端切下约1mm的组织，以去除肉眼无法识别的前列腺周围脂肪。称量修剪后的活检组织（平均值=5.2±1.1 mg），然后将其转移到一个20μl防泄漏锆HR-MAS转子中，该转子含有3.0μl氧化氘和0.75 wt%钠-3-三甲基硅丙酸-2,2,3,3-d4（D）2O+TSP）。然后，在约2-4分钟的处理时间后，组装转子并将其放入光谱仪中。1在11.7 T（500 MHz1H） 使用配备有4mm gHX纳米探针的Varian INOVA核磁共振波谱仪（Varian Inc，Palo Alto），1°C和2250 Hz自旋速率。在预饱和延迟2秒、采集时间2秒、40000个点、20000赫兹谱宽、128个瞬态和四个稳态脉冲的情况下，获得了完全松弛的脉冲采集光谱。此外，转子同步的Carr-Sourcell-Meiboom-Gill（CPMG）(30)使用spin-echo序列过滤来自重叠脂质和大分子的信号，参数与上述相同，但根据脂质峰的大小，回波时间（TE）为144或288ms；分别为256或512瞬态；和16个稳态脉冲。验证用于T型2在三个含有更高水平乳酸和丙氨酸的手术组织样本上，72、144和288ms TEs也获得了活检衰减、CPMG光谱。
为了量化前列腺代谢物，使用PBox（Varian Inc.，Palo Alto，CA，USA）创建了一个合成射频信号（ERETIC），并在数据采集期间进行传输(31)。选择ERETIC峰值的相位和振幅以匹配频谱中的其他峰值，并在采集过程中使用0 dB功率、3.5 Hz半高的全宽和等于-0.5 ppm的偏移频率传输信号。使用D的标准溶液每周校准ERETIC信号2O+TSP、乳酸和丙氨酸。还获得了二维（2D）全相关光谱（TOCSY）数据，并用于排除活检样本，其中乳酸和丙氨酸峰因麻醉软膏而被共振污染，而麻醉软膏未被T型2过滤器。TOCSY光谱是使用转子同步绝热（WURST-8）混合方案获得的，具有1s的预饱和延迟、0.2s的采集时间、40-ms的混合时间、24个瞬态/增量、20000×6000Hz的谱宽、4096×64个复数点和1h的时间(32)。根据1D和2D光谱结果，130例活检中共有32例被认为是由于脂质和/或局部麻醉剂（主要是聚乙二醇）的光谱污染而无法使用。
1HR-MAS光谱数据处理和量化
使用ACD Labs 1D和2D NMR处理器（版本9；ACD/Labs，加拿大多伦多）离线处理和显示数据。自由感应衰变（FID）被零填充到65K点，用0.5-Hz的“匹配”指数滤波器变迹，并进行傅立叶变换。如前所述，对每个光谱进行手动定相和基线校正(27)。分析中使用的98个光谱表明，乳酸和丙氨酸共振分辨率很高，没有重叠的脂质或其他污染物。通过整合峰面积和校正T型2使用先前确定的回波延迟期间的衰减T型2乳酸（0.251 ms）和丙氨酸（0.208 ms）的松弛时间(27)根据等式[1]:
其中Ã米=代谢物校正面积T型2，A米=代谢物面积，τ=TE，以及T型2=代谢物的松弛时间。根据以下公式计算了相对于ERETIC信号峰面积的浓度等式[2]:
其中Ae（电子）=ERETIC信号面积，[He（电子）]=与ERETIC信号相关的标准质子摩尔数，单位：mmol，nHe（电子）=ERETIC的质子数(N个=1），nH米=乳酸和丙氨酸双链对应的质子数(N个=3），组织质量=前列腺活检质量（kg），[M]=代谢物浓度（mmol/kg）。
组织病理学分析
以下内容1H HR-MAS分析，活检组织放置在25×20×5mm三冷冻模具，冷冻在Tissue-Tek®最佳切割温度（OCT）组织包埋介质（Fisher，Pittsburgh，PA，USA）中的干冰上，储存于-80°C。使用Leica CM1850低温恒温器（Leica Microsystems，Wetzlar，德国）以5–7μm的间隔和-22°C的温度对组织进行切片，将其放置在单个组织切片上，并使用标准方案用苏木精和伊红（H&E）染色。通常，沿着活检长轴进行三个切片，以获得对核心的完整病理评估，如果需要确认是否存在癌症，则切割其他切片进行高分子量角蛋白染色。两位经验丰富的前列腺病理学家对载玻片进行了回顾，并评估了每个核心中良性腺上皮、基质、前列腺上皮内瘤变（PIN）、良性前列腺增生（BPH）、慢性炎症（前列腺炎）和前列腺癌的百分比。还记录了癌症的Gleason评分，其中2（1+1）为最不具侵袭性，10（5+5）为最具侵袭性。病理学检查中还发现PIN、慢性炎症、杏仁体（凝固分泌物）和萎缩的平均百分比，如果混杂因素的百分比大于核心区域的10%，则将样本排除在健康组之外。
统计
使用线性混合效应模型程序比较健康组织和癌组织中乳酸和丙氨酸的代谢物浓度(33)，说明同一患者的重复测量。该模型以乳酸和丙氨酸为因变量，疾病状态为固定效应，患者个体为随机效应。这样就消除了这些患者重复采样的影响。具体来说，12名患者各做了两次良性活检，一名患者做了两个癌症活检。使用JMP（SAS Institute，2005，6.0版）分析数据，假设显著性水平为P（P）< 0.05.
结果
显示出典型的完全放松、水预饱和1（a）以腺为主的良性组织（5.1 mg，40%腺组织和60%间质组织）和（b）格里森3+3前列腺癌组织（5.7 mg，70%癌组织和30%间质组织）的HR-MAS光谱和相应的组织病理切片（H&E）。144-ms CPMG光谱中的乳酸到丙氨酸区域如插图所示。2250 Hz的旋转速率导致最小的病理降解，同时将最显著的侧带（残留水的侧带）置于约0.5 ppm，这超出了所分析的代谢物的范围。与之前报道的手术组织相似(27,34,35)良性前列腺组织中柠檬酸盐（2.62 ppm时为双倍）和多胺、精胺、精脒和腐胺（1.78、2.10和3.11 ppm时为复合倍数）含量较高，在癌症光谱中减少或缺失。相反，与良性腺组织和间质组织相比，癌组织中含胆碱代谢物胆碱（Cho，singlet at 3.21 ppm）、磷酸胆碱（PC，single at 3.23 ppm）和甘油磷酸胆碱（GPC，singlet at 3.24 ppm）升高。广泛的脂质和大分子共振重叠了水预饱和脉冲采集光谱中的乳酸（1.33 ppm）和丙氨酸（1.49 ppm）双峰。CPMG实验（144或288 ms）有效地去除了这些广泛的成分，扩张的区域显示，与良性前列腺活检相比，癌症中的乳酸和丙氨酸水平更高。重复CPMG实验还表明，在1°C和2250 Hz转速下，45分钟和80分钟时，乳酸和丙氨酸浓度分别平均增加3.6%±9.0%和0.6%±5.7%，表明HR-MAS实验过程中变化最小。
代表1H HR-MAS光谱和相应的组织病理切片(一)良性主要为腺性（40%为腺性，60%为间质）和(b条)前列腺癌（70%Gleason 3+3）活检组织。显示了主要代谢物、TSP和ERETIC共振。144-ms CPMG光谱中的乳酸到丙氨酸区域如插图所示。
病理学上，82例活检为良性，16例为前列腺癌。良性样本平均有21%的腺组织（0%至40%）和79%的间质组织（60%至100%）。良性组中，样本被归类为5-10%的前列腺炎(N个=7），10-30%BPH(N个=4），10%淀粉体(N个=1），10%萎缩(N个= 1). 在癌症组织中，活检芯平均包含26.5%±17.2%的癌症（范围：5-80%）。Gleason得分的分布为Gleason 3+3(N个= 10), 3+4 (N个= 3), 4+3 (N个= 1), 4+4 (N个=1）和4+5(N个= 1). 由于16例癌症活检中只有6例Gleason评分大于6，因此无法确定乳酸和/或丙氨酸浓度与癌症分级之间是否存在相关性。临床和研究活检的病理检查表明，38名患者的活检结果为阳性（Gleason评分：3+3、3+4、4+3、4+4、4+5），44名患者没有癌症证据。总共59%的患者之前进行过活检，其中19名患者（23%）为阴性，29名患者（35%）为阳性。所有临床活检阴性的患者也有阴性的研究活检。
乳酸浓度显著增加(P（P）<0.0001）前列腺癌与良性前列腺活检组织。良性和恶性前列腺活检组织中的绝对乳酸浓度显示为癌组织中的平均乳酸浓度为1.59±0.61 mmol/kg(N个=16）和良性组织中0.61±0.28 mmol/kg(N个= 82). 在82例良性活检中，只有15例样本的个别乳酸浓度与恶性样本中观察到的浓度重叠。然而，与良性样本相比，癌症样本的标准偏差（SD）要高得多。良性前列腺活检中的乳酸浓度也根据活检是否主要包含基质组织（>75%）或主要腺体组织（>25%）进行分离。无显著差异(P（P）>0.05），N个=54）与主要为腺性（0.61±0.25 mmol/kg，N个=28）前列腺活检组织。
答：良性和恶性前列腺活检组织中的乳酸浓度。良性组织和癌组织之间观察到最小重叠（15/82）。b：良性和恶性前列腺活检组织中丙氨酸浓度。良性组织和癌组织之间存在中度重叠（39/82）。
丙氨酸浓度(P（P）<0.0001），前列腺癌患者的前列腺癌发病率明显高于良性组织。良性和恶性前列腺活检组织中的丙氨酸浓度显示为恶性标本中丙氨酸平均浓度为0.26±0.07 mmol/kg(N个=15），良性样品中0.14±0.06 mmol/kg(N个= 82). 良性和恶性样本中的丙氨酸浓度比乳酸重叠更多，良性组织中的SD与癌症组中的SD相同。在82份良性样本中，39份样本的丙氨酸浓度与癌症样本中检测到的浓度重叠。如果去除丙氨酸浓度最低的癌症样本，82个样本中只有6个重叠。没有显著差异(P（P）>0.05）之间的丙氨酸水平（0.13±0.05 mmol/kg，N个=54）或主要为腺体（0.16±0.06 mmol/kg，N个=28）前列腺组织。
根据临床诊断，还分离了良性组织样本中观察到的乳酸和丙氨酸浓度。共有44例前列腺活检来自活检阴性的患者，38例来自活检阳性的患者。无显著差异(P（P）>0.05））在活检阳性和阴性患者的良性活检组织中观察到乳酸（阴性：0.61±0.28mmol/kg vs.阳性：0.60±0.29mmol/kg）和丙氨酸（阴性：0.14±0.04mmol/kg对阳性：0.15±0.08mmol/kg.）浓度。
讨论
健康的前列腺组织被描述为呼吸速率低、厌氧糖酵解程度高、有氧糖酵化程度高(36,37)。这是因为健康前列腺上皮细胞具有合成和分泌大量柠檬酸盐的独特功能，而不是将其用于能量生产或脂肪生成(36,37)。有人提出，这种低效和低水平的能量生产不足以使细胞完成对前列腺癌生长和增殖至关重要的合成和生物能量需求(36,37)。总的来说，癌症与糖酵解通量增加有关，高乳酸浓度与更具侵袭性的疾病和转移有关，而低乳酸浓度则显示出总体更长的无病生存期(38-41)。氨基酸丙氨酸是葡萄糖利用的另一个重要最终产物，在细胞溶质氨基酸转化和蛋白质合成中是必需的(42)。丙氨酸和柠檬酸也是谷氨酸氧化的最终产物，谷氨酸被发现是癌症患者呼吸能量的主要来源(42)。有人认为，这种替代途径是维持脂肪生成/胆固醇生成所必需的，而脂肪生成/胆甾醇生成是增殖癌细胞中细胞膜形成所必需的(36).
由于近年来前列腺癌的早期检测和降级，需要新的生物标记物来更好地识别和区分潜在的侵袭性癌症和非侵袭性癌症。在这项研究中，乳酸和丙氨酸被研究为前列腺癌的潜在生物标记物。1H HR-MAS光谱法提供了TRUS引导前列腺活检的高质量光谱，参考方法ERETIC对完整活检组织中乳酸和丙氨酸浓度的绝对定量非常可靠。与之前报告的手术样本中的乳酸浓度相比（约45 mmol/kg）(27)，在良性前列腺活检中观察到非常低的浓度（<1.0mmol/kg）。这表明，在活检采集过程中（≤15 s）发生了最小程度的厌氧糖酵解，因此活检可以更好地“快照”体内代谢。此外，实验期间乳酸（3.6%）和丙氨酸（0.6%）的最小变化表明，活检组织非常适合糖酵解研究。
前列腺癌活检中发现的乳酸浓度显著增加，这与之前对其他人类癌症中乳酸的研究一致(38-41)。结论是，实体肿瘤中的高乳酸浓度不仅是缺氧的替代物，而且是肿瘤中乳酸永久生成和微循环低效之间的平衡(41)。这可以用“Warburg效应”来解释，即即使在氧气存在的情况下，恶性细胞也会产生高乳酸。因此，有氧糖酵解增加可能是癌细胞的基本特性。乳酸还被发现可以通过激活透明质酸合成来提高肿瘤的恶性程度(43)，生长因子VEGF的上调(44)和缺氧诱导因子HIF-1α(45)。这些机制为转移性传播创造了有利条件。因此，前列腺癌组织中乳酸的积累可能反映肿瘤的恶性程度，并可能与疾病的结局有关。乳酸脱氢酶（LDH）同工酶在糖酵解途径中催化乳酸和丙酮酸的相互转化。一些研究表明，LDH在其他癌症类型中上调，如卵巢癌(46)，结直肠癌(47)和肺癌(48)。因此，前列腺癌组织中LDH水平的升高可能有助于乳酸浓度的升高。
前列腺癌组织中丙氨酸浓度显著升高的观察结果支持了肿瘤恶性程度与糖酵解通量增加相关的理论，也符合肿瘤中蛋白质合成增加的需要(36)。此前只有少数研究调查了与癌症相关的丙氨酸水平，但目前的结果与一项研究一致，该研究表明谷氨酸氧化可能是肿瘤细胞呼吸能量的主要来源(42)。谷氨酸主要被转氨化为丙酮酸以形成丙氨酸，在这种情况下，丙氨酸浓度的增加可能是增殖癌细胞需要膜生成（脂肪生成）的结果(36)。此外，丙酮酸转氨为丙氨酸是由丙氨酸转氨酶（ALT）催化的；然而，还需要进一步的研究来确定前列腺癌组织中ALT的活性。丙氨酸浓度的增加也可能源于癌症引起的细胞蛋白分解代谢。这项研究表明，丙氨酸是前列腺癌组织中的一个重要生物标记物，但还需要进一步研究，以找到前列腺癌中丙氨酸利用的潜在生化途径。
越来越多的公开数据表明，MRSI提供的代谢信息结合MRI提供的解剖信息可以显著提高前列腺癌范围和位置的临床评估(1-6)，囊外扩散(7,8)和侵略性(9,10)。全世界医院有数千台全身1.5T核磁共振扫描仪，并且有商业化的核磁共振成像/核磁共振成像软件包，这将允许这些技术的常规临床应用。尽管它有价值，但MRI/MRSI联合检查已经认识到1.5T的局限性，包括假阳性和假阴性结果的可能性，特别是在早期癌症患者中(15)。在前列腺癌患者的1.5T MRI/MRSI研究中，乳酸和丙氨酸等新的生物标记物可以减少假阳性和阴性的数量。在当前的商业1.5T MRI/MRSI包中，波谱中的乳酸和丙氨酸区域不受刺激，无法将前列腺周围脂质污染降至最低。然而，随着体积选择、外体素抑制技术和高场（3T）扫描仪的改进，使用光谱空间射频编辑序列检测乳酸和丙氨酸变得可行(21).
此外，新的超极化13磁共振成像技术有可能在未来的临床研究中利用乳酸和丙氨酸作为生物标记物。由于超极化提供了前所未有的核磁共振信号增强（约50000倍）13C技术，丙酮酸转化为乳酸和丙氨酸的过程可以在不到一分钟的时间内无创检测到(49)因此，细胞的糖酵解状态以及正常组织和癌组织之间的代谢差异可以被量化和绘制(49)。因此，本研究中观察到的乳酸和丙氨酸的变化可用于提高使用乳酸和丙酸编辑的人类前列腺癌的临床诊断和特征1H或超极化13C SI序列。
前列腺癌被发现具有广泛的生物恶性肿瘤，组织病理学异质性（区域性和细胞性）是表征癌症和不同肿瘤等级的一个挑战。Gleason评分系统通过对癌细胞构建类似于正常前列腺的腺体的有效性进行评分来评估这种异质性。然而，病理评分往往存在差异，因此本研究基于两位病理学家的平均读数。对于前列腺活检组织，病理评分之间有很好的一致性。良性前列腺组织也是异质性的，本研究考虑了慢性炎症（前列腺炎）和前列腺增生（BPH）等混杂因素。通过收集更多的样本，这些混杂因素可能会被它们的代谢模式所分离。在未来的研究中，乳酸盐和/或丙氨酸的浓度可能作为诊断这些良性疾病的生物标志物具有重要意义。同样，对不同前列腺区域的代谢研究将有助于了解区域代谢和病理关系。
本研究存在一些显著的局限性。尽管活检组织提供了更准确的体内代谢快照，但与手术样本相比，污染物的数量有所增加。这些污染物来源于前列腺周围脂质污染和TRUS手术前使用的表面麻醉剂（胡里卡因®；Beutlich）。这导致32（约25%）的活检样本在当前研究中无法使用。此外，每个患者只能获得两个样本，样本量远小于手术标本。最后，本研究中含有癌症的活检数量相对较少，这与前列腺特异性抗原时代前列腺癌的衰退相一致，限制了我们评估乳酸和丙氨酸浓度随癌症等级变化的能力。然而，为了将手术标本中发生的厌氧糖酵解对乳酸和丙氨酸浓度的影响降至最低，使用活检组织对本研究至关重要。
总之，通过对snap冷冻前列腺活检进行定量HR-MAS光谱分析，可以确定良性前列腺活检样本中的乳酸和丙氨酸浓度非常低，并且在含有前列腺癌的活检样本中显著升高。这些代谢物浓度的升高幅度很可能是活检核心的癌症百分比和癌症病理分级的函数，但这需要在涉及大量恶性活检的研究中确定。含有低至5%癌症的活检样本中乳酸和丙氨酸的浓度显著增加，良性和恶性活检之间乳酸浓度的最小重叠表明，乳酸和可能的丙氨酸将是有用的生物标记物，可用于超极化13前列腺癌患者的C MRSI分期检查。
鸣谢
资助者：国立卫生研究院；批准号：R21 EB05363、R01 CA102751、K01 CA96618；资助者：美国癌症协会；批准号：RSG-05-241-01-CCE；资助者：加利福尼亚大学；批准号：LSIT01-10107，ITL-BIO04-10148。
参考文献
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