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细胞生物学杂志。1994年12月1日；127(5): 1395–1406.
数字对象标识：10.1083/jcb.127.5.1395
预防性维修识别码：PMC2120249型
PMID：7962098

酵母出芽蛋白Bem1p和Bem2p与Rho型GTPases的相互作用

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摘要

SH3结构域蛋白Bem1p是正常芽萌发和交配投射形成所必需的，这两个过程需要酿酒酵母皮层细胞骨架的不对称重组。为了鉴定与Bem1p在功能和/或物理上相互作用的蛋白质，我们筛选了与BEM1基因的突变等位基因表现出合成致死性的突变，以及其产物与BEM1蛋白质表现出双杂交相互作用的基因。CDC24是芽萌发所必需的，编码Rho型GTPase Cdc42p必需的GEF（鸟嘌呤核苷酸交换因子），在两次筛选中均得到鉴定。Cdc24p的COOH末端75个氨基酸位于GEF结构域之外，可以与缺乏两个SH3结构域的部分Bem1p相互作用。细菌表达的Cdc24p和Bem1p在体外相互结合，表明这种相互作用不需要其他酵母蛋白。从bem1合成致死筛选中产生的最常鉴定的基因是芽变基因BEM2（Bender和Pringle，1991）。摩尔细胞生物学。11:1295-1395），与IPL2等位基因（倍性增加；Chan和Botstein，1993年。遗传学。135:677-691). 在这里，我们表明Bem2p包含一个用于Rho型GTPase的GAP（GTPase激活蛋白）结构域，并且Bem2p的这一部分可以在体外刺激Rho1p（第二种必需酵母Rho类型GTPase）的GTPase活性。BEM2缺失的细胞变大且多核。这些和其他遗传、双杂交、生化和表型数据表明，多种Rho型GTPase控制酵母皮层细胞骨架的重组，并且这些GTPase的功能紧密耦合。此外，这些发现增加了Bem1p可能调节一种或多种GTPase或成为其作用靶点的可能性。

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文章来自细胞生物学杂志由以下人员提供洛克菲勒大学出版社