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生物化学杂志。1995年6月1日;308(第2部分):629–633。
数字对象标识:10.1042/bj3080629
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PMID:7772051

通过从肿瘤细胞线粒体内膜分离的囊泡转运谷氨酰胺。

摘要

线粒体内膜囊泡是通过洗涤剂滴定从埃利希腹水癌细胞中分离出来的,通过一个非常有效的转运系统积累L-谷氨酰胺。囊泡缺乏任何磷酸激活的谷氨酰胺酶活性,允许在不受L-谷氨酰胺代谢干扰的情况下测量转运速率。在最初的60 s内,转运的时间过程是线性的,在120 min后达到稳定状态。L-谷氨酰胺转运表现出合作性,希尔系数为2.2;动力学参数S0.5和Vmax的值分别为每mg蛋白质5 mM和26 nmol/30 s。pH依赖曲线呈钟形,最适pH值约为8.0。L-谷氨酰胺的摄取不受D-谷氨酰胺、L-半胱氨酸、L-组氨酸、L-丙氨酸、L-丝氨酸和L-亮氨酸摩尔过量量50倍的影响,而L-谷氨酸是一种较差的抑制剂。结构类似物L-谷氨酸γ-羟肟酯(5mM)抑制净摄取68%;有趣的是,其他类似物(6-重氮-5-氧代-L-去甲亮氨酸、吖啶和L-谷氨酸γ-肼)无效。无味硫醇试剂对氯汞苯磺酸(0.5mM)完全阻断线粒体对L-谷氨酰胺的摄取;相反,其他硫醇试剂(mersalyl和N-乙基马来酰亚胺)对转运没有显著影响。这些数据证实了线粒体内膜中存在一个对L-谷氨酰胺具有高容量的特定转运系统,这是肿瘤细胞中高效谷氨酰胺水解之前的一步。

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