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图2。

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Ago1免疫沉淀物中miRNA种子互补序列的富集。(A类,顶部)Northern blots检测S2细胞总RNA中的miR-1、miR-184、miR-7和miR-314。(底部)与Ago1免疫纯化的信使RNA中所示miRNAs的2-8位互补的7聚体序列的相对富集。mRNA表示在整个转录本中发现的序列匹配。ORF表示在编码序列中找到的匹配项。UTR表示在3′UTR中发现的序列匹配。丰度标准化为mRNA、ORF和UTR数据集中序列的总出现频率。(B类,顶部)CG5704和CG1857 ORF中预测的miR-184位点(顶部,链mRNA;底部,链miR-184)。箭头表示突变结构中的残基发生改变,以中断与miR-184的配对,同时保留mRNA中的ORF。野生型和突变型CG5704和CG1857的ORF是用萤火虫荧光素酶在框架中克隆的。(底部)荧光素酶分析比较内源性miR-184对转染表达ORF-荧光素素酶融合蛋白的S2细胞的调节。将级别标准化为野生型构造。突变体结构中活性升高表明miR-184介导的抑制作用减轻。(C类)荧光素酶分析用于调节报告结构,如左边miR-278。SV40和扩展表示3′UTR的起源。彩色箭头表示引入的miR-278位点。盒子位于正确的显示这些位点:“ex”表示扩增的3′UTR中的内源性miR-278位点;黑色三角形显示合成miR-278;绿色和红色三角形表示荧光素酶ORF的改变,以产生与miR-278种子区域匹配的位点。

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