ARIP3和PIAS1增强HeLa细胞AR的sumoylation。接种在六孔板上的HeLa细胞与100 ng pcDNA-Flag-hAR共转染;100ng的pFLAG-CMV2、pFLAG-ARIP3或pFLAG-PIAS1;和0、10或50 ng pSG5-His-SUMO-1。细胞在RIPA-1缓冲液中裂解,裂解产物用抗AR抗体进行免疫印迹。与内源性SUMO-1酰化的AR型与外源性表达的SUMO-1的AR型迁移之间的差异是由于SUMO-1表达载体中存在His标签。通过免疫印迹抗AR抗体-免疫沉淀AR和抗SUMO-1抗体(未显示)来验证sumoylated AR形式的身份。