概述
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产品名称 -
产品概述 CRISPR/Cas9实现的敲除细胞裂解物。 -
亲代细胞系 THP-1型 -
有机体 人类 -
突变描述 通过使用CRISPR/Cas9实现的敲除,纯合:外显子2中的2个碱基缺失 -
通道编号 <20 -
淘汰验证 Sanger测序,Western Blot(WB) -
重组说明 为了用作白细胞对照,将冻干液重新悬浮在50µL LDS*样品缓冲液中,使最终浓度达到2 mg/ml。对于还原条件,我们建议最终浓度为0.1 M DTT。 *不建议将SDS样品缓冲液用于这些冻干溶血物。 -
笔记 赖氨酸盐制备: 我们的裂解产物是使用RIPA缓冲液制成的,我们在其中添加了蛋白酶抑制剂鸡尾酒和磷酸酶抑制剂鸡尾液(比例:300:100:10)。 这意味着感兴趣的蛋白质变性了。 如果您需要天然形式的蛋白质,请使用活细胞版本-找到 在这里 。请参阅我们的裂解协议,了解我们裂解产物的制备方法的更多详细信息。 用户存储说明: 冻干液可在4°C下储存。 复原后,在-20°C下短期保存或-80°C下长期保存。 获取数千种由常用癌症细胞系产生的敲除细胞裂解物。 有关敲除细胞裂解物的更多信息,请参阅此处。 Abcam没有也不打算申请客户使用含有欧洲授权清单(附件十四)物质的产品的REACH授权。 我们的客户有责任检查REACH授权和任何其他相关授权在其预期用途中应用的必要性。 本产品受The Broad Institute和ERS Genomics limited的有限使用许可,并采用专利技术开发。 有关有限使用许可证和相关专利的详细信息,请参阅我们的 有限使用许可证 和 专利页 . -
经过测试的应用程序
属性
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储存说明 储存温度为-80°C。 请参阅协议。 -
组件 1套 ab277313-人ANPEP敲除THP-1细胞裂解物 1 x 100微克 ab277314-人野生型THP-1细胞裂解物 1 x 100微克 -
研究领域 -
单元格类型 急性单核细胞白血病 -
疾病 急性单核细胞白血病 -
性别 男性
目标
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功能 广泛特异性氨肽酶。 在胃和胰腺蛋白酶水解蛋白质产生的肽的最终消化中发挥作用。 可能在胆固醇结石病的发病机制中起关键作用。 可能参与多种细胞类型调节肽的代谢,包括小肠和肾小管上皮细胞、巨噬细胞、粒细胞和中枢神经系统突触膜。 发现能切割与呈递细胞的主要组织相容性复合体II类分子结合的抗原肽,并降解突触连接处的神经递质。 也被认为是子宫内膜中IL-8生物利用度的调节器,因此可能有助于血管生成的调节。 用作急性髓细胞白血病的标记物,并在肿瘤侵袭中发挥作用。 在人类冠状病毒229E(HCoV-229E)感染的情况下,充当HCoV-299E尖峰糖蛋白的受体。 也可介导人巨细胞病毒(HCMV)感染。 -
组织特异性 在肾、肠和呼吸道的上皮细胞中表达; 粒细胞、单核细胞、成纤维细胞、内皮细胞、血脑屏障的脑周细胞、中枢神经系统细胞的突触膜。 也在子宫内膜基质细胞中表达,但在子宫内膜腺细胞中不表达。 发现于血管生成组织的血管系统、恶性胶质瘤和多种肿瘤类型的淋巴结转移中,但不存在于正常组织的血管中。 在血浆中发现了一种可溶形式。 在癌症患者的血浆和渗出液中发现其升高。 -
序列相似性 属于肽酶M1家族。 -
域 氨基酸260-353对于介导HCoV-229E感染易感性(在猪/人嵌合研究中)和更具体的氨基酸288-295(诱变研究)至关重要。 -
翻译后 修改 硫酸盐。 N-和O-糖基化。 可能经历蛋白质水解并产生可溶性形式。 -
手机定位 细胞膜。 细胞质>胞浆。 还检测到可溶性形式。 -
UniProt提供的信息 -
替代名称 丙氨酸(膜)氨肽酶 丙氨酸氨肽酶 氨肽酶M
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KO细胞系 -
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应用
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图像
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车道1: 野生型THP-1细胞裂解物30 ug 车道2: ANPEP敲除THP-1细胞裂解物30 ug 3号车道: PANC-1细胞裂解物30 ug 车道4: HEK-293细胞裂解物30 ug 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约227663 在160 kDa时观察到。 红色-加载控制 约8245 (小鼠抗GAPDH抗体[6C5])。 约227663 western blot显示与野生型THP-1细胞中的CD13反应,ANPEP敲除细胞系中观察到信号丢失 约273759 (敲除细胞裂解物ab275505)。 对野生型和CD13敲除THP-1细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 TBS-T(0.1%吐温)中3%牛奶中的膜被堵塞 ® )孵育前 约227663 和 约8245 (小鼠抗GAPDH抗体[6C5])在4时过夜 ° C,稀释度分别为1/400和1/20000。 印迹与山羊抗兔IgG H&L(IRDye)孵育 ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( ab216776年 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
车道1: 野生型THP-1细胞裂解物30 ug 车道2: ANPEP敲除THP-1细胞裂解物30 ug 3号车道: PANC-1细胞裂解物30 ug 车道4: HEK-293细胞裂解物30 ug 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约108382 在160 kDa时观察到。 红色-加载控制 约8245 (小鼠抗GAPDH抗体[6C5])。 约108382 western blot显示与野生型THP-1细胞中的CD13反应,ANPEP敲除细胞系中观察到信号丢失 约273759 (敲除细胞裂解物ab275505)。 对野生型和CD13敲除THP-1细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 TBS-T(0.1%吐温)中3%牛奶中的膜被堵塞 ® )孵育前 约108382 和 约8245 (小鼠抗GAPDH抗体[6C5])在4时过夜 ° C,稀释度分别为1000分之一和20000分之一。 印迹与山羊抗兔IgG H&L(IRDye)孵育 ® 800CW)预吸收( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( ab216776年 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
车道1: 野生型THP-1细胞裂解物30 ug 车道2: ANPEP敲除THP-1细胞裂解物30 ug 3号车道: PANC-1细胞裂解物30 ug 车道4: HEK-293细胞裂解物30 ug 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 第108310页 在160 kDa时观察到。 红色-加载控制 约8245 (小鼠抗GAPDH抗体[6C5])。 约108310 western blot显示与野生型THP-1细胞中的CD13反应,ANPEP敲除细胞系中观察到信号丢失 ab273759磅 (敲除细胞裂解物ab275505)。 对野生型和CD13敲除THP-1细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 用荧光蛋白印迹(TBS)封闭溶液封闭膜,然后用 约108310 和 约8245 (小鼠抗GAPDH抗体[6C5])在4时过夜 ° C,稀释度分别为1000分之一和20000分之一。 印迹与山羊抗兔IgG H&L(IRDye)孵育 ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( ab216776年 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
纯合子:外显子2中2 bp缺失
协议
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