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生物化学杂志。2000年1月15日;345(第2部分):365–375。
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PMID:10620514

人乳腺癌细胞谷氨酰胺酶的分子克隆、测序和表达研究。

摘要

磷酸活化谷氨酰胺酶(GA)在某些类型的肿瘤中过度表达,但其在肿瘤细胞生长和增殖中的确切作用尚不清楚。在这里,我们描述了通过结合lambdagt10 cDNA文库筛选和cDNA末端快速扩增(RACE)技术分离人类乳腺癌ZR75细胞的全长cDNA克隆。人类GA的cDNA为2408 nt,具有1806个碱基的开放阅读框,编码602个残基蛋白,预测分子量为66309 Da。推导出的氨基酸序列包含一个假定的线粒体导入前序列,N末端有14个残基。在大肠杆菌中异源表达和纯化得到一个预期分子大小的产物,该产物可通过使用针对重组人GA的抗体进行识别。序列分析表明,人GA与大鼠肝脏酶高度相似。Northern凝胶分析显示,该基因存在于人类肝脏、大脑和胰腺中,其中主要转录物为2.4 kb,但不存在于肾脏、心脏、骨骼肌、肺或胎盘中。这些结果强烈表明,第一个克隆的人类GA,即来自ZR-75乳腺癌细胞的GA,以及可能来自人类肝脏和大脑的GA,是肝脏型同工酶,与目前的观点形成鲜明对比,即认为肾脏型是所有具有GA活性的组织中表达的亚型,出生后的肝脏除外。

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选定的引用

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文章来自生物化学杂志由以下人员提供生物化学学会