培养巨噬细胞对结核分枝杆菌，溶酶体与噬菌体融合的观察

用电子显微镜研究了培养的小鼠腹腔巨噬细胞摄取结核杆菌的细胞学反应。方法包括基于系统测量细胞轮廓、薄切片中的吞噬体及其所含细菌的定量评估；将切片细菌分为明显受损和明显完好两类；用铁蛋白预先标记致密颗粒（次级溶酶体），以帮助确定吞噬体-溶酶体融合的发生和频率；通过光学显微镜和培养计数监测细菌的生长和活力。研究情况如下：强毒株H37Rv进行性感染；摄入之前被γ射线灭活的相同菌株；弱毒株感染（卡介苗）；以及表面活性剂Macrocyclon诱导的稳定毒力感染。在常规用于接种的细菌悬液中，约有一半的细菌是活的，与电子显微镜鉴定的完整和受损生物体的比例非常接近。在接种的巨噬细胞中，总是能发现一些含有完整杆菌的吞噬体，而另一些含有受损杆菌；但是，在接种前整个种群已经无法生存的情况下，或者在BCG感染的晚期，它们在细胞内变得如此活跃的情况下，受损生物体的比例增加，而完整生物体的比例下降。在所有实验中都获得了铁蛋白标记的溶酶体与某些含细菌的吞噬体融合的证据，但根据杆菌是否受损或完整，定期观察到显著差异。几乎所有含有受损杆菌的吞噬体都显示融合迹象；但是，当存在许多含有明显完整生物体的吞噬体时（如活跃繁殖的菌株H37Rv或该菌株被大环蛋白保持在稳定的生存水平，以及在感染的早期阶段的菌株BCG），溶酶体与这些吞噬体融合的迹象是罕见的。从这些发现可以推断出结核分枝杆菌在培养的巨噬细胞中，有致密颗粒与吞噬体不融合的趋势，从而避免了杆菌直接暴露于这些细胞器的内容物中。此外，据认为，致密颗粒与吞噬体融合，导致消化，是通过确认芽孢杆菌为非活性芽孢杆菌来确定的。讨论了对不同分枝杆菌感染的细胞学反应可能反映兼性和专性细胞内寄生之间基本性质的差异的可能性。