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心理神经内分泌学。作者手稿；PMC 2007年9月18日发布。
以最终编辑形式发布为：
精神神经内分泌学。2007年6月；32(5): 516–531.
2007年5月4日在线发布。 数字对象标识：2016年10月10日/j.psyneuen.2007年3月5日
预防性维修识别码：项目经理1978247
美国国立卫生研究院：美国国家卫生研究院25361
PMID：17482371

脂多糖诱导小鼠杏仁核、海马和下丘脑延迟FosB/DeltaFosB免疫染色，与抑郁样行为的表达平行

弗朗索瓦·弗朗索瓦,1 马伊特·莫罗,2 杰森·奥康纳,1 马克·劳森,1 夏洛特·米肯,2 雅克·莱斯蒂奇,2 基思·W·凯利,1 罗伯特·丹泽尔,1,*和纳撒利·卡斯塔农2
作者信息 版权和许可信息 PMC免责声明

摘要

促炎细胞因子可诱导疾病行为和抑郁，但它们各自的神经生物学相关性仍知之甚少。因此，本研究的目的是在小鼠体内鉴定脂多糖（LPS，830μg/kg，腹腔注射）诱导的疾病和抑郁样行为的神经底物。通过在LPS后6小时（预计时间反应最大）或24小时测试小鼠，将LPS诱导的抑郁样行为与LPS诱导疾病分离开来（预计时间波动最小，不会影响抑郁样行为的测量）。同时，在这两个时间点通过免疫组织化学绘制急性和慢性细胞反应性标记物（分别为c-Fos和FosB/ΔFosB）的表达。与生理盐水相比，LPS在6小时时降低了新笼子中的运动活性，但在24小时时没有降低。相比之下，悬尾试验中的静止时间在6小时和24小时时都增加了。在强迫游泳试验中，LPS后24小时证实了运动活性降低与抑郁行为之间的分离。LPS还降低了24小时和48小时的蔗糖消耗量，尽管当时的食物和水消耗量正常。LPS后24小时，LPS诱导的抑郁样行为与特定脑结构中的延迟细胞活动（通过FosB/ΔFosB免疫染色评估）相关，特别是在延伸的杏仁核、海马和下丘脑内，而LPS后6小时，所有脑区的c-Fos标记均显著降低。这些结果提供了支持细胞因子诱导疾病行为和细胞因子诱导抑郁样行为的脑结构之间功能分离的第一证据，并提供了细胞因子可能通过其影响情感的神经解剖脑回路的重要线索。

关键词：疾病行为、抑郁、悬尾试验、强迫游泳试验、功能神经解剖学、c-Fos、FosB/ΔFosB、绘图、脂多糖、细胞因子、杏仁核延长、海马、小鼠

简介

细胞因子诱导的疾病行为的几个特征与抑郁症的临床症状重叠（供审查：丹泽尔等。, 1999;伊尔米亚，2000;Leonard，2001年;卡斯塔农等。, 2002;马修斯等。, 2004). 这些趋同点包括情绪和认知改变、行为改变，如运动活动减少、对奖励的敏感性减弱和食物摄入减少、大脑单胺类神经传递的改变(Hirschfeld，2000年)和下丘脑-垂体-肾上腺轴的激活(Checkley，1996年). 然而，对接受细胞因子免疫治疗的患者进行的纵向临床研究表明，细胞因子诱导的疾病行为和抑郁症之间只有部分重叠，并且显示免疫系统的慢性激活。虽然所有患者对首次注射细胞因子免疫治疗都有反应，但只有三分之一的患者在几天或几周的治疗后出现严重抑郁发作，这取决于细胞因子(卡普隆等。, 2000;卡普隆等。, 2001). 此外，用选择性5-羟色胺再摄取抑制剂帕罗西汀预处理对接受细胞因子免疫治疗的患者的神经营养症状（如疲劳和厌食）没有影响(卡普隆等。，2002a年)而它能预防享乐障碍和抑郁情绪的发生。总之，这些数据表明，细胞因子诱导的疾病行为和抑郁症之间存在功能分离。

细胞因子的行为作用机制通常在注射细胞因子诱导剂脂多糖（LPS）或重组促炎细胞因子的动物中进行研究(丹泽尔，2001;Konsman等人，2002年). 在动物模型中评估细胞因子诱导抑郁症的神经生物学基础的尝试主要集中在脂多糖或细胞因子诱导的快感上，通过降低对蔗糖的偏好进行评估(De La Garza，2005年)，对奖励性脑刺激的反应减少(动画师等。, 2002)和可卡因引起的位置偏好减弱(铃木等。, 1994). 在强迫游泳测试中，促炎性细胞因子也能增加静止时间(马基诺等。, 2000;山野等。, 2000;Dunn和Swiergiel，2005年). 然而，在大多数实验中，服用LPS或特定细胞因子导致的抑郁行为被治疗后数小时内发生的运动活动的严重减少所混淆。根据临床证据显示，在接受细胞因子治疗的患者中，抑郁的发生晚于疾病，我们决定在本实验中评估在动物从LPS诱导的运动抑制中恢复时，细胞因子诱导的抑郁样行为。基于我们之前对脂多糖诱导的疾病行为的广泛研究(丹泽尔，2001)我们假设，LPS后6小时发病率最高，24小时发病率最低，而LPS诱导的抑郁行为在LPS后24小时仍然明显。我们通过让小鼠接受公认的抑郁行为测试来验证这个假设，这些测试包括悬尾测试、强迫游泳测试和蔗糖消耗测试(Cryan等人，2002年,2005). 在神经解剖学水平上，外周固有免疫系统的激活已被证明在许多脑区以快速和短暂的方式诱导c-Fos的表达，这些脑区被认为是细胞因子诱导疾病行为的不同行为和代谢成分的基础（例如。，汉森等。，2000年;康斯曼等。, 2000). 为了确定脂多糖诱导的抑郁样行为的神经解剖学底物，我们决定绘制除c-Fos外Delta FosB的脑分布图，因为FosB剪接变异体的截短半衰期较长，导致其在重复或长期刺激期间积累(Nestler等人，2001年). 我们的结果表明，LPS诱导的疾病行为和抑郁样行为的神经相关性部分分离。

材料和方法

动物和治疗

所有实验均在8周龄雄性CD1 Crl:CD-1（ICR）小鼠上进行，这些小鼠取自Charles River或实验室饲养的群体，实验开始时体重为35-40 g。动物被随机分配到治疗组，分别饲养在聚丙烯笼子（24×14×13 cm）中，并在标准菌落条件下，在温度调节（23±1°C）和湿度（40%）控制的房间内，以12:12小时的光/暗循环（从早上7.00点到晚上7.00点照明），饲养在玉米芯凋落物上。食物和水是随意提供的。实验前10天，每天单独处理小鼠。所有手术和实验程序均按照国家卫生研究所（NIH）指南和1986年11月24日的欧洲共同体理事会指令（86/609/EEC）进行，并得到机构动物护理和使用委员会的批准。

LPS是从大肠杆菌（血清型0127:B8；RBI/Sigma）中提取的酚类物质。在试验日，将其溶解在无菌无内毒素等渗盐水（用于LPS）中，并腹腔注射（i.p.）。LPS的剂量（830μg/kg）是根据其诱导全谱疾病的能力来选择的(莫尔米德等。, 2004)以及大脑吲哚胺2,3双加氧酶（IDO）活性的可靠增加，这是LPS诱导抑郁行为的一种可能机制(Lestage公司等。, 2002).

行为实验

所有行为实验均在周期的照明部分（上午9:00至12:00），在昏暗光线和低噪音条件下进行。行为通过摄像机进行监控，随后由一名训练有素的、对药物治疗视而不见的观察者使用“observer Basic”软件（荷兰诺尔德斯）进行录像并进行评分。行为数据（平均值±SEM）通过双向（治疗×时间）方差分析进行分析，重复测量时间因素，然后进行事后的，事后的如果相互作用处理×时间显著，则使用Bonferroni方法进行配对多重比较。

运动活性

分别将小鼠放在与家养笼子相似但没有垫料的干净笼子（尾巴悬吊实验）或更大的聚丙烯笼子（30×11×12 cm）中，评估LPS对运动活性的影响分成两个连通的隔间，隔间由有机玻璃墙隔开，墙上有一个小开口（2.5×3cm）（强迫游泳实验）。在第一种情况下，笼子被分为四个虚拟象限，运动活动通过计算五分钟内跨越和饲养的次数来测量。在第二种情况下，通过计算每只小鼠在6分钟内跨隔室的次数和饲养次数来评估活动。在这两种情况下，在每次测试之间都要彻底清洁笼子。

尾部悬挂试验

尾部悬挂试验（TST）以Steru等人所述的类似方式进行(Steru等人，1985年). 将小鼠从家中的笼子中取出，在距离尾巴尖端约两厘米的地方放置一小块胶带。在胶带上打一个洞，然后将小鼠分别挂在与应变仪相连的挂钩上6分钟。用于处理施加在量规上的力的计算机化系统（鼠标尾部悬吊组件，MED-TSS-MS，MED Associates，St.Albans，VT）可以自动收集和分析每个鼠标的运动。静止时间是在为每只小鼠建立一个上限阈值后确定的，该阈值精确地设置在排除所有运动且仅包括静止的活动水平上。低于此阈值的时间表示静止时间。

在本实验中，小鼠接受了生理盐水（n=12）或脂多糖（830μg/kg，n=12。在治疗后6或24小时，小鼠接受运动活动测量，立即返回其家庭笼子，并在不到5分钟后在尾部悬吊试验装置中进行测试。在光周期的同一时间研究6和24小时的时间点。

强迫游泳测试

强迫游泳测试（FST）如前所述进行(Porsolt，2000年). 简单地说，将每只小鼠分别置于一个圆柱体中（直径：16 cm；高度：31 cm），其中含有15 cm的水，保持在25±1°C。在测试期间，更换水，彻底清洁钢瓶。老鼠被放在水中6分钟，然后回到它们的笼子里。在测试的最后5分钟评估游泳、攀爬和静止的持续时间。一只老鼠停止挣扎，只缓慢地移动，保持头部在水面上漂浮，被判定为静止不动。FST中啮齿类动物静止时间的增加反映了抗抑郁药可以减少其无助状态(Porsolt，2000年).

在本实验中，小鼠接受了生理盐水（n=7）或脂多糖（830μg/kg，n=14）的腹腔注射，并立即返回其家庭笼子。23小时后，在活动笼中对小鼠进行测试。测量一小时后，将小鼠提交给FST。

蔗糖偏好测试

本实验旨在使用两瓶实验范式评估脂多糖对美味溶液偏好的影响，在该范式中，小鼠可以在一瓶水和一瓶含有蔗糖溶液的瓶子之间进行选择。在这项测试中，建议摄入模糊的蔗糖，以反映对奖赏的敏感性受损，并模拟快感，快感是抑郁症的核心症状(蒙利昂等。, 1995).

在实验开始前的一周内，所有小鼠每天都要在家中的笼子里体验测试程序，以减少对新奇事物的反应，并确保基线消费的稳定性。每天，将一个装有新制备的2%蔗糖溶液的瓶子与水瓶并置12小时，从光偏移处开始。为了避免任何地点偏好，每当测量摄入量时，蔗糖瓶的相对位置（左侧或右侧）都会发生变化。无论是在试验之前还是试验期间，老鼠都没有被剥夺食物和水。在每次测试之前和之后，通过称量瓶子来测量液体消耗量（克）。由于蔗糖消耗取决于体重，因此通过计算消耗的蔗糖量与体重×100之间的比率，将该变量表示为体重百分比。习惯化阶段持续到达到稳定的蔗糖摄入量，最后3次训练中摄入的平均量被用作每只小鼠的基线值。在最后一次训练后的一天，小鼠（每组10只）接受了生理盐水或LPS（830μg/kg）的腹腔注射，并在黑暗期开始时记录了12小时的液体消耗量，从治疗后1小时开始。随后每晚重复蔗糖偏好试验，直到LPS处理小鼠的反应恢复到处理前水平。

功能神经解剖学实验

实验设计

本实验旨在分析脂多糖诱导脑细胞激活的时间模式。小鼠腹腔注射830μg/kg溶于无内毒素等渗盐水的LPS或以无内毒素等渗透盐水为对照。然后在6小时和24小时后将小鼠神圣化(n个=每个治疗组6个）。

细胞反应性标志物的选择

采用免疫组织化学方法检测c-Fos（美国加利福尼亚州圣克鲁斯生物技术公司SC52抗血清显示）的表达，作为急性细胞反应性的标志，以及FosB/ΔFosB的表达（美国加利福尼亚圣克鲁斯生技公司SC48抗血清显示作为慢性细胞反应性的标记物（有关这些标记物的更多详细信息，请参阅下面的讨论）。根据制造商的Western blot分析，SC52抗血清是针对人和小鼠c-Fos N末端对应氨基酸3–16的合成肽在兔子体内制备的，该合成肽不会与FosB发生交叉反应。根据制造商的Western blot分析，针对带有小鼠FosB内部N末端区域的合成肽图谱制备SC48抗血清，该区域与c-Fos不发生交叉反应。此外，由于截短形式ΔFosB缺少部分FosB C末端（C末端区域的101个氨基酸），但与N末端的FosB相同(多布拉桑斯基等。, 1991)，SC48抗血清检测全长FosB和ΔFosB(佩罗蒂等。, 2004).

组织准备

所有研究c-Fos和FosB/ΔFosB表达的免疫组织化学实验均在4%多聚甲醛（PFA）固定的组织上进行。轻度CO后立即2窒息后，通过4°C下的氯化钠（NaCl 9‰）升主动脉心内灌注5分钟，然后在0.2 M磷酸盐缓冲液（pH=7.2）中制备100 ml 4°C的4%PFA溶液，在治疗后的不同时间点处死小鼠。然后解剖大脑，并在4°C的4%PFA中过夜固定。然后将大脑置于含有20%蔗糖的0.01 M磷酸盐缓冲液（PBS，pH=7.2）的低温保护剂溶液中至少2小时，然后将其冷冻到液氮蒸汽中并在−80°C下保存。然后收集自由漂浮的连续冠状低温恒温器切片（30μm），并保存在pH值为7.2、含0.03%叠氮化钠、温度为4°C的0.01 m PBS中，直至使用。

免疫组织化学实验

对于免疫组织化学，切片在pH=7.2的0.01 M PBS中冲洗10分钟，然后放置在pH=7.2的0.01 M PBS中，其中含有1%的H2O（运行）2为了灭活内源性过氧化物酶。冲洗后（0.01M PBS，pH=7.2，2×5 min），在室温下搅拌1小时，在pH=7.2/1.5%Triton X100/3%正常驴血清中预培养切片。然后在室温下用抗c-Fos或在pH=7.2/0.3%Triton X100/0.03%叠氮化钠的0.01 M PBS中稀释1/1000的抗FosB/ΔFosB一级抗体搅拌培养切片过夜。第二天，用生物素化驴抗兔二级抗体（Amersham Biosciences，Freiburg，Germany）稀释1/200的PBS（0.01M PBS，pH=7.2，3×10 min）冲洗切片并在室温下搅拌2小时。在pH值为7.2的0.01 MPBS中冲洗切片，3×10 min，然后在室温下在ABC复合体（Vector Laboratories，Peterborough，UK）中搅拌培养90 min，在pH值=7.2的0.01 M PBS中稀释1/200。冲洗（PBS 0.01 M，pH=7.2，2×10 min）后，将切片放入TBS 1X（pH=7.6；3×5 min）中，然后在60μl H的存在下，用稀释1/20的二氨基联苯胺在1X TBS（pH=7.6）中显色2O（运行）2（催化反应）。然后将切片冲洗到1X TBS中，pH=7.6（2×5分钟）和蒸馏水中（2×5分钟），然后在载玻片上展开，空气干燥，然后安装在DePeX中。

数据分析

感兴趣的解剖水平和大脑结构如所示图1(Paxinos&Franklin，2001年). 第一步，使用尼康Eclipse E400显微镜通过光学显微镜半定量分析c-Fos和FosB/ΔFosB标记，并根据数量进行分类(n个)给定结构内的阳性核：0，无标记；+/-，很少贴标签，n个< 5; +, 很少贴标签，5<n个< 25; ++, 密集标记，25<n个< 50; +++, 非常强烈的标签，50<n个< 85; ++++, 极其强烈的标记，n个> 85. 第二步，在感兴趣的特定区域内对蛋白质c-Fos和FosB/ΔFosB的表达进行定量测量。为此，用光学显微镜（Nikon Eclipse E400）检查免疫染色切片，并用高分辨率CCD摄像机系统（Nikon DXM1200）采集并数字化每个感兴趣区域的RGB图像。然后使用Adobe Photoshop CS（美国加利福尼亚州Adobe Systems Incorporated）调整对比度和亮度，并将图像大小缩小到800×640像素，分辨率为每英寸300像素；然后将RGB图像转换为8位灰度图像。因此，在测量之前，将一些代表性切片的灰度图像与这些相同切片的光学显微镜视图进行比较，以确定染色剖面的哪个灰度级别对应于c-Fos或FosB/ΔFosB免疫标记细胞核；一旦确定，这些阈值参数在特定大脑结构的分析过程中保持不变。使用电脑版NIH成像软件（ImageJ 1.33u，NIH，USA）进行图像分析和免疫标记颗粒计数。每个灰度图像首先被阈值化到先前确定的灰度水平，然后将免疫反应核的数量计算到图像上绘制的特定区域中，该区域对应于特定的大脑结构。对于给定的大脑结构，每只动物至少要计算两个切片。为了消除在选择所分析的大脑时的任何偏见，以连续的方式对所有小鼠的大脑进行切片。对所有感兴趣的大脑结构进行总体量化，并对每只小鼠的给定大脑结构至少计算两个部分。数据表示为每表面单位阳性细胞核的平均±SEM数（百万像素²）。通过双向处理×时间方差分析对单个原始数据进行统计分析，然后进行事后的，事后的如果交互作用处理×时间交互作用显著，则使用Bonferroni方法进行多重比较，以比较LPS诱导的c-Fos和FosB/ΔFosB在不同时间点（6小时和24小时）的表达情况。

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分析c-Fos和FosB/ΔFosB表达的解剖水平和大脑结构（改编自：Paxinos&Franklin，2001年)

罗斯福-丘脑解剖水平用于分析c-Fos和FosB/ΔFosB的表达及其与Bregma的距离（mm）。半定量分析31个脑区：1、外侧隔；伏隔核核心部分；伏隔核壳部；4、内侧视前区；5、终纹床核背侧部；6，终纹床核的腹侧部分；7，视前正中核；8、杏仁核内侧核；9、杏仁核基底内侧核；杏仁核前皮质核；11、杏仁核中央核；杏仁核基底外侧核；丘脑室旁核；下丘脑室旁核；下丘脑室周核；16，视上核；17，海马CA1区；18，海马CA2区；19，海马CA3区；20，齿状回；21，视上核的视交叉后部分；22，下丘脑背内侧核；23，弓状核；下丘脑外侧区；25，腹侧被盖区；中脑导水管周围灰质；27，蓝斑；28，中央灰脑桥；29，孤束核前部；30，孤束核后部；31，最后面的区域。缩写：LV，侧脑室；3V，第三脑室；D3V，第三脑室背侧；Aq，Sylvius导水管；4V，第四脑室。

结果

LPS在24小时时诱发抑郁样行为，但对运动活动无任何影响

图2A显示了提交给尾部悬吊实验的小鼠的运动活动数据。交叉线数的双向方差分析显示，时间×治疗交互作用显著（F1,44=6.75，P<0.05）。个别组平均值的事后比较显示，与生理盐水相比，LPS在6小时时减少了交叉线的数量（P<0.001），但在24小时时没有减少，并且LPS治疗组在6小时的交叉线数量少于24小时（P<0.0001）。对于重新排列的次数，获得了基本相似的结果（时间×治疗相互作用：F1, 44=14.0，P<0.001）。

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LPS在尾部悬吊试验中的抑郁样行为效应

小鼠腹腔注射生理盐水（n=12）或脂多糖（n=1）。五个小时和二十三个小时后，通过在活动笼（A）中进行的交叉和饲养的总数来评估运动活性。一小时后，将小鼠置于尾部悬吊试验中6分钟，并测量静止时间（B），Bars表示治疗效果的平均值+S.E.M.***P<0.001（LPS vs.生理盐水）。

图2B显示接受尾部悬吊试验的小鼠的静止时间。双向方差分析显示治疗有显著效果（F1,44=10.6，P<0.01），但不是时间因素，也不是治疗×时间交互作用。LPS处理的小鼠比生理盐水处理的小鼠花费更长的时间不动。强迫游泳实验中收集的数据表示为图3行为观察仅在LPS后24小时进行。根据在双室笼中进行的交叉和饲养次数评估，治疗（LPS vs.生理盐水）对运动活动没有影响(P（P）>0.05) (图3A). 然而，经LPS处理的小鼠在FST中测得的静止时间显著增加(F类1,18=9.3,P（P）<0.01）与对照组相比(图3B). 这种静止不动的增加与游泳时间的显著减少有关(F类1,18=10.7,P（P）<0.01），而攀爬持续时间没有显著改变。

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LPS在强迫游泳试验中的抑郁样行为效应

小鼠腹腔注射生理盐水(n个=7）或LPS(n个= 14). 23小时后，通过在活动笼（A）中进行的交叉和仰卧起坐的总次数来评估运动活性。一小时后，将小鼠置于强迫游泳试验中6分钟，并在试验的最后5分钟内测量静止、游泳和攀爬的持续时间（B）。条形代表平均值±扫描电镜. **P（P）治疗效果（LPS vs.Saline）<0.01。

图4显示了以体重百分比表示的蔗糖摄入的时间过程。在习惯化期结束时和治疗前，生理盐水和LPS治疗组的蔗糖和水分摄入量相当。然而，在LPS处理的小鼠中，蔗糖消耗在处理后24小时就下降了（LPS：F类1,54=20.3,P（P）<0.001; 时间：F类3,54=38.4,P（P）<0.001; LPS×时间相互作用：F类3,54=35.1,P（P）<0.001），并且在3天内未达到对照小鼠的消耗水平。事实上，LPS处理的小鼠在24小时内摄入的蔗糖明显少于对照组(P（P）<0.001）和48小时(P（P）<0.001），但72小时后不再(P（P）=0.78). 与盐处理小鼠相比，LPS小鼠的饮水量保持不变(F类1,54=1.1,P（P）>0.3; 数据未显示）。

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脂多糖在蔗糖偏好试验中的抑郁样行为效应

小鼠腹腔注射生理盐水或脂多糖，并在脂多糖摄入后连续4天内隔夜测量其相对蔗糖摄入量（以体重百分比表示）。数值代表平均值±扫描电镜每组10只小鼠**P（P）<0.01; ***P（P）治疗效果<0.001（LPS vs.Saline）。

LPS诱导脑细胞反应性的时间模式

LPS诱导的小鼠脑c-Fos表达随时间的变化

安乐死前6小时和24小时用生理盐水处理的小鼠脑中c-Fos蛋白表达的基本水平很低(表1和​和2，2中的图片A、D、G和J图5和​和6）。6). 除了下丘脑或边缘区的一些稀疏标记神经元外，所分析的任何脑结构几乎都没有染色（参见表1更多详细信息）。

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显示脂多糖诱导的延伸杏仁核结构内c-Fos免疫反应的显微照片

检测到很少或没有c-Fos免疫染色的“盐水”图片（A、D、G和J）代表了治疗6小时后被安乐死的盐水处理小鼠。在LPS治疗后6小时，AcbS、BNSTd、BNSTv、CeA和BLA（B、E、H和K）的C-Fos免疫标记增加，但在6到24小时之间，C-Fos的表达减少（C、F、I和L）。还应注意的是，在Acb中，LPS诱导的c-Fos仅限于外壳部分，而在BNSTd中，LPS诱导的c-Fos免疫反应性在侧部和囊旁部分检测到。缩写：ac，前连合；左心室，侧脑室。比例尺：300μm。

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LPS诱导下丘脑核团c-Fos免疫反应

检测到很少或没有c-Fos免疫染色的“盐水”图片（A、D、G和J）代表了治疗6小时后被安乐死的盐水处理小鼠。LPS治疗6小时后，Pe、PVN、SO、SOR和Arc（B、E、H和K）的C-Fos免疫反应性增加，但在6至24小时之间（C、F、I和L）降低。缩写：3V，第三脑室；opt：视路。比例尺：300μm。

表一

安乐死前6或24小时注射生理盐水或LPS小鼠脑内c-Fos和FosB/ΔFosB表达的半定量分析

三十一个大脑区域（参见图1)从Bregma的各个层面进行了分析。根据阳性核的数量（n）对给定结构内的标记进行评分，即0（几乎没有标记）、+/-（极少数标记，n<5）、+（少数标记，5<n<25）、++（强烈标记，25<n<50）、+++（非常强烈标记，50<n<85）、+++（极度强烈标记，n>85）。

C-Fos表达
FosB/ΔFosB表达
6小时
24小时
6小时
24小时
大脑结构啤酒花（mm）图1盐分液化石油气盐分液化石油气盐分液化石油气盐分液化石油气
端脑
 侧隔（LS）1.1010++0+++++++
 伏隔核（Aob）
  核心（AcbC）1.1020000++++++++++++
  壳牌（AcbS）1.10三0+++0++++++++++++++
 终纹床核
  背侧部分（BNSTd）0.2650+++0+++0+++
  腹部（BNSTv）0266+/−++++/−+++++/−++
 扁桃形结构
  内侧核（MeA）−0.94800+/−+/−++++++
  基底膜核（DMA）−0.9490000++++++
  皮质前核−0.941000++++++++
  中央核（CeA）−0.94110+++0+++++++++++
  基底侧核（8LA）−0.94120+00++++++++
 海马
  CA1公司−1.46170000+/−++/−++
  CA2公司−1.46180000+/−++/−+
  中国科学院−1.46190000+/−++/−++
  齿状回（DG）−1.46200000++++++++++++
间脑
 视前内侧区（MPA）0.504+/−++++/−+0000
 正中视前核（MnPO）0.2670++0+0000
 塔拉穆斯
  室旁核（PV）−0.9413+++++++0+0+++
 下丘脑
  室旁核（PVN）−0.94140+++0+0++0+++
  每心室核（Pe）−0.94150++000+0+
  视上核（SO）−0.94160++000+0++
  视上核视交叉后部分−1.46210+++/−++++++++
  背内侧核（DM）−1.46220++++/−+0+0++
  弓状核−1.46230+++0+++++++++
  下丘脑外侧区（LH）−1 46240++0+0000
中脑
 腹侧被盖区（VTA）−3.282500000000
 导水管周围灰质（PAG）−3.28260+/−0+/−++++++
Metecephalon公司
 蓝斑（LC）−5.68270+++000000
 中央灰质桥（CGPn）−5.682800000000
髓鞘
 孤束核（NTS）
  前部（NTSa）−708290++++0++0++0++
  后部（NTSp）−7.48300++++0++0++0++
 最后区域（AP）−7.48310+++0+/−0+/−0+/−

表二

盐水和LPS处理小鼠治疗后6和24小时脑区c-Fos和FosB/ΔFosB表达的定量（每组n=6）

数值代表每个表面单位免疫标记细胞核密度的平均值±SEM。通过双向治疗×时间方差分析（ANOVA）和事后Bonferoni测试评估，粗体LPS值与盐水值存在显著差异。通过从6小时的标准化值（6小时的平均LPS值除以同一时间点的平均盐分值）中减去24小时的标准值（24小时的平均LPS值除以相同时间点的均值），然后将结果除以6小时的规范化值，计算出6到24小时之间的百分比变化。

A类c-Fos表达
6小时24小时
大脑区域盐分液化石油气盐分液化石油气6到24小时之间的百分比变化
扩展杏仁核
-Acbs公司37.6 ± 5.07324 ± 23.441.9 ± 3.08234 ± 25.9− 35
-英国国家标准局32.5 ± 9.39391 ± 39.733.6 ±10.0160 ± 12.7− 60
-英国国家电视台23.9 ± 3.96271 ± 36.228.0 ± 7.82188 ± 16.8− 41
-CeA公司43.3 ± 10.0367 ± 56.345.9 ± 8.06177 ± 14.3− 55
下丘脑
-PVN公司22.8 ± 5.61684 ± 84.336.7 ± 8.61376 ± 39.9− 66
-ARC公司43.8 ± 5.33579 ± 45.650.9 ± 10.1388 ± 40.5− 42
NTS公司21.0 ± 2.76750 ± 45.519.7 ± 2.97308 ± 37.0− 56
B类FosB/ΔFosB表达
6小时24小时
大脑区域盐分液化石油气盐分液化石油气6到24小时之间的百分比变化
扩展杏仁核
-Acbs公司472 ± 27.9483 ± 44.4396 ± 22.9720 ± 64.5+ 78
-英国国家标准局37.9 ± 3.05123 ± 14.436.7 ± 6.29403 ± 48.7+ 237
-BNSTv公司31.3 ± 5.2474.4 ± 5.3126.7 ± 4.96218 ± 33.5+ 244
-CeA公司239 ± 13.8258 ± 16.8232 ± 19.4539 ± 30.4+ 116
下丘脑
-PVN公司31.3 ± 4.88324 ± 27.522.0 ± 2.91679 ± 29.8+ 198
-弧形35.1 ± 2.99182 ± 14.850.0 ± 6.76279 ± 24.8+ 7
NTS公司15.2 ± 1.56278 ± 18.619.2 ± 2.09440 ± 25.2+ 26

注射LPS后6小时，在一组相互连接的边缘结构中有c-Fos的显著表达(表1和​以及2，2和中的图片B、E、H和K图5). 相应的大脑区域精确地勾勒出延伸的杏仁核，包括伏隔核（AcbS）的壳层部分、终纹床核（BNST）和杏仁核中央核（CeA）。而伏隔核核心部分的c-Fos表达没有改变（AcbC；图5B)此时，定量分析(表2)显示c-Fos免疫反应在AcbS中强烈增强（+863%，P（P）<0.001 vs.生理盐水），以及背部（BNSTd；图5E)腹侧（BNSTv；图5H)部分BNST（BNSTd为+1203%，BNSTv为+1137%，P（P）与生理盐水相比，两种情况下均<0.001）。在许多杏仁核内，LPS诱导的c-Fos表达非常不均匀，在内侧、基底内侧和前皮质核内没有或几乎没有标记(表1)以及CeA中强烈的c-Fos诱导（+848%，P（P）<0.001 vs.对照组），在基底外侧核（BLA；图5K). 在分析的其他端脑区中，侧隔（LS）的c-Fos蛋白表达也显著增加，而海马区未检测到c-Fos的变化(表1). LPS也在间脑的许多部位诱导c-Fos(表1)包括内侧和正中视前区（MPA和MnPO）、丘脑室旁核（PV）、视上核（SO）；图6H)及其视交叉后部分（SOR；图6K). 在许多其他下丘脑区域，如脑室周围（Pe；图6B)室旁核（PVN；图6E)核团、背内侧核（DM）、下丘脑外侧区（LH）和弓状核（Arc；图6K). 在PVN和Arc中，定量分析显示c-Fos免疫反应性显著增加（PVN为+2994%，Arc为+1321%，P（P）两种情况下均<0.001 vs.生理盐水；表2). 在后脑区，LPS治疗对c-Fos的表达没有影响或影响很小(表1)尤其是腹侧被盖区（VTA）、中脑导水管周围灰质（PAG）和中央灰质脑桥（CGPn）。相反，去甲肾上腺素能核，如蓝斑（LC）和孤束核（NTS），c-Fos免疫反应性显著增加。这也是最后区域（AP）的情况。在所分析的所有脑结构中，NTS是LPS最敏感的区域，因为定量分析显示，该核显示出最强的c-Fos免疫反应诱导（+3563%，P（P）<0.001 vs.生理盐水；表2).

LPS治疗后24小时，在6小时内招募的所有脑部位，c-Fos免疫反应在全球范围内都较低(表1和​和2，2和中的图片C、F、I和L图5和​和6）。6). 定量分析证实，在6至24小时之间，c-Fos免疫标记在AcbS中减少了35%，在BNSTd中减少了60%，在BNSTv中减少了41%，在CeA中减少了55%，在PVN中减少了66%，在Arc中减少了42%，在NTS中减少了56%(表2). 此外，与LPS后6小时显示c-Fos免疫标记的大脑区域相比，在这个较晚的时间点没有新招募的结构。然而，一些大脑区域，如LS，延伸杏仁核的结构(图5C、F、I和L)、MPA、MnPO、PV、PVN(图6F)，圆弧(图6L)LPS后24小时，NTS（以及较小程度的SOR、DM和LH）仍显示明显的c-Fos标记。此外，在定量分析的结构中，c-Fos免疫反应水平相对于生理盐水仍很高（AcbS为+560%，BNSTd为+477%，BNSTv为+672%，CeA为+385%，PVN为+1032%，Arc为+762%，NTS为+1560%，P（P）在所有情况下，<0.001 vs.生理盐水；表2). 相比之下，Pe(图6C)，所以(图6I)LPS治疗后6小时招募的LC在24小时内不再显示任何c-Fos免疫标记。

LPS诱导的FosB/ΔFosB免疫反应性定位：与c-Fos标记的比较

在所分析的结构中，FosB/ΔFosB免疫反应的基本水平有点不均匀(表1和图7A、C、E和G)这与盐处理小鼠中检测到的c-Fos免疫反应的低水平和均匀水平形成对比。事实上，在特定的端脑区域检测到非常高水平的FosB/ΔFosB标记，如LS、Acb(图7E)杏仁核和齿状回（DG；图7G)生理盐水注射后6小时和24小时，而在其他大脑结构中检测到很少或没有标记（参见图7A对于NTS，图7C对于PVN和图7G对于CA1和CA2）。有趣的是，LPS后6h，基础状态下AcbS中FosB/ΔFosB阳性核密度达到472±28个神经元/表面单位，高于LPS诱导的同一时间点同一区域c-Fos标记（324±23个神经元/表面积单位）(表2).

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NTSa、PVN、Acb和海马的FosB/ΔFosB免疫反应

在所分析的结构中，FosB/ΔFosB免疫反应的基础水平明显不均匀，因为在NTSa（A）、PVN（D）、CA1和CA2（J）中检测到很少或没有FosB/-ΔFos B免疫染色，而在Acb（G）和DG（J）内检测到较高的基础染色水平。在基础水平较低的脑结构[NTSa（B和C）、PVN（E和F）、CA1和CA2（K和L）]以及DG（K和L）中，LPS治疗诱导FosB/ΔFosB免疫反应性的时间依赖性增加，在治疗后24小时达到最大表达水平。相反，在Acb（H和I）中，FosB/ΔFosB表达仅在LPS后24小时显著增加。缩写：3V，第三脑室；4V，第四脑室；ac，前连合；左心室，侧脑室。比例尺：300μm。

表1和​和22图8显示，在显示LPS诱导的c-Fos表达的许多大脑结构的一个子集中，FosB/ΔFosB免疫反应性也强烈增加（即，在Acb和BNST亚区，CeA、PV、PVN、Pe、SO、SOR、DM、Arc、NTS中，以及在AP中的较小程度上）。然而，在MPA、MnPO和LH中未检测到FosB/ΔFosB染色。在分析的大多数脑部位（视前区、下丘脑区和NTS）中，LPS治疗后6小时发生这种诱导(P（P）PVN、Arc和NTS中<0.001 vs.生理盐水），并且通常在24小时后增加(P（P）PVN、Arc和NTS中<0.001 vs.生理盐水）。表2显示LPS后24小时，PVN中FosB/ΔFosB免疫反应性的最大增加达到+3089%(P（P）<0.001），弧内+558%(P（P）<0.001）和+2298%（NTS）(P（P）<0.001). 这种增加的幅度因所分析的结构而异。PVN中FosB/ΔFosB阳性核密度增加了198%，而Arc和NTS中FosB/ΔFosB表达的变化相当温和（分别为7%和26%）。

统计分析表明，LPS后6小时，延展杏仁核结构（AcbS、BNST和CeA）中FosB/ΔFosB免疫反应性没有显著改变，但增加了24小时(P（P）在所有情况下，<0.001 vs.生理盐水）。在表现出强基础反应性的AcbS和CeA中，FosB/ΔFosB的诱导在LPS后24小时相当温和（+182%和+232%，P（P）两种情况下均<0.001），与BNSTd中观察到的巨大影响相比（+1099%，P（P）<0.001）和BNSTv（+818%，P（P）<0.001). 此外，LPS治疗导致其他脑结构如海马内FosB/ΔFosB标记增加（CA1、CA2、CA3和DG；表1和图7J–L)和PAG，其中c-Fos表达没有变化。

讨论

本研究的结果支持细胞因子诱导疾病行为的神经生物学机制与细胞因子诱导抑郁样行为的神经生物机制之间的功能分离。这些发现与临床数据相一致，临床数据显示抑郁症状在疾病早期的背景下延迟发展(卡普隆等。, 2000;卡普隆等。, 2001). 神经解剖学方法已经被用于确定作为细胞因子作用靶点的大脑区域（例如。，Elmquist公司等。, 1996;康斯曼等。, 1999;康斯曼等。, 2000). 大多数这些研究都是在不到24小时的时间间隔内进行的，并且是在神经解剖研究的首选物种大鼠身上进行的。使用小鼠，我们在本研究中证实，在许多已知的协调行为、内分泌和自主神经对脂多糖的反应的大脑区域，c-Fos免疫反应强烈增加6小时。特别是，我们在这里显示NTS是LPS反应最灵敏的结构，几个下丘脑和视前区以及一些端脑结构（LS、AcbS、BNST和CeA）显示出强烈的c-Fos诱导。然而，LPS诱导的抑郁样行为的神经基础尚未建立。在抑郁的啮齿动物模型中，炎症刺激已被证明会诱发抑郁样行为(贾恩等。, 2001;Anisman&Merali，2002年;2003;De La Garza，2005年;Dunn&Swiergiel，2005年). 不幸的是，这些研究大多是在LPS或细胞因子治疗后的几个小时内进行的，因此他们不允许排除疾病的混杂效应。这解释了为什么我们在本报告中仔细选择了LPS诱导的抑郁样行为与运动活动减少无关的时间点。此时，LPS诱导的c-Fos蛋白表达在分析的大多数大脑部位趋于减少并恢复到基线水平。尽管有这种趋势，c-Fos仍然在特定的大脑部位（延伸的杏仁核、视前区、PVN、Arc和NTS）被显著诱导。此外，使用FosB/ΔFosB作为慢性细胞反应性的标志物，揭示了特定大脑部位存在晚期持续活动变化，包括延伸杏仁核和几个下丘脑区域的结构。这些结构仅构成LPS后6小时显示c-Fos强烈表达的脑回路的一个子集。此外，在LPS激发后的任何时间，海马的各亚区均未出现c-Fos免疫反应，在LPS反应的抑郁样期，其FosB/ΔFosB免疫反应增强。

脂多糖诱导小鼠出现抑郁样症状

虽然在本研究中，啮齿动物抑郁模型的使用可能存在局限性(邓恩等。, 2005)，开发一致且可靠的行为测试来模拟抑郁症的不同核心症状，而不是整个抑郁症综合征，为研究抑郁症的病理生理学和研究新疗法的潜力提供了非常有用的工具（供审查：Cryan公司等。, 2002). 悬尾试验和强迫游泳试验是广泛使用的抑郁啮齿类动物模型，因为它们的预测有效性，也就是说，它们能够根据小鼠在无助或类似辞职状态下静止时间的减少来识别新的抗抑郁药物(Steru等人，1985年;Porsolt，2000年). 在本研究中，我们证实LPS在这两个测试中增加了静止时间。在用LPS或IL-1治疗后不久，已经报道了类似的效果(贾恩等。, 2001;Dunn&Swiergiel，2005年)，尽管也有负面报道(Del Cerro&Borrell，1990年;迪克等。, 2005)可能是因为实验程序的不同。

除了在悬尾试验和强迫游泳试验中增加静止时间的能力外，LPS还抑制蔗糖偏好试验中的蔗糖消耗。这个测试模拟了一种快感，一种严重抑郁症的核心症状(蒙利昂等。, 1995;Shen等人，1999年). LPS减少了适口溶液的摄入，这一发现与之前公布的数据一致（供审查：De La Garza，2005年). 尽管如此，仍然可以认为LPS的食欲抑制作用是蔗糖消耗量减少的原因，而不是任何享乐障碍。然而，包括我们在内的一些数据反对这种解释。首先，我们在这里观察到，LPS处理的小鼠在处理后48小时内蔗糖摄入量降低，此时食物和水摄入量恢复正常。在对慢性IL-2治疗的反应中，已经报道了细胞因子对食物摄入的相对短期抑制作用和更持久的享乐效应之间的这种分离(Anisman&Merali，2003年)以及慢性感染IFN-γ腺载体的小鼠(Kwant&Sakic，2004年). 其次，我们的实验范式允许小鼠在试验之前和期间自由获取食物和水，这增加了摄入美味的蔗糖溶液主要是基于其奖励性质的可能性(沈等。, 1999;梅拉利等。, 2003;De La Garza，2005年). 第三，细胞因子诱导非享乐主义样改变的假设得到了以下事实的支持：慢性抗抑郁治疗已经证明可以逆转这些影响(伊尔米亚，1996;萨穆特等。, 2002). 第四，LPS治疗也消除了可卡因在条件位置偏爱范式中的强化作用(铃木等。, 1994)，颅内自我刺激阈值增加，表明电刺激下丘脑外侧区产生的奖赏减少(博罗夫斯基等。, 1998)减少性行为(Avitsur&Yirmiya，1999年). 这些结果也反驳了LPS处理动物味觉辨别能力降低的可能性，认为这是蔗糖偏好降低的一种解释。

所有这些数据都表明，脂多糖诱导抑郁行为的能力与其诱导疾病的特性无关。

脂多糖诱导杏仁核、海马和下丘脑延长的细胞活动延迟，这些细胞活动与抑郁行为的发展平行

c-Fos和FosB/ΔFosB蛋白表达的功能意义

即时早期基因（IEG）分析通常用于评估神经元反应性。IEG是一种诱导性转录因子，它严格控制编码与神经元对多种刺激的反应有关的基本蛋白的其他基因的表达。到目前为止c-fos公司家庭已被大量研究以绘制地图就地在各种类型的刺激后募集的大脑结构（供综述：Morgan&Curran，1995年;Herdegen&Leah，1998年;科瓦茨，1998年). 在这个家族的成员中，蛋白质c-Fos（55kDa）由c-fos公司该基因在急性刺激后1至3小时内被诱导，其半衰期为2小时。FosB蛋白（46/48 kDa）是fosB公司该基因的半衰期约为9小时。c-Fos和FosB的表达随着时间的推移而脱敏(雀巢公司等。, 1999;佩罗蒂等。, 2004). 这个fosB公司该基因还编码各种剪接变体，其中稳定蛋白ΔFosB（33 kDa）通常在刺激后6小时诱导产生(雀巢公司等。, 2001). ΔFosB的半衰期也比c-fos公司家族成员，在细胞内累积长达一个月。ΔFosB蛋白由几种慢性实验条件诱导(陈等。, 1997;麦克朗等。, 2004)例如长期接触滥用药物(雀巢公司等。, 1999;雀巢公司等。, 2001)，压力源(佩罗蒂等。, 2004)或抗精神病药物(阿特金斯等。, 1999;罗德里格斯等。, 2001). 尽管看似矛盾，但在其他研究中已经观察到，在盐水处理的小鼠中，FosB/ΔFosB在几个特定的大脑区域（Acb、杏仁核和海马体）内的表达相对较高，尤其是与非常低的c-Fos表达基础水平相比。例如，在Acb和皮质区的基础条件下观察到ΔFosB的高水平表达(罗德里格斯等。, 2001;佩罗蒂等。, 2004). 鉴于ΔFosB在调节大脑长期适应中的基本作用(雀巢公司等。, 1999)，这种现象很容易解释，因为这些端脑区不断整合多模态的内、外感觉信息。

尽管某些脑区对包括细胞因子在内的不同类型刺激的反应可能存在良好的相关性，但IEG的表达与神经元的放电率之间没有一一对应的关系。例如，LC神经元的电生理活性在急性免疫激发后增强(Borsody&Weiss，2002年;2004;2005). 因此，我们在本研究中显示，注射LPS后6小时，LC显示出强烈的c-Fos标记。由于抑制反应通常与c-Fos诱导无关，因此特定脑区c-Fos免疫反应的缺失并不排除特定细胞或细胞核群参与感兴趣的生理反应(陈等。, 1993;Kovacs和Sawchenko，1993年;科瓦茨，1998年). 此外，显示的神经元数量减少c-fos公司给定结构中的基因表达并不一定意味着神经元群受到抑制，因为这种减少只能由该群中少数神经元的激活来解释(法国人等。2005年b). 尽管存在这些局限性，IEG表达分析仍然是广泛绘制神经通路的有用工具，这些神经通路的活性在LPS激发期间会发生急性和慢性改变。

脂多糖诱导短暂和持续脑反应的潜在机制

LPS诱导的疾病行为是由前炎症细胞因子的中枢作用触发的，这些炎症细胞因子在大脑内瞬时表达，以响应外周释放的细胞因子（供审查：康斯曼等。, 2002;Dantzer，2004年). 迷走神经膈下段(汉森等。，2000年;康斯曼等。, 2000)以及广泛的c-Fos成像(康斯曼等。, 2000)研究表明，迷走神经感觉通路及其初级（NTS）和次级（杏仁核延伸和一些下丘脑结构）投射区强烈参与了对细胞因子的行为反应。本研究中观察到的c-Fos蛋白诱导的瞬态模式与关于脑内细胞因子作用机制的现有数据完全一致，特别是在数小时内LPS诱导的脑细胞因子表达的正常化(莱伊等。, 1994;卡斯塔农等。, 2004). 由于LPS诱导的抑郁样行为发生得比这些早期事件晚得多，持续时间也更长，因此它可能不是由促炎细胞因子直接引起的。脂多糖诱导的抑郁样行为更可能由其他神经生物学过程介导，这些神经生物学过程是促炎细胞因子表达增加的结果。目前的一组神经解剖学结果证实了这一假设，这些结果表明，尽管存在一些空间重叠，但大脑反应性的不同时间模式分别与LPS后6小时的疾病行为和24小时的抑郁行为相关。

与行为数据和功能结果的相关性

通过c-Fos和FosB/ΔFosB表达的增加，显示LPS诱导的持续细胞反应性的扩展杏仁核是一个明确定义的解剖和功能实体，包括一组相互连接的皮层下边缘脑区（供审查：Alheid，2003年). 扩展杏仁核的功能障碍被认为是成瘾和抑郁等几种神经精神疾病的病理生理学原因，这两种疾病的特征都是认知、情绪和动机的改变(Liotti和Mayberg，2001年;红衣主教等。, 2002;雀巢公司等。, 2002;法国人等。2005年a). 典型地，延展杏仁核的中央分裂包括杏仁核中央核（CeA）、BNST的背外侧部分（BNSTd）和伏隔核的内壳部分（AcbS），伏隔核被认为是中央延展杏仁核的前延展(Alheid&Heimer，1988年;1996;赫默尔等。，1997年a;赫默尔等。，1997年b). LPS后24小时，所有这些边缘基底前脑区域均表现出FosB/ΔFosB的显著积聚，这意味着这些结构可以介导LPS诱导的抑郁样行为。

LPS对海马各亚区（CA1、CA2、CA3和DG）FosB/ΔFosB免疫反应性也有延迟和持续增加。这些原始结果与细胞因子损害正常海马功能的观察结果一致。LPS触发海马内IL-1β的增加(莱伊等。, 1994;汉森等。2000亿)它独立于迷走神经通路(汉森等。2000亿). 这种LPS诱导的IL1-β表达是海马CA1锥体神经元GABA能抑制持续增加的原因(赫尔斯特伦等。, 2005). 细胞因子也减少海马中功能性NMDA受体的数量(罗西等。, 2004)以及与突触可塑性有关的IEG Arc的表达(罗西等。, 2005). 此外，海马体内的神经毒性过程与抑郁症有关(谢林等。, 1999;布雷姆纳等。, 2000)众所周知，在炎症过程中，胶质细胞的激活会产生促炎细胞因子和神经毒性因子，如自由基和一氧化氮，从而促进突触可塑性的改变和神经元细胞的死亡（综述：Allan&Rothwell，2001年). 总之，这些数据支持海马在LPS诱导的抑郁样行为中可能发挥的作用。

虽然本研究未考虑LPS诱导的抑郁样行为，但可能与外周免疫激活对大脑神经传递的深刻影响有关（例如。，邓恩等。, 1999)和HPA轴活动（供审查：Besedovsky&Del Rey，1996年). 延迟脂多糖诱导的抑郁样行为的一个可能的病理生理机制是吲哚胺2,3双加氧酶（IDO）酶的激活。在单核细胞、巨噬细胞和脑小胶质细胞的原代培养物中，细胞因子可以有效地诱导这种色氨酸分解代谢酶，从而降低色氨酸合成5-羟色胺的生物利用度(Capuron等人，2002b;Capuron和Dantzer，2003年;威彻斯和梅斯，2004年)产生潜在的神经毒性色氨酸代谢物，如3-羟基尿氨酸和喹啉酸(斯通，2001;Wichers等人，2005年). 根据这一假设，我们已经表明LPS诱导的IDO激活是一个晚期事件，在LPS后24小时达到峰值(莱斯塔奇等。, 2002). 目前正在研究这种酶激活对大脑5-羟色胺能活性的影响及其在LPS治疗小鼠表现出的增强抑郁行为中的潜在意义。

结论

在本报告中，我们证明脂多糖可以诱导抑郁样行为，而不依赖于运动活动的任何变化。这种类似抑郁的行为与杏仁核、海马体和下丘脑的持续细胞反应有关。虽然只是相关的，但这些发现高度暗示了LPS诱导疾病的神经生物学机制与那些参与对先天免疫系统激活的抑郁样行为反应的机制之间的分离。

致谢

莫罗先生得到了来自FRM（医学研究基金会）的博士前奖学金的支持。本研究由NIMH（R01 MH-71349和MH-079829 to RD）、INRA、CNRS、Région Aquitaine和法国研究部（ACI“神经科学国际与计算”to NC）资助。

缩写

FST公司
强迫游泳试验
IDO公司
吲哚胺2,3双加氧酶
即早基因
即刻早期基因
液化石油气
脂多糖
美国公共广播电视公司
磷酸盐缓冲液
PFA公司
对甲醛有关大脑结构的缩写，请参阅表1

脚注

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