内源性Rap1的定位。使用蔗糖进行MDCK细胞亚细胞分离,然后进行Optiprep梯度或生物素化细胞表面表达分析。EEA1、Na/K ATP酶和Rap1的免疫印迹分析是在总膜部分(TM)和对Optiprep获得的高尔基复合体(Golgi)、质膜(PM)或内体(Endo)高度富集的膜部分上进行的,或在生物素亲和纯化(biotin PM)获得的PM上进行的。结果代表了两个独立的实验。
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