《维罗尔杂志》。1988年6月；62(6): 1963–1973.
腺相关病毒通用转导载体：前病毒结构分析。
佛罗里达大学医学院微生物系，盖恩斯维尔32610。
摘要
我们使用两种腺相关病毒（AAV）载体将新霉素耐药基因导入人类细胞。其中第一个（dl52-91）保留了AAV rep基因；第二个（dl3-94）仅保留AAV末端重复和AAV多聚腺苷化信号（428个碱基对）。这两种载体都可以被包装成AAV病毒，并产生基本相同的前病毒结构。因此，病毒DNA包装（pac）、整合（int）、拯救（res）和复制（ori）所需的顺式序列中的AAV序列位于包含末端重复序列的284碱基对序列中。大多数G418r细胞株（73%）含有前病毒，当细胞被适当的辅助病毒超感染时，可以将其拯救（Res+）。一些产生了高产量的病毒DNA；另一名获救者的水平较低，为50倍。大多数Res+株系（79%）包含AAV基因组的串联重复序列（2到20个拷贝），该序列与细胞DNA随机整合。串联阵列中两个连续AAV拷贝之间的连接包含AAV终端回文的一个或两个拷贝。AAV和细胞序列之间的连接主要发生在AAV末端重复序列处或内部，但在某些情况下发生在内部AAV序列处。发现两个株系含有AAV DNA的游离上位拷贝。Res+克隆包含已删除的前病毒或已删除基因组的串联重复序列。偶尔，侧翼细胞DNA也会扩增。AAV DNA整合无重叠感染抑制。我们的结果表明，无论整合之前还是整合之后，AAV序列都是通过DNA复制来扩增的，并且复制机制与AAV裂解感染中使用的机制不同。此外，我们还描述了一种新的AAV通用转导载体dl3-94，它为插入外源DNA提供了最大的空间，并以高频率（80%）整合。
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文章来自病毒学杂志由以下人员提供美国微生物学会（ASM）
