ARIP3与其他sumoylated蛋白相互作用。用1μg空pFLAG-CMV2或pFLAG-ARIP3和1.5μg空的pSG5或pSG5-His-SUMO-1转染COS-1细胞。转染48小时后,收集细胞并在含有10 mM NEM的RIPA-1缓冲液中或在含有2%SDS的变性缓冲液中溶解10 mM Tris-HCl(pH 8.0)-150 mM NaCl。在后一种缓冲液中溶解的样品在95°C下加热10分钟。在免疫沉淀(IP)之前,用10 mM Tris-HCl(pH 8.0)和150 mM NaCl(含1%Triton X-100)的混合物将这些样品稀释(1:10)。5%的细胞提取物用抗FLAG抗体(A)免疫印迹,其余样品用抗FLAG抗体免疫沉淀,然后用抗SUMO-1抗体(B)或抗FLAG免疫印迹(C)。WB,Western blotting。