转录因子Nrf2在肿瘤化学保护剂3H-1，2-二巯基-3-硫酮体内诱导肝2期和抗氧化酶中的作用。

背景：二硫醚酮（如oltipraz）诱导第2相酶是保护动物和人类免受环境致癌物影响的有效手段。至少一些保护酶的表达的转录控制是通过许多第2期基因上游调控区中的抗氧化反应元件（ARE）介导的。与ARE结合的转录因子Nrf2似乎对在体内诱导谷胱甘肽S-转移酶（GST）Ya、Yp和NAD（P）H：醌还原酶（NQO1）等原型第2相酶至关重要。材料和方法：在本研究中，3H-1,2-二巯基-3-硫酮（D3T）被用作一种有效的模型诱导剂，其对大鼠基因表达和化学预防效果的影响已在大鼠中广泛表征。通过Northern blot杂交和逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）分析，在野生型和nrf2-disrupted小鼠中检测了十多个推测的D3T诱导基因，以阐明nrf2功能的丧失是否也会影响更广泛的第2相和抗氧化酶的诱导。D3T对肝脏Nrf2表达和定位的影响也通过Northern印迹杂交、电迁移率变化分析和Western印迹分析在体内进行了检测。结果：D3T可增加野生型小鼠肝脏GST和NQO1的比活性，而nrf2缺乏小鼠的比活性则明显减弱。然而，在对nrf2破坏的小鼠进行D3T处理后，RNA转录物水平的变化是多向的，这取决于所检测的特定基因。虽然GST-Ya、NQO1、微粒体环氧化物水解酶和γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶调节链的mRNA在突变小鼠中被阻断，但GST-Yp mRNA的升高在很大程度上没有受到阻碍。铁蛋白重链和轻链mRNA水平的增加仅见于nrf2-disrupted小鼠。野生型小鼠中诱导的UDP-葡萄糖醛酸转移酶1A6、血红素氧化酶-1、锰超氧化物歧化酶的转录水平在突变小鼠中实际上降低了，而GST-Yc、，在野生型小鼠中，D3T无任何诱导作用的情况下，突变小鼠中的黄曲霉毒素B1醛还原酶和过氧化氢酶在D3T处理后降低。通过Northern blot和RT-PCR分析评估，在野生型小鼠中，D3T治疗导致给药后数小时内肝脏Nrf2 mRNA水平增加3倍。用寡核苷酸探针对人类NQO1 ARE、小鼠GST Ya ARE和红系转录因子（NF-E2）结合位点进行凝胶位移分析表明，与经载体处理的对照组相比，与D3T处理的小鼠肝脏制备的核提取物的结合强度增加。Nrf2抗体超转移了这些核提取物的DNA结合带。此外，免疫印迹分析表明，在同一时间点，D3T处理小鼠肝细胞核提取物中Nrf2积累。结论：尽管不同基因的反应模式不同，但Nrf2在体内通过化学保护性二硫醚对多相2和抗氧化酶的组成性和诱导性表达的调节中起着核心作用。了解控制酶诱导剂作用特异性的因素将对设计和分离更有效和选择性的化学保护剂非常有帮助。