主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 兔单克隆[EPR4064]至CD74 适用于:间接ELISA、WB、IHC-P、ICC/IF、流式细胞仪(Intra)、IHC-Fr 敲除已验证 反应对象:人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆[EPR4064]至CD74 -
寄主物种 兔子 -
经过测试的应用程序 -
物种反应性 与以下物质反应: 人类 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 Daudi、Jurkat、Raji和Ramos细胞裂解液; 人扁桃体组织; Raji细胞。 IHC-Fr:冷冻人扁桃体组织切片
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一般注意事项
属性
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表格 液体 -
储存说明 在4°C下装运。 储存于-20°C。 在-20°C下稳定12个月。 -
存储缓冲区 pH值:7.20 防腐剂:0.05%叠氮化钠 成分:0.1%牛血清白蛋白、40%甘油(甘油、甘油)、9.85%甘氨酸、50%组织培养上清液 -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆性 单克隆的 -
克隆编号 EPR4064 -
同位素 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
同位素控制 -
KO细胞系 -
KO细胞裂解物 -
重组蛋白
应用
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目标
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功能 通过在合成无肽II类α/β异二聚体后不久将其稳定在复合体中,并将复合体从内质网运输至内质体/溶酶体系统,从而在MHC II类抗原处理中发挥关键作用,抗原肽与MHC II级抗原的结合需要 地点。 作为细胞因子MIF的细胞表面受体。 -
序列相似性 包含1个甲状腺球蛋白1型结构域。 -
细胞定位 细胞膜。 内质网膜。 高尔基体>转高尔基体网络。内切体。 溶酶体。 在内吞途径中通过许多细胞内隔间。 它既可以进行蛋白水解,也可以到达细胞膜。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
替代名称 CD74抗体 CD74抗体 CD74抗原(主要组织相容性复合体的不变多肽,II类抗原相关)抗体
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图像
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Leica Biosystems BOND®RX仪器使用标准协议对冰冻人类正常扁桃体*切片进行CD74染色的IHC图像。 染色前将切片固定在10%多聚甲醛中(10分钟)。 该切片在室温下与ab108393,0.05ugml孵育15分钟,并使用HRP共轭紧凑聚合物系统进行检测。 DAB被用作显色剂。 然后用苏木精对切片进行复染,并用DPX固定。 插入的二级对照图像取自无一级抗体的相同分析。 *从人体研究组织库获得的组织,由美国国立卫生研究院剑桥生物医学研究中心支持 对于其他IHC染色系统(自动化和非自动化),客户应优化可变参数,如抗原回收条件、初级抗体浓度和抗体孵育时间。 -
阴性对照图像:使用标准协议在徕卡生物系统BOND®RX仪器上对冰冻人类正常心脏*切片进行CD74染色的IHC图像。 染色前将切片固定在10%多聚甲醛中(10分钟)。 将切片与ab108393,0.05ugml在室温下孵育15分钟,并使用HRP缀合的紧密聚合物系统进行检测。 DAB被用作显色剂。 然后用苏木精对切片进行复染,并用DPX固定。 插入的二级对照图像取自无一级抗体的相同分析。 *从人体研究组织库获得的组织,由美国国立卫生研究院剑桥生物医学研究中心支持 对于其他IHC染色系统(自动化和非自动化),客户应优化可变参数,如抗原回收条件、初级抗体浓度和抗体孵育时间。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗CD74抗体[EPR4064](ab108393) 车道1: 野生型Raji细胞裂解物 车道2: CD74敲除Raji细胞裂解物 车道3: Daudi细胞裂解物 车道4: Jurkat细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 34千帕 观察到的频带大小: 34千帕 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在34 kDa下观察到ab108393。 红色-加载控制 约7291 (小鼠抗α-管蛋白[DM1A])在55 kDa时观察到。 Western blot显示ab108393与野生型Raji细胞中的CD74反应,在CD74敲除细胞系中观察到信号丢失 约273876 (敲除细胞裂解物 约273830 ). 对野生型Raji和CD74敲除细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 在用ab108393和 约7291 (小鼠抗α-管蛋白[DM1A])在4°C下过夜,分别以1/1000和1/20000稀释。 印迹与山羊抗兔IgG H&L(IRDye)孵育 ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
在不同抗体浓度和1000 ng/mL抗原浓度下使用ab108393进行ELISA。使用碱性磷酸酶结合的AffiniPure山羊抗狂犬病IgG(H+L)作为二级抗体。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗CD74抗体[EPR4064](ab108393) 车道1: 野生型Raji细胞裂解物 车道2: CD74 CRISPR/Cas9编辑的Raji细胞裂解物 车道3: Jurkat细胞裂解物 车道4: HepG2细胞裂解物 每车道30µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 34千帕 观察到的频带大小: 35千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在35 kDa下观察到ab108393。 红色-装载控制, 约7291 (小鼠抗α-管蛋白[DM1A])在55 kDa时观察到。 western blot显示ab108393与CD74反应。 在CD74 CRISPR/Cas9编辑的细胞系中观察到的条带 约273378 (CRISPR/Cas9编辑的裂解物 约275529 )低于35kDa可能代表一种截断形式。这还没有进一步研究。 在用ab108393和 约7291 (小鼠抗α-管蛋白[DM1A])在4°C下过夜,分别以1/1000和1/20000稀释。 印迹与山羊抗兔IgG H&L(IRDye)孵育 ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
用1/100稀释度的ab108393对石蜡包埋的人扁桃体组织中CD74进行免疫组织化学分析。 在开始IHC染色方案之前,用pH为6的柠檬酸缓冲液进行热介导抗原回收。 -
细胞内细胞内流式细胞术重叠直方图显示野生型Raji(绿线)和CD74敲除Raji细胞( 约273378 )ab108393染色(红线)。 将细胞用80%甲醇固定(5分钟),然后用0.1%PBS Triton X-100透化15分钟。然后将细胞在含有10µg/ml人IgG和10%正常山羊血清的1x PBS中孵育,以阻断FC受体和非特异性蛋白-蛋白相互作用,然后用抗体(ab108393)(1x10 6 在22°C下,在100µl(0.2µg/ml)中放置30分钟。 山羊抗兔IgG H&L(Alexa Fluor)二级抗体 ® 488,预吸附)( 约150081 )于2000年1月在22°C下使用30分钟。 同型对照抗体为兔IgG(单克隆)( 约172730 )在与主要抗体相同的浓度和条件下使用(野生型Raji细胞-黑线;CD74敲除Raji淋巴细胞 约273378 -灰色线)。 未标记样本也用作对照(为了简单起见,未显示此行)。 使用50 mW蓝光激光器(488nm)和525/40带通滤波器采集了超过5000个事件。 -
ICC/IF(免疫细胞化学/免疫荧光)对RAMOS(人类Burkitt淋巴瘤)细胞系中ab108393染色CD74的共聚焦图像。 用4%多聚甲醛固定细胞,并用0.1%Triton X-100在PBS中渗透。用一抗(1/500)和Alexa Fluor®488-共轭山羊抗兔IgG多克隆培养样品( 约150077 )以1/1000的稀释度作为二级抗体。 DAPI用于1/200的核复染。 -
ab108393在RAMOS(人类Burkitt淋巴瘤)细胞系中表达CD74。 样品用4%多聚甲醛固定,并与第一抗体(1/150)在4°C下孵育30分钟。 AnAlexa荧光粉 ® 第二抗体为488结合的山羊兔IgG(1/2000)。 对照:未与一级抗体和二级抗体孵育的细胞(蓝色)。 -
1/1000稀释的抗CD74抗体[EPR4064](ab108393)+10µg的Ramos细胞裂解液 预测的带宽大小: 34千帕 -
ab108393在正常脑组织中呈阴性染色。 在开始IHC染色方案之前,用pH为6的柠檬酸缓冲液进行热介导抗原回收。 -
ab108393在B细胞淋巴瘤组织中呈阳性染色。 在开始IHC染色方案之前,用pH为6的柠檬酸缓冲液进行热介导抗原回收。 -
ab108393在正常胎盘组织中呈阴性染色。 在开始IHC染色方案之前,用pH为6的柠檬酸缓冲液进行热介导抗原回收。 -
ab108393在正常脾组织中呈阳性染色。 在开始IHC染色方案之前,用pH为6的柠檬酸缓冲液进行热介导抗原回收。 -
ab108393在正常心脏组织中呈阴性染色。 在开始IHC染色方案之前,用pH为6的柠檬酸缓冲液进行热介导抗原回收。 -
ab108393在正常肝组织中呈阴性染色。 在开始IHC染色方案之前,用pH为6的柠檬酸缓冲液进行热介导抗原回收。
数据表和文件
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SDS下载 -
数据表下载