主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 兔单克隆[EPR18351]到SQSTM1/p62-BSA和无叠氮化合物 适用于:Flow Cyt(Intra)、IHC-P、WB、IP、ICC/IF 敲除已验证 反应对象:人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆[EPR18351]到SQSTM1/p62-BSA和无叠氮化合物 -
寄主物种 兔子 -
经过测试的应用程序 -
物种反应性 与以下物质反应: 人类 -
免疫原 重组全长蛋白。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:人肝和肾裂解物; U-2 OS、HCT116、HepG2和HeLa全细胞裂解物。 IHC-P:人类肝细胞癌和肺癌组织。 ICC/IF:HeLa细胞(未经处理和用氯喹处理)、HAP1细胞(不经处理和使用氯喹治疗)、U-2 OS细胞。 流式细胞仪(内部):PC-3细胞。 IP:HeLa和HepG2全细胞裂解物。
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一般注意事项
属性
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表格 液体 -
储存说明 在4°C下装运。 储存于+4°C。 请勿冻结。 -
存储缓冲区 pH值:7.2 成分:PBS -
承运人免费 是的 -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆性 单克隆 -
克隆编号 EPR18351(电子顺磁共振18351) -
同位素 免疫球蛋白G -
研究领域
关联产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
共轭试剂盒 -
同位素控制 -
KO细胞系 -
KO细胞裂解物 -
重组蛋白 -
相关产品
应用程序
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目标
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功能 结合泛素并可能通过TNF-α、神经生长因子(NGF)和白细胞介素-1调节NFKB1活化的适配器蛋白。 可能在肌肉细胞的TIN/TTN下游信号传导中发挥作用。 可能通过泛素化调节信号级联。 调节TRAF6和CYLD之间相互作用的适配器(通过相似性)。 可能参与细胞分化、凋亡、免疫反应和K(+)通道的调节。 -
组织特异性 普遍表达。 -
参与疾病 SQSTM1的缺陷是骨Paget病(PDB)的原因[MIM:602080]。 PDB是一种影响轴向骨骼的代谢性骨病,其特征是由于破骨细胞激活而导致局部骨转换增加和紊乱。 该病的表现包括骨痛、畸形、病理性骨折、耳聋、神经并发症和骨肉瘤风险增加。 PDB是一种慢性病,影响2-3%的40岁以上人口。 -
序列相似性 包含1个OPR域。 包含1个UBA域。 包含1个ZZ型锌指。 -
域 UBA结构域特异性结合多泛素化底物的“Lys-63”连接的多泛素链。 调节与TRIM55的交互。 OPR结构域介导同齐聚反应以及与PRKCZ、PRKCI、MAP2K5和NBR1的相互作用。 ZZ型锌指介导与RIPK1的相互作用。 -
翻译后 修改 磷酸化。 可能被PRKCZ磷酸化(根据相似性)。 通过TTN体外磷酸化。 -
手机定位 细胞质。 晚期内体。 核心。 沙科姆(根据相似性)。 在心肌中定位于肌节带(通过相似性)。 定位于晚期内体。 也可能局限于细胞核。 分别在阿尔茨海默病和帕金森病患者的神经纤维缠结和神经元路易体中积聚。 富含毛细胞星形细胞瘤的罗森塔尔纤维。 在肝细胞中,积聚在与酒精性肝炎、威尔逊病、印度儿童肝硬化相关的马洛里体和与肝细胞癌相关的透明体中。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
替代名称 A170抗体 DMRV抗体 60kDa抗体EBI 3相关蛋白
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图像
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所有车道: 抗-SQSTM1/p62抗体[EPR18351]( 约207305 ) 车道1: 野生型HCT116细胞裂解物 车道2: SQSTM1 CRISPR/Cas9编辑的HCT116细胞裂解物 3号车道: HepG2细胞裂解物 车道4: HeLa细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗兔IgG H&L(IRDye®800CW)预吸附( ab216773号 )稀释度为1/10000 预测的带宽大小: 47千Da 观察到的波段大小: 55千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 该数据是使用 约207305 ,相同的抗体克隆在不同的缓冲液配方中。 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约207305 在55 kDa时观察到。 红色-加载控制 约8245 在36kDa处观察到。 约207305 在野生型HCT116细胞中,抗SQSTM1/p62抗体[EPR18351]与SQSTM1/p62特异性反应。 CRISPR/Cas9编辑细胞系中观察到的条带 约266871 (CRISPR/Cas9编辑的细胞裂解物 ab257052号 )低于55kDa的车道可能代表截断形式和劈开碎片。 尚未对此进行进一步调查。 对野生型和SQSTM1/p62 CRISPR/Cas9编辑过的样品进行SDS-PAGE分析。 约207305 和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )分别在4°C下以1/1000稀释度和1/20000稀释度培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
该数据是在不同的缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 约207305 ). 约207305 在免疫细胞化学中显示与野生型U-2 OS细胞中的SQSTM1反应,在SQSTM2敲除细胞系中观察到信号丢失。 将野生型细胞和敲除细胞混合,并以1:1的比例在盖玻片上造粒。 用4%多聚甲醛固定细胞(15分钟),然后用0.1%Triton X-100渗透(10分钟),再用1/5000封闭。 然后将细胞与 约207305 在4°C下以1/200稀释过夜,然后在室温下用山羊抗兔二级抗体(Alexa Fluor)进一步孵育1小时 ® 555),0.5μg/ml。采集绿色(野生型)、红色(抗体染色)和远红外(敲除)通道。 显示了红色通道的典型灰度图像。 野生型和敲除型细胞分别用黄色和洋红色虚线勾勒。 所用镶嵌策略的示意图显示在右下面板上。 图像是用蔡司(LSM-880)拍摄的。 这些数据由YCharOS Inc.提供,该公司是一家开放科学公司,其任务是对所有人类蛋白质的商用抗体试剂进行表征。 Abcam和YCharOS正在合作,通过使生命科学界能够更好地评估商业上可用的抗体,帮助解决再现性危机。 -
克隆EPR18351(ab227992)已被Abcam成功偶联。 该图像是使用抗-SQSTM1/p62抗体[EPR18351](PE)生成的。 请参阅 ab225454磅 了解协议详细信息。 重叠直方图显示未经处理的HeLa细胞(红线)和经氯喹处理的HeLa细胞,50µM,24小时,(绿线)用 约225454 用80%甲醇固定细胞(5分钟),然后用0.1%PBS-Triton X-100渗透15分钟。然后将细胞培养在1x PBS/10%正常山羊血清中,以阻断非特异性蛋白-蛋白质相互作用,然后用抗体( 约225454 ,1/5000稀释)在22°C下保持30分钟。 同型对照抗体(黑线)为兔IgG(单克隆)藻红蛋白( ab209478年 )在与第一抗体相同的浓度和条件下使用。 未标记样本(蓝线)也用作对照。 使用50 mW黄/绿激光(561nm)和586/15带通滤波器采集了超过5000个事件。 该抗体在用4%甲醛固定(10分钟)/用0.1%PBS-Triton X-100渗透15分钟的HeLa+/-氯喹细胞中发出阳性信号。 -
所有车道: 抗-SQSTM1/p62抗体[EPR18351]( 约207305 )稀释度为1/1000 车道1: 野生型U-2 OS细胞裂解物 车道2: SQSTM1敲除U-2 OS细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 47千Da 该数据是在不同的缓冲液配方中使用相同的抗体得出的( 约207305 ). 约207305 Western blot显示与野生型U-2 OS细胞中的SQSTM1反应,在SQSTM1敲除细胞系中观察到信号丢失。 对野生型U-2OS和SQSTM1敲除细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 将膜在TBST中的5%牛奶中封闭1小时,然后与 约207305 以1/1000的稀释度在4°C下过夜。 在成像前,将斑点与山羊抗兔HRP二级抗体以0.2 ug/mL孵育。 这些数据由YCharOS Inc.提供,这是一家开放科学公司,其使命是表征所有人类蛋白质的市售抗体试剂。 Abcam和YCharOS正在合作,通过使生命科学界能够更好地评估商用抗体,帮助解决再现性危机。 -
约207305 HeLa细胞中SQSTM1/p62染色+/-氯喹(50μM,24小时)。 细胞用100%甲醇固定(5分钟),用0.1%Triton X-100渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后将细胞在+4°C下培养过夜 约207305 1μg/ml和 约195889年 ,小鼠抗α-管蛋白单克隆抗体(Alexa Fluor®594),1/250稀释(以伪红色显示),然后在室温下与山羊抗兔IgG二级抗体(Alexa Fluoro®488)进一步孵育1小时( 约150081 )浓度为2μg/ml(以绿色显示)。 用DAPI标记细胞核DNA(以蓝色显示)。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems,TCS SP8)拍摄图像。 该数据是在含有PBS、BSA、甘油和叠氮化钠的不同缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 约207305 ). -
克隆EPR18351(ab227992)已被Abcam成功偶联。 此图像是使用Anti-SQSTM1/p62抗体[EPR18351](Alexa Fluor®647)生成的。 请参阅 约225453 了解协议详细信息。 约225453 在野生型HAP1细胞和敲除细胞、未经处理和氯喹处理(50μM,24小时)中对SQSTM1/p62进行染色。 细胞用4%甲醛固定(10分钟),用0.1%Triton X-100透化5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS吐温中封闭1小时。 然后将细胞与 约225453 5μg/ml(以红色显示)和 约195887年 ,小鼠单克隆抗α-管蛋白(Alexa Fluor ® 488),在+4°C下,以1/250稀释度(以绿色显示)隔夜。 核DNA用DAPI标记为蓝色。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems,TCS SP8)拍摄图像。 -
该ICC数据是使用相同的抗SQSTM1/p62抗体克隆EPR18351在不同的缓冲液配方(cat# 约207305 ). 约207305 在野生型HAP1细胞和敲除细胞、未经处理和氯喹处理(50μM,24小时)中对SQSTM1进行染色。 细胞用4%甲醛固定(10分钟),用0.1%Triton X-100渗透5分钟,然后用1%牛血清/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后将细胞与 约207305 1μg/ml和 约195889年 以1/250稀释度(以伪红色显示)在+4°C下过夜,然后在室温下用山羊抗兔IgG二级抗体(Alexa Fluor®488)进一步孵育1小时( 约150081 )浓度为2μg/ml(以绿色显示)。 核DNA用DAPI标记为蓝色。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems,TCS SP8)拍摄图像。
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