概述
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产品名称 -
产品概述 Western blot数据表明,CRISPR基因编辑可能导致相关蛋白的截短。 请参阅数据图像。 -
亲代细胞系 拉吉 -
有机体 人类 -
突变描述 利用CRISPR/Cas9实现基因敲除,纯合子:外显子2 13 bp缺失 -
通道编号 <20 -
淘汰验证 桑格测序 -
重组说明 为了用作白细胞对照,将冻干液重新悬浮在50µL LDS*样品缓冲液中,使最终浓度达到2 mg/ml。对于还原条件,我们建议最终浓度为0.1 M DTT。 *不建议将SDS样品缓冲液用于这些冻干溶血物。 -
笔记 裂解液制备: 我们的裂解产物是使用RIPA缓冲液制成的,我们在其中添加了蛋白酶抑制剂鸡尾酒和磷酸酶抑制剂鸡尾液(比例:300:100:10)。 这意味着感兴趣的蛋白质变性了。 如果您需要天然形式的蛋白质,请使用活细胞版本-找到 在这里 。请参阅我们的裂解协议,了解我们裂解产物的制备方法的更多详细信息。 用户存储说明: 冻干液可在4°C下储存。 重构后,短期储存在-20°C下,长期储存在-80°C下。 获取数千种由常用癌症细胞系产生的敲除细胞裂解物。 有关敲除细胞裂解物的更多信息,请参阅此处。 Abcam没有也不打算为客户使用含有欧洲授权清单(附件十四)物质的产品申请REACH授权。 我们的客户有责任检查REACH授权和任何其他相关授权在其预期用途中应用的必要性。 本产品受The Broad Institute和ERS Genomics limited的有限使用许可,并采用专利技术开发。 有关有限使用许可证和相关专利的详细信息,请参阅我们的 有限使用许可证 和 专利页 . -
经过测试的应用程序
属性
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储存说明 储存于-80°C。 请参阅协议。 -
组件 1个套件 ab277364-人CD74敲除Raji细胞裂解物 1 x 100微克 ab277365-人类野生型Raji细胞裂解物 1 x 100微克 -
研究领域 -
单元格类型 伯基特淋巴瘤 -
疾病 淋巴瘤 -
性别 雄性
目标
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功能 通过在合成无肽II类α/β异二聚体后不久将其稳定在复合体中,并将复合体从内质网运输至内质体/溶酶体系统,从而在MHC II类抗原处理中发挥关键作用,抗原肽与MHC II级抗原的结合需要 地点。 作为细胞因子MIF的细胞表面受体。 -
序列相似性 包含1个甲状腺球蛋白1型结构域。 -
手机定位 细胞膜。 内质网膜。 高尔基体>跨高尔基体网络。内皮细胞。 溶酶体。 在内吞途径中通过许多细胞内隔间。 它既可以进行蛋白水解,也可以到达细胞膜。 -
UniProt提供的信息 -
替代名称 CD 74光盘 CD74型 CD74抗原
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KO细胞系 -
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应用
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图像
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车道1: 野生型Raji细胞裂解物30 ug 车道2: CD74敲除Raji细胞裂解物30 ug 3号车道: Jurkat细胞裂解物30 ug 车道4: HepG2细胞裂解物30 ug 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约270265 在35 kDa时观察到。 红色-加载控制 约7291 (小鼠抗α-管蛋白[DM1A])在55 kDa时观察到。 约270265 western blot显示与CD74反应。 在35kDa以下的敲除裂解物通道中观察到的条带可能代表截断形式和裂解碎片。 尚未对此进行进一步调查。 TBS-T(0.1%吐温)中3%牛奶中的膜被堵塞 ® )在与孵育之前 约270265 和 约7291 (小鼠抗α-管蛋白[DM1A])在4点过夜 ° C分别为1 ug/ml和1:20000稀释液。 印迹与山羊抗兔IgG H&L(IRDye)孵育 ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
车道1: 野生型Raji细胞裂解物30 ug 车道2: CD74敲除Raji细胞裂解物30 ug 3号车道: Jurkat细胞裂解物30 ug 车道4: HepG2细胞裂解物30 ug 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约108393 在35kDa下观察到。 红色-加载控制 约7291 (小鼠抗α-管蛋白[DM1A])在55 kDa时观察到。 约108393 western blot显示与CD74反应。 在35kDa以下的敲除裂解物通道中观察到的条带可能代表截断形式和裂解碎片。 尚未对此进行进一步调查。 用荧光蛋白印迹(TBS)封闭溶液封闭膜,然后用 约108393 和 约7291 (小鼠抗α-管蛋白[DM1A])在4点过夜 ° C,稀释度分别为1000分之一和20000分之一。 印迹与山羊抗兔IgG H&L(IRDye)孵育 ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
车道1: 野生型Raji细胞裂解物30 ug 车道2: CD74敲除Raji细胞裂解物30 ug 3号车道: Jurkat细胞裂解物30 ug 车道4: HepG2细胞裂解物30 ug 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约64772 在35 kDa时观察到。 红色-加载控制 约7291 (小鼠抗α-管蛋白[DM1A])在55 kDa时观察到。 约64772 western blot显示与CD74反应。 在35kDa以下的敲除裂解物通道中观察到的条带可能代表截断形式和裂解碎片。 尚未对此进行进一步调查。 用荧光蛋白印迹(TBS)封闭溶液封闭膜,然后用 约64772 和 约7291 (小鼠抗α-管蛋白[DM1A])在4点过夜 ° C分别为1 ug/ml和1:20000稀释液。 印迹与山羊抗兔IgG H&L(IRDye)孵育 ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
车道1: 野生型Raji细胞裂解物30 ug 车道2: CD74敲除Raji细胞裂解物30 ug 3号车道: Jurkat细胞裂解物30 ug 车道4: HepG2细胞裂解物30 ug 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约22603 在35 kDa时观察到。 红色-加载控制 约52866 (兔抗α-管蛋白抗体[EP1332Y])。 ab22603年 western blot显示与CD74反应。 在35kDa以下的敲除裂解物通道中观察到的条带可能代表截断形式和裂解碎片。 尚未对此进行进一步调查。 TBS-T(0.1%吐温)中3%牛奶中的膜被堵塞 ® )在与孵育之前 约22603 和 约52866 (兔抗α-微管蛋白抗体[EP1332Y])在4 ° C分别为1 ug/ml和1:20000稀释液。 印迹与山羊抗鼠IgG H&L(IRDye)孵育 ® 800CW)预吸收床( 约216772 )和山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( ab216777号 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
车道1: 野生型Raji细胞裂解物30 ug 车道2: CD74敲除Raji细胞裂解物30 ug 3号车道: Jurkat细胞裂解物30 ug 车道4: HepG2细胞裂解物30 ug 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- ab9514型 在35 kDa时观察到。 红色-加载控制 约52866 (兔抗α-管蛋白抗体[EP1332Y])。 ab9514型 western blot显示与CD74反应。 在35kDa以下的敲除裂解物通道中观察到的条带可能代表截断形式和裂解碎片。 尚未对此进行进一步调查。 用荧光蛋白印迹(TBS)封闭溶液封闭膜,然后用 ab9514型 和 约52866 (兔抗α-管蛋白抗体[EP1332Y])于4时过夜 ° C分别为5 ug/ml和1:20000稀释液。 印迹与山羊抗鼠IgG H&L(IRDye)孵育 ® 800CW)预吸收床( 约216772 )和山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( ab216777号 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
纯合子:第2外显子13 bp缺失
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