美国国家科学院院刊。2003年9月30日；100(20): 11400–11405.
β-catenin和cyclin D1在乳腺发育和肿瘤形成中的作用
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特蕾西·M·罗兰兹
*纽约大学医学院细胞生物学和皮肤病学系，纽约，NY 10016；和†乔治敦大学伦巴第综合癌症中心，华盛顿特区西北水库路3970号，20057-1468
Irina V.Pechenkina公司
*纽约大学医学院细胞生物学和皮肤病学系，纽约，NY 10016；和†乔治敦大学伦巴第综合癌症中心，华盛顿特区西北水库路3970号，20057-1468
莎拉·J·哈特塞尔
*纽约大学医学院细胞生物学和皮肤病学系，纽约，NY 10016；和†乔治敦大学伦巴第综合癌症中心，华盛顿特区西北水库路3970号，20057-1468
理查德·佩塞尔
*纽约大学医学院细胞生物学和皮肤病学系，纽约，NY 10016；和†乔治敦大学伦巴第综合癌症中心，华盛顿特区西北水库路3970号，20057-1468
帕梅拉·考恩
*纽约大学医学院细胞生物学和皮肤病学系，纽约，NY 10016；和†乔治敦大学伦巴第综合癌症中心，华盛顿特区西北水库路3970号，20057-1468
*纽约大学医学院细胞生物学和皮肤病学系，纽约，NY 10016；和†乔治敦大学伦巴第综合癌症中心，华盛顿特区西北水库路3970号，20057-1468
由David D.Sabatini传达，纽约大学医学院，纽约州纽约市，2003年7月21日
摘要
大量的间接数据表明细胞周期蛋白D1是介导β-catenin在乳腺组织中的作用的一个很有吸引力的候选药物。为了测试这些相关发现的功能意义，我们研究了青春期发育、妊娠和肿瘤发生期间小鼠乳腺中转录活性β-连环蛋白（ΔN89β-catenin）及其靶基因cyclin D1之间的遗传相互作用。我们的数据表明，细胞周期蛋白D1对于ΔN89β-catenin刺激的处女肺泡发育的启动是不可或缺的，对于从头开始男性肺泡的诱导和肿瘤的形成。事实上，缺乏细胞周期蛋白D1会加重和增强这些增生性和致瘤性ΔN89β-catenin表型。虽然肺泡发育是由ΔN89β-catenin以细胞周期蛋白D1诱导的依赖方式启动的，但在ΔN79β-caterin小鼠中发生了细胞周期蛋白D1的上调，其表达对于妊娠后期肺泡发育的完成仍然至关重要。因此，肺泡发育是一个两步过程，晚期肺泡发育中的cyclin D1活性不能被其他成功驱动早期增殖的β-catenin靶基因的活性所取代。
关键词：乳腺肿瘤，Wnt，细胞粘附，细胞周期，钙粘蛋白
β-连环蛋白是一种多功能细胞内蛋白。在粘附细胞中，它将钙粘蛋白细胞粘附分子连接到肌动蛋白细胞骨架，从而在稳定细胞-细胞粘附方面发挥重要作用。额外的β-连环蛋白池在细胞质和细胞核之间穿梭，并调节T细胞因子/淋巴增强因子DNA-结合蛋白的转录能力(1).
β-连环蛋白在典型Wnt-signaling通路中的作用已被广泛研究，最近的研究表明，它位于其他几个主要信号通路的中枢（参考文献。1以及其中的参考）。其中许多途径通过阻止N-末端结构域的磷酸化来稳定β-catenin并增强其转录能力。在乳腺中，N末端截短、稳定的小鼠乳腺肿瘤病毒（MMTV）-ΔN89β-catenin的表达会导致处女小鼠的早熟肺泡发育，并延迟乳腺肿瘤的退化和发展(2). 这些数据表明，β-catenin信号传导决定肺泡细胞的命运、存活和/或增殖。β-连环蛋白激活物（Wnt 1、3和10b）和抑制物（axin和一种显性负性β-连环素结构β-突变体）的过度表达分别刺激和损害肺泡发育，支持了这一概念(三–5).
目前已确定的β-catenin信号传导的多个靶基因中(www.stanford.edu/~rnusse/pathways/targets.html)细胞周期调节器cyclin D1（在图中称为cycD1）引起了特别的兴趣。过度表达或缺乏细胞周期蛋白D1或β-连环蛋白活性的小鼠之间的表型一致性表明，在正常乳腺发育期间，这些蛋白质之间存在功能联系。具体而言，MMTV-ΔN89β-catenin和MMTV-cyclin D1均诱导早熟乳腺发育和乳腺肿瘤(2,6). 此外，MMTV-ΔN89β-catenin在小鼠中诱导的各种表型伴随着细胞周期蛋白D1 mRNA水平的不当上调。此外，cyclin D1-null小鼠和表达β-catenin信号转导axin或β-突变体负调控因子的小鼠在肺泡发育中表现出类似的损伤(三,4,7–9). 最后，在人类乳腺癌中，β-catenin和cyclin D1的同时升高已被证明与不良临床结果相关(10).
总之，这些发现与人类和小鼠乳腺发育和肿瘤发生中β-连环蛋白信号传导和细胞周期蛋白D1上调之间的功能联系一致，但并未证明。为了测试这些相关发现的生理相关性，我们研究了在小鼠乳腺中表达稳定的β-连环蛋白（β-catenin）而其下游靶点cyclin D1不存在的情况下的作用。这些研究揭示了β-连环蛋白在青春期发育和肿瘤发生过程中对细胞周期蛋白D1的非依赖性作用，但在妊娠诱导的肺泡形成过程中，细胞周期蛋白D1是不可或缺的，其他β-连环蛋白靶基因无法绕过。
材料和方法
老鼠。转基因MMTV-ΔN89β-catenin FVBN小鼠与cyclin D1杂交+/–动物和由此产生的后代进行杂交，产生六种基因型(2,8). 一组60只雌性小鼠保持处女状态，第二组雌性小鼠在40天龄时交配并持续繁殖以增强转基因的表达。在肿瘤达到体重的5%之前，或在繁殖组260天时，或在处女组380天时杀死小鼠。使用Mann–Whitney对生存曲线进行统计分析U型测试。为了分析妊娠引起的乳腺变化，雌性小鼠在6周龄时交配，并每天检查阴道塞。通过观察胚胎的肢体发育阶段来确定妊娠期。
整座山，组织学，油红O染色，免疫组织化学。按照说明进行了整体和组织学分析(2). 对于油红O染色，10μm冰冻切片在40%甲醛中固定1分钟，并在自来水中清洗。切片在油红O（0.06%油红O/62.5%异丙醇）中在室温下染色10分钟，用水冲洗，并在苏木精中复染。对于免疫组织化学分析，根据制造商的说明进行抗原检索、用小鼠单克隆抗增殖细胞核抗原（1:200，DAKO）染色和用动物研究试剂盒（DAKO，Animal Research Kit）检测。对于兔多克隆抗酪蛋白血清（1:100），我们使用EnVision+系统、过氧化物酶抗兔IgG（DAKO），然后使用二氨基联苯胺。
Western Blot分析。按说明进行乳腺总蛋白提取物和Western blot分析(2)通过使用针对细胞周期蛋白D2、细胞周期蛋白D3（均为1:200，NeoMarkers，Fremont，CA）或E-cadherin（1:4000，BD Transduction Laboratories，Lexington，KY）的初级小鼠抗体，或针对细胞周期素E（1:200）、c-myc（1:500）、β-catenin（1:4000）（圣克鲁斯生物技术）的兔多克隆抗体，或绵羊抗细胞角蛋白8（1:1000，荷兰莱顿PickCell实验室）。二级抗体是与辣根过氧化物酶结合的抗鼠、抗兔（均为1:4000，Amersham Pharmacia）或抗羊（1:2000，ICN），并通过增强化学发光系统（Amersham-Pharmacia）进行可视化。
结果
Δ89号β-Catenin不需要Cyclin D1诱导初生乳腺早熟性肺泡发育。测试乳腺中β-catenin信号传导引起的细胞周期蛋白D1升高的生理相关性(2)，我们比较了细胞周期蛋白D1的表型+/+，细胞周期蛋白D1+/–和细胞周期蛋白D1–/–表达MMTV-ΔN89β-catenin转基因的室友。正如预期的那样，MMTV-ΔN89β-catenin沿着原始细胞周期蛋白D1的乳腺导管诱导小的球形突起，类似肺泡结构+/+和细胞周期蛋白D1+/–老鼠(). 令人惊讶的是，尽管cyclin D1–/–据报道，小鼠的肺泡发育受损(8,9)，ΔN89β-catenin转基因成功诱导女性cyclin D1性早熟发育–/–ΔBC小鼠(). 这种发展在年轻成年小鼠中以局灶性的方式发生，但随着年龄的增长变得更加普遍(). 细胞周期蛋白D1缺失的小鼠在生命早期发育迟缓，但最终达到正常大小。因此，这些早期表型代表了对转基因表达的反应增强的增生叠加在青春期发育迟缓上的影响。组织学分析表明，根据乳腺上皮细胞和腔分泌物中脂肪滴的存在判断，这些结构类似肺泡()抗酪蛋白抗体阳性染色(). MMTV-ΔN89β-catenin诱导增殖细胞核抗原的表达，增殖细胞核抗原是细胞增殖的标志，而不考虑细胞周期蛋白D1的缺乏(). 这些数据表明，ΔN89β-catenin以依赖于细胞周期蛋白D1的方式启动肺泡流变学发生，在这个阶段，在缺乏细胞周期蛋白D的情况下可以激发强烈的增殖反应。
ΔN89-β-catenin（ΔBC）在不含cyclin D1的处女小鼠中诱导性早熟乳房发育。所示为整体安装(A–D和A类′–D类′）和组织切片(E–G公司和E类′–克′）乳腺12周后(A类,A类′,B类、和B类′）和26周(C类–克和C类′–克'）苏木精和伊红染色的处女室友(E类和E类′），抗酪蛋白(F类和F类′）和抗增殖细胞核抗原（抗PCNA）(克和克'）抗体。
在转基因细胞周期蛋白D1中也观察到大的花状增生，扩展到脂肪垫的一半以上–/–ΔBC雄性()，含有分泌物()油红O脂肪染色阳性()含有酪蛋白(). 这些特征与怀孕6-10天时肺泡结构中的特征相似。因此，在没有妊娠或发情引起的上游激素刺激以及其下游靶基因cyclin D1的情况下，ΔN89β-catenin可以诱导男性和女性乳腺的肺泡分化和乳蛋白的表达和分泌。
ΔN89β-catenin在缺乏cyclin D1的情况下诱导男性乳腺的肺泡发育和乳蛋白表达。所示为整体安装(A类,A类'，和B类)和20周龄cyclin D1乳腺组织切片–/–(A类)和细胞周期蛋白D1–/–ΔBC(A类′–E类)苏木精和曙红染色的雄性小鼠(C类)，油红色O(D类)，和抗酪蛋白抗体(E类).
Δ89号β-连环蛋白不能修复妊娠期cyclin D1-Null小鼠乳腺肺泡扩张的缺陷。怀孕期间，细胞周期蛋白D1的肺泡迅速扩张+/+和细胞周期蛋白D1+/–老鼠。12天后的乳腺()怀孕17天()细胞周期蛋白D1+/+非转基因组和β-catenin转基因组之间的小鼠差异不大。在怀孕的激素刺激下，非转基因小鼠基本上“追赶”到了其转基因同窝小鼠早熟的发育阶段。有趣的是，考虑到β-连环蛋白在缺乏细胞周期蛋白D1的情况下能够刺激性早熟发育，并刺激其他几个促进细胞增殖的基因，这两个基因都是非转基因的()和转基因(B类'和D类′）细胞周期蛋白D1–/–窝友的肺泡扩张仍然受阻。
ΔN89β-catenin的表达并不能克服妊娠诱导的肺泡发育中的细胞周期蛋白D1-缺陷。图中显示了12.5天时的全部乳腺(A类,B类,A类'，和B类′）和17.5天(C类,D类,C类'，和D类′）妊娠期细胞周期蛋白D1+/+(A类–D类)和细胞周期蛋白D1–/–(A类′–D类′）存在（ΔBC）或不存在（非TG）转基因的小鼠。(E类)幼崽存活的平均百分比(
)或死亡(▪) 每种基因型在七窝中绘制。误差条代表SEM。
通过对不同cyclin D1基因型母亲的幼崽连续产仔五至七胎的存活率进行分析，进一步证明了这种发育障碍（一些组因肿瘤负荷过大而提前停止繁殖）(). 转基因小鼠出生的幼崽数量相等，无论其细胞周期蛋白D1的状态如何（细胞周期蛋白D1的平均值为6.3、6.3和6.6+/+，细胞周期蛋白D1+/–和细胞周期蛋白D1–/–然而，这些组之间的幼崽存活率差异具有统计学意义。值得注意的是，100%的幼崽出生于转基因细胞周期蛋白D1–/–母亲无法存活到断奶年龄，表明在缺乏cyclin D1的情况下，ΔN89β-catenin表型在统计学上显著加重(P（P）与cyclin D1中的幼崽存活率相比，≤0.005+/+ΔBC窝1和2）。这一发现与非转基因细胞周期蛋白D1中较温和的表型形成对比–/–不能哺育第一胎但在随后的胎中表现出进步的母亲(P（P）与细胞周期蛋白D1相比<0.002+/+第1胎和第2胎期间的母亲，但此后无显著值），以及cyclin D1+/+Δ哺乳第一胎但饲养后续胎（第一胎与第二胎）能力下降的BC小鼠=P（P）< 0.05; 第一对第三=P（P）< 0.003; 第一对第四=P（P）< 0.0007; 第一对第五=P（P）< 6 × 10–5) (2,8,9). 从这些数据中，我们得出了两个结论。首先，细胞周期蛋白D1中ΔN89β-catenin表型显著增强–/–老鼠。其次，在缺乏靶基因cyclin D1的情况下，ΔN89β-catenin不能指导完全功能乳腺的扩张。因此，其他ΔN89β-catenin靶基因不能补偿怀孕乳腺中的cyclin D1活性。
Δ89号β-Catenin可以独立于Cyclin D1诱导肿瘤。由于cyclin D1是β-catenin信号传导的靶基因，因此它可能是β-catanin诱导乳腺癌发生的重要介质(10,11). 为了解决这个问题，我们比较了MMTV-ΔN89β-catenin在细胞周期蛋白D1中诱导肿瘤的倾向+/+和细胞周期蛋白D1–/–室友。细胞周期蛋白D1之间无显著差异+/+ΔBC或细胞周期蛋白D1+/–ΔBC组，因此将这些组的数据合并。我们之前的工作已经证明，在FVBN菌株背景下，ΔN89β-catenin在繁殖小鼠中在≈4个月大时诱导肿瘤，在处女小鼠中在≈7个月大时诱导肿瘤，并且在本研究中观察到联合细胞周期蛋白D1的类似结果+/+ΔBC/细胞周期蛋白D1+/–ΔBC队列(2) (). 出乎意料的是，ΔN89β-catenin在cyclin D1中诱导了乳腺肿瘤–/–ΔBC小鼠与cyclin D1相比发病率增加+/+ΔBC/细胞周期蛋白D1+/–ΔBC组(). ΔN89β-catenin转基因诱发繁殖小鼠乳腺肿瘤的中位时间为186天（cyclin D1）+/+ΔBC/细胞周期蛋白D1+/–ΔBC小鼠和146.5天cyclin D1–/–ΔBC小鼠。统计分析（Mann–WhitneyU型生存曲线的测试结果表明，细胞周期蛋白D1与+/+ΔBC/细胞周期蛋白D1+/–ΔBCs和细胞周期蛋白D1–/–ΔBC组(P（P）< 0.002). 初生小鼠发生乳腺肿瘤的模式类似，但由于MMTV转基因表达减少，潜伏期更长(). 细胞周期蛋白D1–/–ΔBC小鼠肿瘤数量增加()并且每只老鼠受累的乳腺数量增加()与他们的细胞周期蛋白D1相比+/+ΔBC和细胞周期蛋白D1+/–ΔBC室友(P（P）肿瘤<0.002，P（P）<0.03（对于压盖）。在非转基因小鼠中未观察到肿瘤。上述发育和致瘤表型均显示出完全外显率，因此不受混合背景小鼠中发现的修饰基因的影响。组织学分析显示，不同cyclin D1基因型产生的腺癌没有明显差异（数据未显示）。这些结果表明，尽管ΔN89β-catenin能够并且确实上调其诱导的肿瘤中的cyclin D1蛋白水平，但β-catentin驱动的肿瘤发生可以独立于乳腺中的cylicn D1活性进行。事实上，cyclin D1的缺失导致肿瘤发病率和发生率增加，这表明其活性可能对β-cateninin诱导的乳腺肿瘤形成起到抑制作用。
细胞周期蛋白D1增强乳腺肿瘤形成–/–ΔBC小鼠。(A类)细胞周期蛋白D1–/–ΔBC小鼠（红线）比转基因细胞周期蛋白D1更快地发展肿瘤+/+ΔBC或细胞周期蛋白D1+/–ΔBC室友组合（灰色虚线）。处女鼠（▴）表现出与繁殖鼠相同的趋势(▪) 但需要更长的时间才能表现出这种表型。每只小鼠的平均肿瘤数(B类)以及每只小鼠受累乳腺的平均数量(C类)为所示的各种基因型绘制。误差条代表SEM(D类)未受累乳腺（U）和细胞周期蛋白D1肿瘤（T）总蛋白的蛋白质印迹+/+ΔBC和细胞周期蛋白D1–/–ΔBC小鼠用针对所示蛋白质的抗体进行探测。K8，细胞角蛋白8；E-cad、E-cadherin。
为了研究ΔN89β-catenin在缺乏cyclin D1的情况下驱动乳腺肿瘤发生的机制，对其他对细胞周期有序进行重要的蛋白质进行了Western blot分析(). 无论细胞周期蛋白D1状态如何，与未受影响的腺体相比，转基因小鼠大多数肿瘤中癌基因和β-连环蛋白靶点c-myc的蛋白水平均增加。在一些乳腺和肿瘤的裂解液中检测到细胞周期蛋白D2、D3和E，但在细胞周期蛋白D1中没有以一致的方式上调–/–ΔBC肿瘤。所有肿瘤继续表达ΔN89β-catenin转基因蛋白。
讨论
为了明确检测cyclin D1是否是乳腺发育和癌症中β-catenin信号传导的重要效应器，我们评估了在缺乏cyclin D的情况下表达MMTV-ΔN89β-catening的后果。我们的数据表明，乳腺导管细胞群中β-catenin的稳定可启动肺泡发育，刺激乳蛋白的表达和分泌，并在缺乏cyclin D1的情况下诱发乳腺肿瘤。尽管β-catenin具有启动早熟和从头开始在没有cyclin D1的情况下，在妊娠后期完成肺泡扩张对cyclin D2的需求是无法回避的。因此，肺泡发育至少包括两个阶段(). 肺泡谱系的早期分裂涉及刺激非细胞周期蛋白D1的β-连环蛋白靶点，而后期分裂和可能的进一步分化完全依赖于细胞周期蛋白D_1，后者在对β-连环素的反应中上调(2). 表达β-catenin抑制剂的小鼠不能维持细胞周期蛋白D1的肺泡流变学+/+老鼠(三,4)和那个cyclin D1–/–即使β-catenin水平增加，腺体也无法进展，这表明这两种刺激都是必要的，并且在妊娠期间依次作用().
β-catenin信号在乳腺肺泡发育调控中作用的模型。荷尔蒙信号由受体承载细胞接收，受体承载细胞被设想为代表干细胞生态位（niche），并转换为旁分泌Wnt信号，加密侧支和肺泡指令。相邻干细胞中Wnt信号的接收诱导β-连环蛋白依赖、细胞周期蛋白D1依赖的不对称分裂，导致干细胞再生和肺泡祖细胞（祖细胞）的产生，其为酪蛋白阳性，依赖β-连环素（β）生存。在怀孕期间，细胞周期蛋白D1依赖于此细胞的分裂产生一个“瞬时扩增”细胞（TA）谱系，该细胞虽然膨胀，但在退化过程中发生终末分化。β-catenin信号传导（β）的持续激活将导致干/祖细胞室的扩张，并将导致增生和肿瘤形成，在缺乏cyclin D1的情况下，由于无法将这些细胞转化为终末分化群体，这一点将进一步加剧。虚线箭头表示可能包含多个细胞分裂的谱系。
细胞周期蛋白D1通过与磷酸化Rb的cdk4和cdk6形成复合物并额外隔离p27抑制蛋白来促进细胞周期进展，从而激活细胞周期蛋白E/cdk2复合物(12). 因此，细胞周期蛋白D1缺失的小鼠无法喂养幼崽被认为是由于增殖减少，导致妊娠结束时肺泡细胞数量不足(7). 我们的研究结果表明，尽管在乳腺发育的其他阶段，β-连环蛋白在缺乏细胞周期蛋白D1的情况下诱导增殖，但这些靶基因不能替代或绕过细胞周期蛋白D1的活性来完成妊娠晚期的肺泡生成。因此，细胞周期蛋白D1驱动的细胞周期的某些特定方面需要产生第二波肺泡子代和/或促进其分化(). 一种可能性是，其他促进细胞循环和增殖的β-连环蛋白靶基因在妊娠晚期被沉默。与此相一致，乳腺发育的不同阶段似乎使用细胞周期基因的特定补充物(13). 第二种可能是细胞周期蛋白D1对于肺泡发育关键的分化步骤至关重要。p27缺失或用cyclin E替代cyclin D1可以挽救神经和视网膜cyclin D1-全表型的发现，促进了cyclin D仅起促进细胞周期的作用的概念(14,15). 然而，在这些小鼠中，乳腺表型的挽救仅为部分（35%），这表明细胞周期蛋白D1在该部位具有额外的cdk非依赖性作用。细胞周期蛋白D1在调节雌激素受体活性中的作用已被提出(16,17).
一些观察结果表明，β-catenin和cyclin D1在肿瘤发生中存在直接的线性信号通路。在小鼠中，MMTV-ΔN89β-catenin和MMTV-cyclin D1均诱导腺癌，β-catening肿瘤显示cyclin D_1上调(2,6). 在人类中，CCND1、，编码细胞周期蛋白D1的基因在许多肿瘤类型中扩增或上调，包括40%的乳腺癌(18–21). 缺少CCND1号机组这些肿瘤其余部分的基因扩增或突变暗示了细胞周期蛋白D1基因表达的上游调节因子在致癌过程的启动中(22,23). β-catenin信号转导对cyclin D1的转录调控已在结肠、宫颈和乳腺肿瘤细胞中得到证实，β-catening的核定位与cyclin D2表达和临床预后不良的乳腺肿瘤相关(10,11,24). 尽管有大量文献将细胞周期蛋白D1上调与β-连环蛋白的致癌作用联系起来，但我们的结果坚定地表明，β-连环素诱导的乳腺增生和肿瘤发病率发生在缺乏细胞周期蛋白D的情况下。
这一观察补充了最近的一项研究，该研究表明细胞周期蛋白D1在MMTV-Wnt-1驱动的乳腺肿瘤形成中是多余的(25). Wnts可以激活多种信号级联，作为分泌蛋白，影响多种乳腺细胞类型(26). 我们的研究结果澄清并扩展了这项研究，直接表明cyclin D1对乳腺导管上皮内典型β-catenin通路的致瘤作用是不必要的。与之前关于细胞周期蛋白D2可能会弥补细胞周期蛋白D1缺乏的建议相反，我们发现在细胞周期蛋白D_1中其他细胞周期蛋白的蛋白质水平没有一致的变化–/–ΔBC肿瘤。然而，c-myc是结肠癌细胞中的直接β-catenin靶点，无论其cyclin D1状态如何，在MMTV-ΔN89β-catentin肿瘤中均升高。MMTV-c-myc还以细胞周期蛋白D1依赖的方式诱导肿瘤(25). 综上所述，这些结果表明Wnts通过激活的β-catenin和c-myc的直接线性途径为乳腺肿瘤的发生提供了周期蛋白D1依赖性途径。
MMTV-ΔN89-β-catenin表型因细胞周期蛋白D1缺失而加重而非受损的观察结果尤其令人惊讶。MMTV-ΔN89-β-catenin cyclin D1的肿瘤发病率增加，肿瘤总数和腺体受累数增加，幼犬死亡率较高，早熟发展更为明显–/–老鼠。这一观察结果增加了以下可能性：尽管细胞周期蛋白D1升高伴随并可能由β-catenin激活引起，但它可能对其他β-cateni刺激的增殖途径提供负面反馈。在这方面，细胞周期蛋白D1在乳腺中的作用似乎与在肠道中不同，在肠道中，细胞周期素D1的缺失降低了APC的致瘤性最小值(27). 尽管细胞周期蛋白D1通常被认为是G的加速器1阶段，据报道它起到了S阶段的刹车作用(28,29)促进差异化状态的保持(30).
在关于β-catenin的新文献背景下，MMTV-ΔN89β-caterin/cyclin D1的发育和肿瘤表型–/–小鼠导致我们提出了一种β-catenin诱导肺泡祖细胞生成的模型。β-catenin在扩张祖细胞室中的作用优先于其他组织(31,32). β-连环蛋白诱导的增生类似于伴随发情激素激增的乳腺变化，这表明MMTV-ΔN89β-连环蛋白肿瘤可能是由于将乳腺锁定在“永久发情”状态而引起的，从而导致肺泡祖细胞的快速积累。在第二步中，β-连环素在妊娠期间诱导细胞周期蛋白D1介导的细胞周期，将肺泡祖细胞转化为一对过渡扩增子细胞，它们广泛增殖，但在哺乳结束时被移除(). 因此，缺乏细胞周期蛋白D1的表达会导致无法清除祖细胞，从而增强肿瘤的形成。该模型预测，β-连环蛋白和细胞周期蛋白D1可能在已知的发情次数与乳腺癌风险之间的关联以及妊娠的保护作用中发挥重要作用。最后，我们的结果表明，以细胞周期蛋白D1为靶点的乳腺癌治疗策略虽然因其在许多组织中的非必需功能而具有吸引力，但可能会导致有害影响，因为其他增殖途径产生的肿瘤在没有它的情况下可能进展更快。
致谢
我们感谢Elizabeth Acquista、Polina Shats和Jamila Belgrave提供的技术援助，感谢Peggy Neville博士提供的酪蛋白抗体，感谢Liz Musgrove博士提供的宝贵建议。这项工作由美国国立卫生研究院拨款GM47429、苏珊·G·科门基金会（给P.C.）的奖学金和纽约州卫生科学与研究委员会（给S.J.H.）的奖学金资助。
工具书类
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