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图1。

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产生含有嵌合NA-HN片段的转染流感病毒。(A类)编码流感病毒NA NDV HN嵌合片段的病毒RNA(vRNA)示意图。vRNA由WSN NA vRNA的前127个核苷酸组成,其中包括非编码区的19个核苷酸和编码细胞质尾部、跨膜结构域和NA柄起点的核苷酸。该结构域之后是编码NDV HN蛋白51–576氨基酸的核苷酸,包括HN外结构域和串联终止密码子(TAG-TAG)。最后一个结构域表示WSN NA ORF 5′端的185个核苷酸(157个核苷酸)及其5′非编码区(28个核苷酸)。(B类)纯化重组VN/HN病毒的vRNAs。从重组WT WSN和VN/HN病毒中提取的RNA通过含有7M尿素的2.8%聚丙烯酰胺凝胶分离,并通过银染进行可视化。显示了聚合酶(Ps)、HA(WSN)、HAlo(VN 1203)、NP、M和NS片段的位置。编码NA蛋白的RNA在VN/HN病毒中缺失。显示了一条污染的18S核糖体RNA带。(C)cHN蛋白的表达。MDCK细胞被流感病毒VN/HN或WT WSN感染。感染细胞在37°C下培养16小时,固定并用甲醇渗透。用抗NDV HN单克隆抗体(7B1)、抗H1流感HA单克隆抗体和多克隆抗H5流感HA血清通过免疫荧光法检测病毒中的特异性抗原。

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