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核DNA片段特异性标记原位识别程序性细胞死亡
摘要
程序性细胞死亡（PCD）在发育生物学和维持组织持续更新的稳态中起着关键作用。目前，它的存在主要是通过混合DNA提取物的凝胶电泳推断出来的，因为PCD被证明与DNA断裂有关。基于这一观察结果，我们在这里描述了一种在单细胞水平上原位显示PCD的方法的开发，同时保留组织结构。常规组织切片经蛋白酶预处理后，用生物素化聚dU标记缺口端，用末端脱氧转移酶导入，然后用亲和素结合过氧化物酶染色。反应是特异性的，只有位于PCD预期位置的细胞核被染色。初步筛查包括：小肠和大肠、表皮、淋巴组织、卵巢和其他器官。一项详细的分析表明，该过程是在核外围启动的，时间相对较短（从启动到细胞消除的1-3小时），PCD出现在成簇的组织中。该方法显示的组织-PCD的范围远大于核形态学检测到的细胞凋亡，从而为各种研究开辟了道路。
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选定的引用
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文章来自细胞生物学杂志由以下人员提供洛克菲勒大学出版社
