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图3。

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过量Atg4B之间形成稳定络合物C74A号和LC3阻止访问Atg7。(A) 293A细胞稳定表达空载体(Mock)或mStrawberry-Atg4BC74A号(附件4BC74A号)用Myc-LC3-HA(WT)或Myc-LC3转染G120A型-HA(GA)。转染后36小时,细胞在生长培养基或HBSS中培养2小时,并进行Western blotting。从顶部面板,抗RFP、抗Myc和抗α-微管蛋白。(B) 用携带3xFlag标记的野生型Atg4B(WT)、Atg4B的腺病毒感染PC12细胞C74A号(CA)或Atg4BC74S公司(CS)。培养40h后,用抗Flag M2结合琼脂糖珠对细胞裂解物进行免疫沉淀。使用每个抗体通过Western blotting检测共免疫沉淀分子。从顶部面板,反旗帜、反LC3和反GATE16。显示了总细胞裂解物(输入)和免疫沉淀蛋白(IP)。(C) 293A细胞稳定表达空载体(Mock)或mStrawberry-Atg4BC74A号(第4B页C74A号)如图所示,转染GFP-LC3和Myc-Atg7。转染后36小时,使用每种抗体通过Western blotting检测细胞裂解物。从顶部面板,抗RFP、抗myc、抗GFP和抗α-微管蛋白。

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  • 图1。
  • 图2。
  • 图3。
  • 图4。
  • 图5。
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