荧光抗肌球蛋白对肌生成的分析

用荧光素标记成年鸡骨骼肌肌球蛋白抗体，作为染色试剂，分析鸡胚躯干成肌细胞的发育。通过三种方法研究肱肌节的成肌细胞：(一)标本固定、切片并用铁血红素染色。(b条)用相差显微镜对活成肌细胞和甘油提取制备的成肌细胞进行梳理和检查。(c（c）)用荧光抗肌球蛋白或荧光正常球蛋白对照溶液处理胚胎干，并用荧光显微镜和相差显微镜检查。使用甘油萃取材料和固定材料。在通过抗肌球蛋白染色和荧光显微镜研究的系列胚胎中，交叉变异肌原纤维首先出现在第16至17期胚胎中。条纹肌原纤维首先出现在18至19个胚胎阶段，在铁血红素染色的系列胚胎中，在通过甘油提取和相差显微镜研究的系列胚胎的22至23个阶段中。在每个序列中，在观察到横纹之前不久检测到没有明显横纹的肌原纤维。抗肌球蛋白的特异性染色仅发生在分化的成肌细胞中。成肌细胞内的抗肌球蛋白染色仅限于纤细肌原纤维的A带。以下观察结果表明，在第3天早期成肌细胞中出现的第一个精细的条纹结构非常成熟：（1）肌节的长度和内部细节与成人肌肉相似。（2） 如抗肌球蛋白染色所示，肌球蛋白在胚胎中的分布与成熟肌原纤维中的分布相同。（3）甘油提取的成肌细胞在暴露于ATP时剧烈收缩。肌节带模式的变化与ATP诱导的成年肌肉收缩过程中发生的变化无法区分。（4） 在胚胎成肌细胞和成熟肌肉中，ATP收缩被先前的抗肌球蛋白染色所阻断。这表明，早期肌原纤维横向生长为与肌膜相关的薄片，长度增长发生在伸长的成肌细胞的生长端。