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生物化学J。2000年9月1日;350(第2部分):579–588。
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丝氨酸-175在调节钙调素分子构象中的作用。

摘要

Calponin是一种肌动蛋白丝相关蛋白,存在于平滑肌和非肌肉细胞中。Calponin通过蛋白激酶C(PKC)催化的丝氨酸-175磷酸化阻止肌动蛋白与肌球蛋白的相互作用。为了研究丝氨酸-175介导调控的分子基础,我们使用单克隆抗体(mAb)表位分析检测了磷酸化对钙调素构象的影响。为了监测PKC介导的磷酸化或丝氨酸-175-->丙氨酸(S175A)取代诱导的calponin构象变化,研制了8株针对鸡gizzard calponin不同表位的单克隆抗体。测定了固定在微量平板上或与肌动蛋白原肌球蛋白细丝结合的钙调素单克隆抗体的相对亲和力,并对游离钙调素和固定钙调素进行了表位竞争。单克隆抗体副肽和钙调素表位之间结合亲和力的变化表明了丝氨酸-175修饰诱导的几种构象效应:(a)钙调素的结构通过丝氨酸-175-修饰而重新配置,支持丝氨酸-155的调节功能;(b) 在游离和细丝相关的钙调素中都存在不受丝氨酸-175修饰影响的亚分子结构,表明丝氨酸-175-基构象调控是一种靶向变构效应;(c) 游离钙调素和细丝相关钙调素之间存在显著的构象变化,表明分子构象存在两种功能状态;(d)细丝结合型和游离型calponins的不同表位特征表明calponin是一种柔性分子,丝氨酸-175的修饰也可能决定了增加表位可及性的结构柔性。这些结果为calponin的结构-功能关系及其磷酸化调控提供了新的信息。

全文

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选定的引用

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文章来自生物化学杂志由以下人员提供生物化学学会