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细胞骨架相关凝集素：原位定位、体外重建和与固定化中间丝蛋白的结合
摘要
研究了果胶（Mr 300000）与中间丝和丝亚基蛋白的关联和相互作用。对各种培养细胞系（大鼠胶质瘤C6、小鼠BALB/c 3T3和中国仓鼠卵巢）和速冻细胞的整体细胞骨架进行免疫电镜观察，Triton X-100提取的大鼠胚胎成纤维细胞的深度复制品表明，plectin主要位于中间丝的连接点和分支点。使用从C6细胞纯化的波形蛋白和plectin进行的体外重组研究证实了这些结果。负染和旋转阴影标本的电子显微镜以及免疫电子显微镜证明，由这两种蛋白质混合物组装的丝状物被寡聚体plectin结构广泛交联；果胶结构在纤维表面的结合和交联形成没有明显的周期性。通过超速离心实验也显示了重组丝的凝集素交联。正如旋转阴影技术所揭示的，丝状结合的plectin结构是低聚物，主要由30-50 nm的中心球状核心区组成，带有延伸的丝状或丝状环。与蛋白水解降解的波形蛋白片段的固相结合表明，plectin与波形蛋白的螺旋杆结构域相互作用，波形蛋白是所有中间丝蛋白的高度保守的结构元件。因此，我们发现，plectin与胶质纤维酸性蛋白、三种神经丝多肽和皮肤角蛋白结合。这些结果表明，plectin是波形蛋白纤维的交联剂，也可能是其他中间纤维类型的交联剂。
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文章来自细胞生物学杂志由以下人员提供洛克菲勒大学出版社
