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生物化学杂志。2003年3月1日;370(第2部分):429–438。
数字对象标识:10.1042/BJ20021082
预防性维修识别码:PMC1223190型
PMID:12441002

新型PDE4B4 cAMP特异性磷酸二酯酶亚型的分子克隆和亚细胞分布。

摘要

我们分离出编码PDE4B4的cDNA,PDE4B是一种新的cAMP特异性磷酸二酯酶(PDE4)亚型,具有新的性质。PDE4B4的氨基酸序列表明,它是由PDE4B基因编码的,但它与以前分离的PDE4B1、PDE4B2和PDE4B3亚型不同,因为存在一个新的17个氨基酸的N末端区域。PDE4B4包含上游保守区1(UCR1)和UCR2调节单位,是“长”PDE4亚型的特征。核糖核酸酶保护表明,PDE4B4 mRNA优先在肝脏、骨骼肌和大脑的各个区域表达,这与其他已知PDE4B长型、PDE4B1和PDE4B3的组织分布模式不同。PDE4B4 cDNA在COS7细胞中的表达在变性条件下产生85 kDa的蛋白质。重组COS7细胞表达的PDE4B4的亚细胞分级显示该蛋白定位在胞质溶胶内,这通过用绿色荧光蛋白-PDE4B4嵌合体转染的活COS7细胞的共聚焦显微镜分析得到证实。与长PDE4B1亚型相比,PDE4B4的cAMP的K(m)为5.4 microM,V(max)为2.1。PDE4B4被典型PDE4抑制剂rolipram[4-[3-(环戊基)-4-甲氧基苯基]-2-吡咯烷酮]抑制,IC(50)为83 nM。用forskolin处理COS7细胞以提高cAMP水平,产生PDE4B4的激活,这与UCR1内Ser-56上PDE4B的磷酸化有关。PDE4B4独特的组织分布和细胞内靶向性表明,该亚型可能在调节特定细胞类型中cAMP水平方面具有独特的功能作用。

全文

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选定的引用

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文章来自生物化学杂志由以下人员提供生物化学学会