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Forskolin通过cAMP依赖机制抑制和逆转brefeldin A对高尔基形态的影响
摘要
布雷费尔丁A（BFA）导致高尔基蛋白迅速重新分布到内质网，没有可定义的高尔基体，并阻止蛋白质运输到细胞内的高尔基后腔室。在这项研究中，我们跟踪了BFA处理的活细胞中高尔基体的分解，这些活细胞被NBD-神经酰胺标记，并证明福斯科林可以抑制和逆转这一过程。在BFA处理5分钟的细胞中，观察到用NBD-神经酰胺标记的长管状突起从高尔基体中出现并延伸至细胞外周。在BFA中培养时间较长，NBD标记分散在内质网的精细网状结构中。福斯科林治疗抑制了BFA的这些作用以及BFA对高尔基体最早的形态学影响：110-kD高尔基体外周膜蛋白重新分配到胞浆。此外，福斯科林可以逆转BFA对蛋白质分泌的阻滞。Forskolin对BFA作用的抑制具有剂量依赖性和可逆性。高浓度的BFA可以克服福斯科林的抑制作用，这表明福斯科林和BFA以竞争方式相互作用。值得注意的是，在已经接触BFA的细胞中，forskolin可以逆转BFA的作用，导致110-kD高尔基体外周膜蛋白与高尔基体膜重新结合，并重新组装近核高尔基体复合体。膜透性cAMP类似物和cAMP磷酸二酯酶抑制剂均不能复制或增强福斯科林对BFA的抑制作用。不激活腺苷酸环化酶的1,9-二脱氧福斯科林在拮抗BFA方面与福斯科林同样有效。forskolin的衍生物7-HPP-forskolin-在结合腺苷酸环化酶方面不如forskolin.在拮抗BFA方面也同样有效。相反，一种类似的衍生物，6-HPP-forskolin，在与腺苷酸环化酶结合方面与forskolin等位，没有抑制BFA的作用。这些结果表明，福斯科林作为BFA的竞争性拮抗剂，利用cAMP依赖性机制来阻止和逆转BFA诱导的形态学效应。
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选定的引用
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文章来自细胞生物学杂志由以下人员提供洛克菲勒大学出版社
