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生物化学杂志。2002年1月15日；361（第2部分）：243-254。
数字对象标识：10.1042/0264-6021:3610243
预防性维修识别码：PMC1222304型
PMID：11772396

Cdc42和RhoA的磷酸化状态调节它们与Rho-GDP解离抑制剂的相互作用及其从生物膜中提取。

玛丽安妮克忘了,Richard R Desrosiers公司,丹尼斯·金格斯、和理查德·贝利沃
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摘要

Rho-GDP解离抑制剂（RhoGDI）通过从膜中提取Rho小GTPase，如Cdc42和RhoA，调节它们的激活-激活循环。为了研究Mg（2+）、磷脂酰肌醇4,5-二磷酸（PIP（2））、离子强度和磷酸化在RhoGDI与Cdc42和RhoA相互作用中的作用，我们开发了一种利用酿酒酵母生产戊基化Rho蛋白的新方法。此前有报道称，蛋白激酶A（PKA）-分离膜的处理增加了RhoGDI从膜中提取RhoA的量[Lang，Gesbert，Delespine-Carmagnat，Stancou，Pouchelet和Bertoglio（1996）EMBO J.16，510-519]。在本研究中，我们使用体外亲和色谱系统表明，在离子强度的生理条件下，RhoA和Cdc42的磷酸化显著增加了它们与RhoGDI的相互作用。这种增加与Rho蛋白上的核苷酸（GDP或鸟苷5'-[gamma-thio]三磷酸）以及Mg（2+）和PIP（2）无关。此外，碱性磷酸酶对大鼠脑细胞膜的去磷酸化显著降低了RhoGDI对RhoA和Cdc42的提取。随后PKA的再磷酸化恢复了萃取水平，表明该过程的可逆性。这些结果清楚地表明，Cdc42和RhoA的磷酸化状态调节了它们与RhoGDI的相互作用，从而调节了它们从大鼠脑膜中的提取。因此，我们认为磷酸化是Cdc42和RhoA活性的调节机制，与GDP-GTP循环无关。

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选定的引用

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  • Van Aelst L、D’Souza-Schorey C.Rho GTPases和信号网络。基因发育。1997年9月15日；11(18):2295–2322.[公共医学][谷歌学者]
  • Hall A.Rho GTPases和肌动蛋白细胞骨架。科学。1998年1月23日；279(5350):509–514.[公共医学][谷歌学者]
  • Bokoch GM。Rho家族GTPases对细胞功能的调节。免疫学研究。2000;21(2-3):139–148.[公共医学][谷歌学者]
  • Olofson B.Rho鸟嘌呤解离抑制剂：细胞信号传递中的关键分子。细胞信号。1999年8月；11(8):545–554.[公共医学][谷歌学者]
  • Takai Y、Sasaki T、Tanaka K、Nakanishi H.Rho作为细胞骨架的调节器。生物化学科学趋势。1995年6月；20(6):227–231.[公共医学][谷歌学者]
  • Takahashi K、Sasaki T、Mammoto A、Takaishi K、Kameyama T、Tsukita S、Takai Y。Rho GDP解离抑制剂与ezrin/radixin/moesin的直接相互作用启动了Rho小G蛋白的激活。生物化学杂志。1997年9月12日；272(37):23371–23375.[公共医学][谷歌学者]
  • Sasaki T，Takai Y.Rho小G蛋白家族Rho GDI系统作为细胞骨架控制的时间和空间决定因素。生物化学与生物物理研究委员会。1998年4月28日；245(3):641–645.[公共医学][谷歌学者]
  • Sasaki T，Kato M，Takai Y.rho GDI与rho p21和rac p21的GTP结合形式弱相互作用的结果。生物化学杂志。1993年11月15日；268(32):23959–23963.[公共医学][谷歌学者]
  • Leonard D、Hart MJ、Platko JV、Eva A、Henzel W、Evans T、Cerione RA。CDC42Hs蛋白GDP解离抑制剂（GDI）的鉴定和表征。生物化学杂志。1992年11月15日；267(32):22860–22868.[公共医学][谷歌学者]
  • Nomanbhoy TK，Cerione R.使用荧光光谱法对RhoGDI和Cdc42Hs之间的相互作用进行表征。生物化学杂志。1996年4月26日；271(17):10004–10009.[公共医学][谷歌学者]
  • Leonard DA，Cerione RA。用Rho-GDP解离抑制剂从膜中溶解Cdc42Hs。方法酶制剂。1995;256:98–105.[公共医学][谷歌学者]
  • Bilodeau D，Lamy S，Desrosiers RR，Gingras D，Béliveau R。rhoGDI对Rho蛋白与膜结合的调节：生理离子条件对释放活性的抑制。生物化学细胞生物学。1999;77(1):59–69.[公共医学][谷歌学者]
  • Chuang TH、Bohl BP、Bokoch GM。生物活性脂质是Rac的调节器。GDI络合。生物化学杂志。1993年12月15日；268（35）：26206–26211。[公共医学][谷歌学者]
  • FauréJ，Vignais PV，Dagher MC。Rho A的磷酸肌醇依赖性激活涉及RhoA/Rho-GDI复合物的部分开放。欧洲生物化学杂志。1999年6月；262(3):879–889.[公共医学][谷歌学者]
  • Hata Y、Kaibuchi K、Kawamura S、Hiroyoshi M、Shirataki H、Takai Y。通过蛋白激酶A催化的smg p21磷酸化增强smg p21GDP/GTP交换蛋白的作用。生物化学杂志。1991年4月5日；266(10):6571–6577.[公共医学][谷歌学者]
  • Lapetina EG、Lacal JC、Reep BR、Molina y Vedia L.一种ras相关蛋白被磷酸化并通过增加人类血小板中cAMP水平的激动剂移位。美国国家科学院院刊。1989年5月；86(9):3131–3134. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
  • van der Sluijs P、Hull M、Huber LA、M–le P、Goud B、Mellman I。可逆磷酸化-去磷酸化决定rab4在细胞周期中的定位。EMBO J。1992年12月；11(12):4379–4389. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
  • Bailly E、McCaffrey M、Touchot N、Zahraoui A、Goud B、Bornens M。通过p34cdc2对Rab家族的两个小GTP结合蛋白进行磷酸化。自然。1991年4月25日；350(6320):715–718.[公共医学][谷歌学者]
  • Martin ME、Hidalgo J、Rosa JL、Crottet P、Velasco A.蛋白激酶A活性对ADP-核糖基化因子1与高尔基体膜结合的影响。生物化学杂志。2000年6月23日；275(25):19050–19059.[公共医学][谷歌学者]
  • Saikumar P，Ulsh LS，Clanton DJ，Huang KP，Shih TY。蛋白激酶对c-ras p21的新型磷酸化。癌基因研究。1988;三(3):213–222.[公共医学][谷歌学者]
  • Lang P、Gesbert F、Delescene Carmagnat M、Stancou R、Pouchelet M、Bertoglio J。RhoA的蛋白激酶A磷酸化介导细胞毒性淋巴细胞中环状AMP的形态和功能作用。EMBO J。1996年2月1日；15(3):510–519. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
  • Dong JM、Leung T、Manser E、Lim L.cAMP诱导的形态学变化被激活的RhoA小GTPase和Rho激酶ROKalpha抵消。生物化学杂志。1998年8月28日；273(35):22554–22562.[公共医学][谷歌学者]
  • Kwak JY，Uhlinger DJ。人类中性粒细胞无细胞系统中蛋白激酶A对磷脂酶D的下调。生物化学与生物物理研究委员会。2000年1月7日；267(1):305–310.[公共医学][谷歌学者]
  • Kwon T、Kwon DY、Chun J、Kim JH、Kang SS。Akt蛋白激酶通过Rac1丝氨酸71的磷酸化抑制Rac1-GTP结合。生物化学杂志。2000年1月7日；275(1):423–428.[公共医学][谷歌学者]
  • Hori Y、Kikuchi A、Isomura M、Katayama M、Miura Y、Fujioka H、Kaibuchi K、Takai Y。rho蛋白C末端区域的翻译后修饰对于其与膜的相互作用以及刺激性和抑制性GDP/GTP交换蛋白非常重要。致癌物。1991年4月；6(4):515–522.[公共医学][谷歌学者]
  • Takai Y、Kaibuchi K、Kikuchi A、Sasaki T。戊二醛修饰对小G蛋白与调节因子相互作用的影响。方法酶学。1995;250:122–133.[公共医学][谷歌学者]
  • Ueda T，Kikuchi A，Ohga N，Yamamoto J，Takai Y.从牛脑细胞液中纯化和表征一种新的调节蛋白，抑制GDP从ras p21样GTP结合蛋白rhoB p20中分离并随后与之结合。生物化学杂志。1990年6月5日；265(16):9373–9380.[公共医学][谷歌学者]
  • Gietz D，St Jean A，Woods RA，Schiestl RH。完整酵母细胞高效转化的改进方法。核酸研究。1992年3月25日；20(6):1425–1425. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
  • Self AJ，Hall A.从大肠杆菌中纯化重组Rho/Rac/G25K。方法酶制剂。1995;256:3–10.[公共医学][谷歌学者]
  • Self AJ，Hall A.内源性核苷酸交换和GTP水解率的测量。方法酶制剂。1995;256:67–76.[公共医学][谷歌学者]
  • Laemmli UK。T4噬菌体头部组装过程中结构蛋白的裂解。自然。1970年8月15日；227(5259):680–685.[公共医学][谷歌学者]
  • Sadra A、Cinek T、Imboden JB。使用非阻断技术对免疫印迹膜进行多次探测：速度和灵敏度方面的优势。分析生物化学。2000年2月15日；278(2):235–237.[公共医学][谷歌学者]
  • Chardin P.Rnd蛋白：一个新的Rho相关蛋白家族，干扰丝状肌动蛋白结构的组装和细胞粘附。Prog分子亚细胞生物学。1999;22:39–50.[公共医学][谷歌学者]
  • Sasaki T、Kato M、Nishiyama T、Takai Y。rho和rac小GTP-结合蛋白的核苷酸交换率通过其调节蛋白Smg GDS不同程度地提高。生物化学与生物物理研究委员会。1993年8月16日；194(3):1188–1193.[公共医学][谷歌学者]
  • Backlund PS.，Jr低分子量GTP-结合蛋白G25K的羧基甲基化：通过rhoGDI调节羧基甲基。生物化学与生物物理研究委员会。1993年10月29日；196(2):534–542.[公共医学][谷歌学者]
  • Fukumoto Y、Kaibuchi K、Hori Y、Fujioka H、Araki S、Ueda T、Kikuchi A、Takai Y。rho蛋白的新型调节蛋白（GDI）ras p21样小GTP结合蛋白的分子克隆和表征。致癌物。1990年9月；5(9):1321–1328.[公共医学][谷歌学者]
  • Bourmeyster N，Vignais光伏。Rho-GDI的磷酸化可稳定中性粒细胞胞浆中的Rho-A-Rho-GDI复合物。生物化学与生物物理研究委员会。1996年1月5日；218(1):54–60.[公共医学][谷歌学者]
  • Gerner C、Frohwein U、Gotzmann J、Bayer E、Gelbmann D、Bursch W、Schulte-Hermann R。通过高通量蛋白质组分析分析Fas诱导的凋亡。生物化学杂志。2000年12月15日；275(50):39018–39026.[公共医学][谷歌学者]
  • Hancock JF、Cadwallader K、Marshall CJ。甲基化和蛋白水解对于有效结合戊二醛化p21K-ras（B）的膜至关重要。EMBO J。1991年3月；10（3） ：641–646。 [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
  • Newcombe AR、Stockley RW、Hunter JL、Webb MR。rac1及其鸟嘌呤核苷酸解离抑制剂（GDI）之间的相互作用，由连接到GDI的单一荧光香豆素进行监测。生物化学。1999年5月25日；38(21):6879–6886.[公共医学][谷歌学者]
  • Allal C、Favre G、Couderc B、Salicio S、Sixou S、Hamilton AD、Sebti SM、Lajoie-Mazenc I、Pradines A。RhoA预酸化是促进细胞生长、转化和细胞骨架组织所必需的，但不是诱导血清反应元件转录所必需的。生物化学杂志。2000年10月6日；275(40):31001–31008.[公共医学][谷歌学者]
  • Michaelson D，Silletti J，Murphy G，D’Eustachio P，Rush M，Philips MR.活细胞中Rho GTPase的差异定位：高变区和RhoGDI结合的调节。细胞生物学杂志。2001年1月8日；152(1):111–126. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
  • Gosser YQ、Nomanbhoy TK、Aghazadeh B、Manor D、Combs C、Cerione RA、Rosen MK。Rho GDP解离抑制剂的C末端结合域将N末端抑制肽导向GTPases。自然。1997年6月19日；387(6635):814–819.[公共医学][谷歌学者]
  • Longencker K、Read P、Derewenda U、Dauter Z、Liu X、Garrard S、Walker L、Somlyo AV、Nakamoto RK、Somlyou AP等。RhoGDI如何与Rho结合。晶体学报D生物晶体。1999年9月；55（第9部分）：1503-1515。[公共医学][谷歌学者]
  • Takai Y、Kaibuchi K、Kikuchi A、Kawata M.小GTP结合蛋白。Int Rev细胞。1992;133:187–230.[公共医学][谷歌学者]
  • Wei Y、Zhang Y、Derewenda U、Liu X、Minor W、Nakamoto RK、Somlyo AV、Somlyou AP、Derevenda ZS。RhoA-GDP的晶体结构及其功能含义。自然结构生物。1997年9月；4(9):699–703.[公共医学][谷歌学者]
  • Shimizu T，Ihara K，Maesaki R，Kuroda S，Kaibuchi K，Hakoshima T。通过与GDP复合的无Mg2+形式的RHOA的晶体结构揭示了开关I的开放构象。对GDP/GTP交换机制的影响。生物化学杂志。2000年6月16日；275(24):18311–18317.[公共医学][谷歌学者]
  • Fritz G，Lang P，Just I.小GTP-结合蛋白Rho表达和调节的组织特异性变化。Biochim生物物理学报。1994年7月21日；1222(3):331–338.[公共医学][谷歌学者]
  • Tolias KF，Couvillon AD，Cantley LC，Carpenter CL.Rac1-和RhoGDI-相关脂质激酶信号复合物的表征。分子细胞生物学。1998年2月；18(2):762–770. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
  • Hancock JF、Paterson H、Marshall CJ。除了CAAX基序外，还需要一个多碱基结构域或棕榈酰化，以将p21ras定位到质膜上。单元格。1990年10月5日；63(1):133–139.[公共医学][谷歌学者]
  • Hancock JF、Cadwallader K、Paterson H、Marshall CJ。一个CAAX或CAAL基序和第二个信号足以用于ras蛋白的质膜靶向。EMBO J。1991年12月；10(13):4033–4039. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
  • Sauzeau V、Le Jeune H、Cario Toumaniantz C、Smolenski A、Lohmann SM、Bertoglio J、Chardin P、Pacaud P、Loirand G。环GMP依赖性蛋白激酶信号通路抑制RhoA诱导的血管平滑肌收缩的Ca2+增敏。生物化学杂志。2000年7月14日；275(28):21722–21729.[公共医学][谷歌学者]
  • Sawada N、Itoh H、Yamashita J、Doi K、Inoue M、Masatsugu K、Fukunaga Y、Sakaguchi S、Sone M、Yamahara K等。cGMP依赖性蛋白激酶磷酸化和灭活RhoA。生物化学与生物物理研究委员会。2001年1月26日；280(3):798–805.[公共医学][谷歌学者]
  • Laudanna C，Campbell JJ，Butcher EC。细胞内cAMP升高可抑制趋化剂诱导的RhoA活化和整合素依赖性白细胞粘附。生物化学杂志。1997年9月26日；272(39):24141–24144.[公共医学][谷歌学者]
文章来自生物化学杂志由提供生物化学学会