无细胞体外蛋白表达

作为生物技术领域试剂的领先供应商，我们了解方便易用的系统对于蛋白质表达的重要性，包括对传统表达系统具有挑战性的大蛋白和膜蛋白。创意生物城开发了无细胞在体外表达系统，以满足对这些特定蛋白质类型的蛋白质合成的日益增长的需求。

什么是无细胞体外试验蛋白质表达？

无电池在体外蛋白质表达可以在所谓的“耦合”系统中进行，在同一反应混合物中同时进行RNA转录和蛋白质翻译。它是蛋白质研究中许多应用的首选，包括蛋白质标记和难以表达的蛋白质（如膜蛋白和多蛋白复合物）的表达。建立该系统只需要两个基本条件：编码目标蛋白的模板和包含必要转录和翻译分子机制的反应溶液。

无细胞体外蛋白表达

细胞提取物提供反应溶液的全部或大部分分子

用于信使核糖核酸转录的核糖核酸聚合酶

多肽翻译用核糖体

tRNA和氨基酸

酶辅因子与能源

蛋白质折叠所必需的细胞成分

基因合成加密码子优化

时间线：1-2周

向量构造

时间表：1周

三

蛋白质表达与纯化

时间表：1-2周

可选服务

时间表：1-2周

质量控制

时间线：<1周

Creative BioMart提供多种无细胞在体外系统。选择无细胞系统应根据蛋白质的生物学性质、应用和用于蛋白质表达的模板。如果您想更多地讨论您的项目，我们的团队可以指导您完成无细胞表达的过程。

系统	优势	缺点
大肠杆菌提取	已建立的系统成本相对较低翻译速度快可与纳米盘组装结合用于膜蛋白可用的转基因菌株	真核生物系统无翻译后修饰需要优化密码使用
小麦胚芽	已建立的系统在真核生物无细胞系统中产量通常最高可溶性表达率高适用于合成大蛋白（～200kDa）	提取物制备耗时，成本相对较高蛋白质质谱研究中观察到一些背景磷酸化无糖基化
昆虫细胞裂解液	适合合成大蛋白 Cap独立翻译 N-糖基化可能二硫键的形成	相对较新的系统蛋白质产量低于大肠杆菌或小麦胚芽系统成本相对较高
兔网状内皮细胞溶解物	已建立的系统哺乳动物系统 Cap独立翻译经常用于研究	对添加剂敏感无糖基化观察到非靶蛋白的共表达血红蛋白占蛋白质的90%
人细胞裂解液	一些蛋白质修饰	低收益率对添加剂敏感