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《维罗尔杂志》。1984年4月;50(1): 248–254.
数字对象标识:10.1128/jvi.50.1.248-254.1984年
预防性维修识别码:PMC255605型
PMID:6321792

用凝胶电泳检测哺乳动物细胞中的环状和线形疱疹病毒DNA分子。

摘要

描述了一种简单的凝胶技术,用于检测真核细胞中的大的、共价封闭的环状DNA分子。该程序基于Eckhardt(T.Eckhardd,Plasmid 1:584-5881978)的电泳技术,用于检测细菌质粒,并经过修改,用于检测哺乳动物细胞中的环状和线形染色体外疱疹病毒基因组。琼脂糖凝胶孔中悬浮细胞的温和溶解,然后进行高压电泳,可以从大量细胞DNA中分离染色体外DNA。携带EB病毒、saimiri疱疹病毒和ateles疱疹病毒基因组的细胞中的环状病毒DNA,在这些凝胶中可以检测到与208千碱基的细菌质粒DNA相结合的尖锐带。Epstein-Barr病毒产生细胞株也显示出一条160千碱基线性DNA的尖锐带。在温度变化后诱导病毒复制后,该线性带出现的动力学与这些细胞系中已知的EB病毒生成动力学相似。DNA转移到过滤器后的杂交显示,环状和线形DNA带是病毒特异性的,每个细胞可以检测到0.25个EB病毒基因组。该技术简单、快速、灵敏,所需细胞量相对较低(0.5 X 10(6)至2.5 X 10(6))。

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文章来自病毒学杂志由以下人员提供美国微生物学会(ASM)