CD2AP前两个SH3结构域的表达阻断了VacA从GEEC向LEs的转移。（A） 转染CD2AP、CD2AP-1-175和CD2AP-194-639的HeLa细胞在4°C下与VacA孵育1 h，并在37°C下清洗和孵育30 min。细胞被固定、渗透并处理以检测肌动蛋白、VacA和不同结构。通过共焦显微镜分析细胞。每个单独标签对应的一个共焦部分以黑白显示。在未转染（1）或CD2AP-1-175转染细胞（2）中，插入物表示VacA标记（蓝色）和肌动蛋白标记（红色）之间的融合。箭头指向与F-actin结构相关的含VacA的囊泡。（B） 条件与A中相同，但HeLa细胞转染CD2AP-1-175或Inter-SH3，并用EEA1抗体检测EEs。插入物表示VacA标记（红色）和EEA1标记（蓝色）在非转染细胞（3）、CD2AP-1-175转染细胞中的融合，其中VacA存在于GEEC（2）中且在EEs（1）中无法检测到，以及在Inter-SH3转染细胞内的融合。（A和B）方框区域描绘了放大的区域。（C） 与A或B中的条件相同，但HeLa细胞在37°C下培养120分钟，用LAMP1抗体检测LEs。在合并图像中，VacA显示为红色，LAMP1显示为蓝色。在CD2AP-175转染的细胞中，VacA在GEEC中富集（箭头），与相邻的未转染细胞或用其他构建体转染的细胞相比，在LEs中没有发现。棒材，10μm。
