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状态 |
2021年3月1日公开 |
标题 |
热_样品_1 |
样品类型 |
SRA公司 |
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源名称 |
胎盘间盘
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有机体 |
褐家鼠 |
特点 |
组织:胎盘盘 基因型:Ascl2突变 应变:霍尔兹曼 妊娠日:12.5
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提取的分子 |
总核糖核酸 |
提取协议 |
Holtzman Sprague-Dawley大鼠被安置在堪萨斯大学医学中心(KUMC)的一个环境控制设施中,0600至2000小时内灯亮,允许自由获取食物和水。雌性大鼠(8-10周龄)与成年雄性大鼠(>3个月龄)交配。通过检查阴道灌洗液来评估交配情况。阴道中存在精子被指定为gd 0.5。在妊娠第12.5天解剖胎盘部位,分离胎盘间盘。将解剖的胎盘间盘组织在液氮中快速冷冻,并在-80°C下保存,直到进行RNA分离。使用TRIzol试剂(Thermo Fisher Scientific,目录号15596018)从组织中分离出总RNA。所有大鼠均按照机构政策进行饲养,以便在研究中使用KUMC动物饲养和使用委员会批准的方案来饲养脊椎动物。 使用TRIzol试剂(货号15596018,Thermo Fisher,Waltham,MA)从细胞和组织中分离出总RNA。 使用Illumina TruSeq RNA制备试剂盒(Illuminia,San Diego,CA)从总RNA样本中制备互补DNA文库。使用KUMC基因组测序设施中的TruSeq 200-cycle SBS试剂盒(Illumina),使用HiSeq2000 DNA测序器(100-bp配对读取)对条形码cDNA文库进行多路复用和测序。使用CLC Genomics Workbench 12.0将*.fastq文件中的读数映射到大鼠参考基因组(Ensembl Rnor_5.0.78)(加利福尼亚州红木市齐亚根)。mRNA丰度以外显子每kb读数/百万读数映射表示。假发现率0.05被用作显著差异表达(正常血糖与高血糖)的临界值。
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图书馆战略 |
RNA-Seq号 |
库源 |
转录组学的 |
库选择 |
cDNA |
仪器型号 |
Illumina NovaSeq公司6000 |
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数据处理 |
使用CLC Genomics Workbench 12.0将*.fastq文件中的读数映射到大鼠参考基因组(Ensembl Rnor_5.0.78)(加利福尼亚州红木市齐亚根)。 mRNA丰度以外显子每kb读数/百万读数映射表示。 假发现率0.05被用作显著差异表达的临界值。 使用Ingenuity Pathway Analysis(Qiagen)分析转录表达的功能模式。 基因组构建:大鼠参考基因组(Ensemble Rnor_5.0.78) 基因组构建:人类参考基因组(GRCh37)
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提交日期 |
2020年7月13日 |
上次更新日期 |
2021年3月1日 |
联系人姓名 |
凯拉·玛格丽特·瓦伯格 |
电子邮件 |
kaelasevent@gmail.com, kmvarberg@cmh.edu
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电话 |
7852181354
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组织名称 |
儿童慈善
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部门 |
儿科
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门诊化验室 |
瓦伯格实验室
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街道地址 |
吉勒姆路2401号;CMRI 7902.19号
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西蒂 |
堪萨斯城 |
省/自治区 |
卫生官员 |
邮政编码 |
64108 |
国家 |
美国 |
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平台ID |
GPL25947型 |
系列(1) |
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关系 |
生物样品 |
SAMN15519044号 |
SRA公司 |
SRX8722504型 |