酶活性测定方法

果胶酶是水果和纺织工业广泛使用的一组酶。除了这些工业应用外，这些酶在原生质体融合技术和植物病理学中也发挥着重要的生物学作用。由于果胶酶在各个领域的应用越来越广泛，因此了解这些酶的性质和性质对于高效应用非常重要。在过去的几年里，人们对果胶酶的分离和表征进行了深入的研究。它们是一组通过各种机制促进果胶降解的酶，可分为酯酶、消除解聚酶（裂解酶）和水解解聚酶（聚半乳糖醛酸酶）。本章将描述用于量化果胶酶及其活性的主要分析的当前知识状态。

过氧化物酶是利用各种过氧化物作为氧化过程中的电子受体的酶，在自然界中广泛存在。它们的活性通常通过分光光度法测定，即在H2O2存在下形成缩合物或氧化产物，或者通过滴定法测定，使用高锰酸钾或硫代硫酸钠测量溶液中的游离过氧化氢。

本章讨论了选择甲壳素降解微生物的方法，特别是那些基于胶态甲壳素分解形成清晰水解区的方法。此外，还介绍了检测和测量几丁质酶活性的主要方法，包括基于人工底物的几种外几丁质醇酶和内几丁质酸酶的测定，以及基于几丁质底物（如羟基几丁质或胶体几丁质）还原糖的测定。此外，还讨论了聚丙烯酰胺凝胶电泳中几丁质酶的检测方法。

纤维素酶由微生物、植物和一些动物分泌的糖苷水解酶组成。这些酶作用于纤维素结构的β-1,4-糖苷键的水解，纤维素结构是生物量中的主要聚合物。最近，在生物精炼概念内，纤维素酶在将木质纤维素材料生物转化为生物乙醇和生物基产品的过程中的应用受到了关注。除此之外，纤维素酶还广泛应用于纺织、食品、啤酒和葡萄酒、动物饲料、纸浆和造纸等不同的工业领域。本章将描述与使用可溶性和不溶性底物进行纤维素酶分析相关的一些当前知识状态，重点是需要标准化方法，以便在不同的酶制剂之间进行比较。

淀粉酶是一些最重要的工业酶。他们的家人由对广泛底物具有不同特异性的酶组成。内切淀粉酶组，包括α-淀粉酶，催化直链淀粉和支链淀粉结构中的内部α-1,4键，释放糊精各种长度。另一方面，外淀粉酶优先作用于底物，由几种酶代表，作用于分子小到麦芽糖（如麦芽糖酶）直到多糖（如糖化酶）。第三个该组包括去支链淀粉酶，包括支链淀粉酶和异淀粉酶，它们作用于α-1,6键（分支键）。这些酶组之间的协同作用是对提高产品发布率至关重要。因此，评估尽可能针对每个主要淀粉溶解组进行更特异性检测的方法酶，以了解它们的协同作用并评估潜在的微生物菌株用于生产。本章概述了主要淀粉水解酶，并提出了定量淀粉酶的三大类。

木聚糖酶是催化1,4-β-D-木糖苷水解的酶木聚糖中的键。在本章中，涉及木聚糖酶活性的几种技术讨论，特别是涉及定性和定量分析的用于木聚糖醇裂解筛选、选择和酶生产的强大工具微生物。本章还介绍了酶表征的方法包括pH和温度的优化，以及通过使用检测木聚糖酶聚丙烯酰胺凝胶电泳。

脂肪酶在自然环境中将三酰基甘油水解为二酰基甘油、单酰基甘油，脂肪酸和甘油。然而，在非水介质中，这些酶催化酯化和酯交换等反向反应。这些酶的分子结构和催化性能的多功能性使其可以用于各种工业，如：食品、化妆品、油脂化学、制药和洗涤剂。由于脂肪酶有多种应用，并且是众多研究的重点，本章包含了筛选产生脂肪酶的微生物和精细酶分析的指南，强调需要标准化方法，以比较不同实验室中不同来源的脂肪酶的催化效率。

酚氧化酶是一类具有广泛底物特异性的酶，含有大量酚类物质，具有多种生物技术应用。文献中有大量的方法可用于确定它们的活动。然而，光谱测定法更实用，用户评价也很好。动力学研究表明，测量产品外观的方法比测量底物消失的方法要好得多。因此，这里显示了这些方法。

谷氨酰胺转胺酶是一种通过在蛋白质、肽和各种伯胺之间引入共价交联来催化酰基转移反应的酶。这些酶非常重要，因为它们能够修饰蛋白质并充当生物胶。如今，微生物被认为是谷氨酰胺转胺酶的最佳来源，因为从哺乳动物组织中工业化生产谷氨酰胺转酰胺酶存在困难。本章介绍了谷氨酰胺转胺酶（TGase）活性测定的分析方法。此外，还将详细介绍筛选产生这种酶的微生物的定性和定量方法。

角质化酶是一类重要的酶，具有多种工业用途应用，包括羽毛残渣加工、羽毛粉生产、，洗涤剂、皮革和制药行业。在本章中，主要方法描述并讨论了用于检测其活性的方法。检测和量化方法角蛋白酶活性包括多底物的分光光度分析，酶谱和含有蛋白质底物的SDS-PAGE。关注当前这些生化分析方法的现状。

本章的目的是介绍用于研究肽酶的现代分析方法，如比色法和分光光度分析。检测肽酶活性的通用方法包括明胶和其他底物，这些底物使用一种称为酶谱的技术并入SDS-PAGE。这里介绍的所有方法都是发现和表征肽酶的重要工具。

单宁酶（E.C.3.1.1.20），也称为单宁酰基水解酶，是一种作用于单宁的水解酶。单宁酶是一种诱导酶，可催化水解单宁（如单宁酸）中酯键的断裂导致没食子酸和葡萄糖的生产。这种酶的大部分用于生产没食子酸酸，用于生产甲氧苄啶和合成酯，如没食子酸丙酯，一种用于食品工业的抗氧化剂。这种酶也应用于啤酒加工和果汁澄清、瞬时茶加工和酚类化合物污染废水的处理。单宁酶活性在几个领域，主要是在食品工业中，决心是极其重要的分析。

尿素酶是一种镍依赖性金属酶，由多种生物体，包括植物、细菌和真菌。它催化尿素水解成氨和二氧化碳。虽然植物和细菌的氨基酸序列脲酶关系密切，某些生物活性差异显著。迄今为止尽管提取的酶具有结构信息，但这些信息只能用于细菌性脲原体来自刀豆（Canavalia ensiformis），这是研究得最好的植物脲酶1926年结晶。尿素酶活性测定试验应基于直接或尿素酶检测的间接方法和大多数方法基于尿素水解活性分析。脲酶活性测定非常在几个领域都很重要，主要是在农业、医学和临床分析方面。