图5。

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项目实施计划2增加PKCαC2结构域对磷脂囊泡的结合亲和力。(A)PKCαC2结构域和(B)cPLA的蛋白膜FRET分析2αC2结构域与磷脂囊泡结合,磷脂囊泡含有3:1 PC:PS和5 mol%丹酰-PE,无论是否含有6 mol%PIP2样品含有1μM C2结构域、100μM总脂质、1 mM MgCl2,140 mM KCl,15 mM NaCl,25 mM HEPES,pH 7.4,25°C。数据点表示三个独立实验的平均±SD。使用希尔方程(实线)进行的最佳拟合分析得出[Ca2+]1/2值为2.9±0.05μM(+PIP2)和51±1.5μM(–PIP2)对于PKCαC2和15±0.28μM(+PIP2)和13±0.29μM(–PIP2)对于cPLA2αC2.希尔系数在1.5到1.9之间,因为每个C2结构域被多个Ca激活2+离子(科胡特等。,2002).