Properties of rat renal phosphate-dependent glutaminase coupled to Sepharose. Evidence that dimerization is essential for activation.

R F Morehouse; N P Curthoys

doi:10.1042/bj1930709

生物化学杂志。1981年3月1日；193(3): 709–716.

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PMID：7305957

Sepharose偶联大鼠肾磷酸盐依赖性谷氨酰胺酶的性质。二聚化对活化至关重要的证据。

R F莫尔豪斯和N P Curthoys公司

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摘要

在没有磷酸盐的情况下，纯化的大鼠肾脏磷酸依赖性谷氨酰胺酶作为一种催化活性不高的原聚体存在。磷酸盐的添加导致谷氨酰胺酶的二聚化和活化。谷氨酰胺酶的二聚体形式与CNBr活化的Sepharose共价连接，活性保留率为84%。即使在没有添加磷酸盐的情况下，也至少有70%的结合谷氨酰胺酶活性表达。此外，6-重氮-5-氧代-L-去甲亮氨酸仅与谷氨酰胺酶的催化活性形式相互作用，在没有或存在添加的磷酸盐的情况下，以相同的速率使结合的二聚形式的谷氨酰胺酶失活。因此，二聚体结构的保留显然足以维持谷氨酰胺酶的活性。相反，将酶的原聚体形式与Sepharose偶联，只保留了3%的磷酸诱导的谷氨酰胺酶活性。然而，在促进二聚化的条件下，通过添加可溶性谷氨酰胺酶可以重建高达48%的这种活性。这些结果表明，单体形式的谷氨酰胺酶具有最小的固有活性，二聚反应是磷酸诱导谷氨酰胺酶活化的一个重要步骤。

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