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生物化学杂志。1998年7月15日；333（第2部分）：285–290。
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大鼠肾线粒体重构活性谷氨酰胺载体的鉴定和纯化。

C英迪威,G Abruzzo（阿布鲁佐）,I斯蒂帕尼、和F帕尔米耶里
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摘要

来自大鼠肾线粒体的谷氨酰胺载体溶于十二烷基辛氧基亚乙基醚（C12E8）并在羟基磷灰石上部分纯化，通过硅藻土色谱法鉴定并完全纯化。在SDS/PAGE上，纯化的谷氨酰胺载体由一条表观分子量为41.5kDa的蛋白带组成。当重组成脂质体时，谷氨酰胺载体催化了谷氨酰胺的单向流动和谷氨酰胺/谷氨酰胺的反转运，而谷氨酰胺/麸胺的反转运可被5’-磷酸吡哆醛和N-乙基马来酰亚胺的混合物完全抑制。与线粒体提取物相比，载体蛋白纯化了474倍，回收率为58%，蛋白质产率为0.12%。谷氨酰胺载体介导的转运对左旋谷氨酰胺是相当特异的。左旋天门冬氨酸是唯一能被重组载体蛋白有效转运的其他氨基酸。d-谷氨酰胺、l-谷氨酸和l-天冬氨酸是非常差的底物。几种巯基和氨基试剂抑制了转运活性。

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选定的引用

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