跳到主要内容
访问密钥 NCBI主页 MyNCBI主页 主要内容 主导航
《维罗尔杂志》。1996年6月;70(6): 4188–4192.
数字对象标识:10.1128/jvi.70.6.4188-4192.1996
预防性维修识别码:PMC190316型
PMID:8648766

基于质粒的甲型流感病毒反向遗传学系统。

摘要

首次成功开发了用于流感病毒的负链RNA病毒反向遗传学系统。这项技术涉及将体外重组核糖核蛋白(RNP)复合物转染到流感病毒感染的细胞中。我们现在已经开发了一种方法,可以从基于质粒的表达载体中在细胞内重建RNP复合物。病毒RNA样转录物的表达是通过含有截短的人类聚合酶I(polI)启动子和核酶序列的质粒实现的,核酶序列通过自动催化裂解产生所需的3'末端。将polI驱动的质粒与表达病毒PB1、PB2、PA和NP蛋白的polII应答质粒共同转染到人类293细胞中。这种独特的质粒驱动系统能够有效转录和复制病毒RNA样报告子,并允许研究与流感病毒RNA转录和复制相关的顺式和反式信号。使用该系统,我们还能够将合成神经氨酸酶基因拯救到重组流感病毒中。该方法是一种方便的替代先前建立的RNP转染系统的方法。

全文

本文全文可作为PDF格式(480K)。

选定的引用

这些参考文献在PubMed中。这可能不是本文的完整参考文献列表。

  • Barclay WS,Palese P.流感B病毒,将位点特异性突变引入HA基因。《维罗尔杂志》。1995年2月;69(2):1275–1279. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
  • Biswas SK、Nayak DP。甲型流感病毒聚合酶碱性蛋白1保守基序的突变分析。《维罗尔杂志》。1994年3月;68(3):1819–1826. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
  • Castrucci MR,Kawaoka Y.用于生成包含M2蛋白羧基末端残基缺失的甲型流感病毒突变体的反向遗传系统。《维罗尔杂志》。1995年5月;69(5):2725–2728. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
  • Collins PL、Hill MG、Camargo E、Grosfeld H、Chanock RM、Murphy BR。从克隆的cDNA生产感染性人类呼吸道合胞病毒证实了M2 mRNA 5'近端开放阅读框中转录延伸因子在基因表达中的重要作用,并为疫苗开发提供了能力。美国国家科学院院刊。1995年12月5日;92(25):11563–11567. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
  • de la Luna S,Martín J,Portela A,Ortín J.流感病毒裸RNA可以在转染到共表达来自猴病毒40重组病毒的聚合酶和核蛋白的三个亚基的细胞中时表达。维罗尔将军。1993年3月;74(第3部分):535-539。[公共医学][谷歌学者]
  • Enami M,Luytjes W,Krystal M,Palese P.将位点特异性突变引入流感病毒基因组。美国国家科学院院刊。1990年5月;87(10):3802–3805. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
  • Enami M,Palese P.流感病毒转染剂的高效形成。《维罗尔杂志》。1991年5月;65(5) :2711–2713。 [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
  • García-Sastre a,Palese P.负链RNA病毒基因组的遗传操作。微生物年鉴。1993;47:765–790.[公共医学][谷歌学者]
  • García-Sastre a,Palese P。甲型流感病毒神经氨酸酶蛋白的细胞质尾部在将该蛋白包装成病毒包膜中没有发挥重要作用。病毒研究。1995年6月;37(1):37–47.[公共医学][谷歌学者]
  • Gautier C,Mehtali M,Lathe R.一种普遍存在的哺乳动物表达载体,pHMG,基于看家基因启动子。核酸研究。1989年10月25日;17(20):8389–8389. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
  • Huang TS,Palese P,Krystal M.基因组复制所需流感病毒蛋白的测定。《维罗尔杂志》。1990年11月;64(11):5669–5673. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
  • Jones MH,Learnd RM,Tjian R.通过体内瞬时表达分析人类核糖体RNA基因启动子的聚集点突变。美国国家科学院院刊。1988年2月;85(3):669–673. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
  • Kimura N,Nishida M,Nagata K,Ishihama A,Oda K,Nakada S.重组流感病毒RNA在细胞中的转录,可表达流感病毒RNA聚合酶和核蛋白基因。维罗尔将军。1992年6月;73(第6部分):1321-1328。[公共医学][谷歌学者]
  • Lawson ND、Stillman EA、Whitt MA、Rose JK。来自DNA的重组水泡性口炎病毒。美国国家科学院院刊。1995年5月9日;92(10):4477–4481. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
  • Li RA,Palese P,Krystal M.流感病毒NP突变体的补充和分析。病毒研究。1989年2月;12(2):97–111.[公共医学][谷歌学者]
  • Li S,Xu M,Coelingh K。用于拯救核蛋白和基质基因的流感病毒核糖核蛋白复合物的电穿孔。病毒研究。1995年7月;37(2):153–161.[公共医学][谷歌学者]
  • Li X,Palese P.流感病毒RNA多聚腺苷化信号的表征。《维罗尔杂志》。1994年2月;68(2):1245–1249. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
  • Luo GX,Luytjes W,Enami M,Palese P。流感病毒RNA的多腺苷酸化信号涉及一段尿苷,然后是柄状结构的RNA双链。《维罗尔杂志》。1991年6月;65(6):2861–2867. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
  • Luytjes W,Krystal M,Enami M,Parvin JD,Palese P.流感病毒对外源基因的扩增、表达和包装。单元格。1989年12月22日;59(6):1107–1113.[公共医学][谷歌学者]
  • Martín J、Albo C、Ortím J、Melero JA、Portela A。使用从感染细胞纯化的病毒蛋白体外重建活性流感病毒核糖核蛋白复合物。维罗尔将军。1992年7月;73(第7部分):1855-1859年。[公共医学][谷歌学者]
  • Mena I、de la Luna S、Albo C、Martin J、Nieto A、Ortín J、Portela A。使用痘苗病毒-T7 RNA聚合酶表达系统合成生物活性流感病毒核心蛋白。维罗尔将军。1994年8月;75(第8部分):2109–2114。[公共医学][谷歌学者]
  • Neumann G,Hobom G.流感病毒启动子元件的体内突变分析。维罗尔将军。1995年7月;76(第7部分):1709–1717。[公共医学][谷歌学者]
  • Neumann G,Zobel A,Hobom G.RNA聚合酶I介导流感病毒RNA分子的表达。病毒学。1994年7月;202(1):477–479.[公共医学][谷歌学者]
  • Perrotta AT,Been MD。一种假结状结构,用于有效地自裂解三角肝炎病毒RNA。自然。1991年4月4日;350(6317):434–436.[公共医学][谷歌学者]
  • Radecke F、Spielhofer P、Schneider H、Kaelin K、Huber M、Dötsch C、Christiansen G、Billeter MA。从克隆DNA中拯救麻疹病毒。EMBO J。1995年12月1日;14(23):5773–5784. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
  • Schnell MJ、Mebatsion T、Conzelmann KK。来自克隆cDNA的传染性狂犬病病毒。EMBO J。1994年9月15日;13(18):4195–4203. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
  • Schulman JL,Palese P.甲型流感病毒的毒力因子:MDBK细胞中斑块生成所需的WSN病毒神经氨酸酶。《维罗尔杂志》。1977年10月;24(1):170–176. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
  • Seong BL,Brownlee GG。一种体外重建流感聚合酶和RNA的新方法:体外cRNA和vRNA合成启动子元件和体内病毒拯救的研究。病毒学。1992年1月;186(1):247–260.[公共医学][谷歌学者]
  • Smale ST,Tjian R.野生型和突变型人类RNA聚合酶I启动子控制下单纯疱疹病毒tk序列的转录。分子细胞生物学。1985年2月;5(2):352–362. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
  • Subbarao EK、Kawaoka Y、Murphy BR。拯救甲型流感病毒野生型PB2基因和带有特定位点温度敏感性和衰减突变的突变衍生物。《维罗尔杂志》。1993年12月;67(12):7223–7228. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
  • Whelan SP,Ball LA,Barr JN,Wertz GT。完全从cDNA克隆中高效回收传染性水疱性口炎病毒。美国国家科学院院刊。1995年8月29日;92(18):8388–8392. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
  • Yamanaka K、Ogasawara N、Yoshikawa H、Ishihama A、Nagata K。使用带有工程RNA的转染系统对流感病毒RNA基因组的启动子结构进行体内分析。美国国家科学院院刊。1991年6月15日;88(12):5369–5373. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
  • Yasuda J,Bucher DJ,Ishihama A.通过M1蛋白控制甲型流感病毒的生长:携带嵌合M基因的转染病毒的分析。《维罗尔杂志》。1994年12月;68(12):8141–8146. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
  • 张华,空气总经理。功能性流感病毒A聚合酶蛋白和克隆cDNA模板在重组痘苗病毒感染细胞中的表达。生物化学与生物物理研究委员会。1994年4月15日;200(1):95–101.[公共医学][谷歌学者]
  • Zobel A,Neumann G,Hobom G.RNA聚合酶I催化插入病毒cDNA的转录。核酸研究。1993年8月11日;21(16):3607–3614. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]

文章来自病毒学杂志由以下人员提供美国微生物学会(ASM)