主要功能和细节
鼠单克隆[V9]到波形蛋白-细胞骨架标记物 适用于:ICC/IF、IHC-P、WB、Flow Cyt(Intra) 淘汰验证 反应对象:大鼠、人 同位素:IgG1
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 小鼠单克隆抗体 [V9]到波形蛋白-细胞骨架标记 -
完 鼠标 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 老鼠,人类 预测可用于: 马、鸡、牛、猫、狗、猪 -
免疫原 全长天然蛋白质(纯化)。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:A549、Hap1、HeLa、U-2 OS、人扁桃体和MOLT4全细胞裂解物。 ICC/IF:HeLa、Hap1、SKOV-3和大鼠胶质细胞。 IHC-P:人体肾脏和口腔组织切片。 流式细胞仪(内部):HAP1、MDA-MB-231和SV40LT-SMC细胞。
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常规说明 这种针对波形蛋白的单克隆抗体已经在ICC/IF中进行了敲除验证。在野生型细胞中观察到预期的染色,而在波形蛋白敲除细胞中没有发现染色。 该抗体克隆由Abcam制造。 如果您的实验需要定制缓冲液配方或缀合物,请联系 orders@abcam.com . 多年来,生命科学行业一直面临着再现性危机。 Abcam正在通过我们的一系列重组单克隆抗体和用于金标准验证的敲除编辑细胞系引领解决这一问题。 购买前请检查此产品是否满足您的需求。 如果您有任何问题、特殊要求或疑虑,请在购买之前向我们发送查询和/或联系我们的支持团队。 以下是本产品的推荐替代品,以及出版物、客户评论和问答
性能
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中国 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 交付后,将等分样品储存在-20°C下。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.40 防腐剂:0.02%叠氮化钠 成分:PBS,6.97%L-精氨酸 -
浓度信息加载。。。 -
纯度 纯化的G蛋白 -
克隆 单克隆 -
协调 第9版 -
同种型 IgG1 -
研究领域
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
KO细胞系 -
KO细胞裂解物 -
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应用
靶
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功能 波形蛋白是在各种非上皮细胞,尤其是间充质细胞中发现的III类中间丝。 波形蛋白横向或末端附着于细胞核、内质网和线粒体。 与LARP6一起参与CO1A1和CO1A2 I型胶原mRNA的稳定。 -
组织特异性 在成纤维细胞中高表达,在T和B淋巴细胞中有一些表达,在Burkitt淋巴瘤细胞系中很少或没有表达。 在许多激素依赖性乳腺癌细胞系中表达。 -
疾病相关 白内障30 -
序列相似性 属于中间丝族。 -
结构域 中央α-螺旋线圈-线圈棒区域介导元素同二聚体化。 [IL]-x-C-x-x-[DE]基序是由iNOS-S100A8/A9反亚硝化酶复合物介导的半胱氨酸S-亚硝化的一个靶基序。 -
翻译后修饰 丝裂原-55的磷酸化和巢蛋白(通过相似性)促进了有丝分裂期间的丝状体解体。 间充质来源的各种细胞中最显著的磷蛋白之一。 在细胞分裂过程中,磷酸化作用增强,此时波形蛋白丝显著重组。 PKN1的磷酸化抑制丝状物的形成。 在细胞质中性粒细胞分泌期间,CDK5在Ser-56处磷酸化。 STK33磷酸化。 在胞质分裂期间,O-糖基化的位点与磷酸化位点相同或接近,这会干扰磷酸化状态。 S-亚硝化由干扰素-γ和氧化修饰的低密度脂蛋白(LDL(ox))诱导,可能与iNOS-S100A8/9转亚硝化酶复合物有关。 -
细胞定位 细胞质。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 420519 鸡肉 Entrez基因: 280955 奶牛 Entrez基因: 477991 狗 Entrez基因: 7431 人类 Entrez基因: 100522394 清管器 Entrez基因: 81818 老鼠 Omim公司: 193060 人类 瑞士保护银行: P09654号 鸡肉
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中国 波形蛋白存在于结缔组织和细胞骨架中。 -
别名 CTRCT30抗体 附睾管腔蛋白113抗体 FLJ36605抗体
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图片
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所有车道: 1µg/ml时的抗维生素A抗体[V9]-细胞骨架标记物(ab8069) 车道1: U-2 OS(人骨肉瘤上皮细胞系)细胞裂解物 车道2: 人扁桃体细胞裂解物 3号车道: 野生型HeLa细胞裂解物 车道4: VIM敲除HeLa细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 54千帕 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在53 kDa下观察到ab8069。 红色-装载控制, 约181602 在37 kDa时观察到。 ab8069在野生型HeLa细胞中与波形蛋白反应。 敲除细胞系时观察到信号丢失 约255446 (敲除细胞裂解物 约263775 )已使用。 对野生型和波形蛋白敲除样品进行SDS-PAGE分析。 ab8069和抗-GAPDH抗体[EPR16891]-负载控制( 约181602 )分别以1µg/ml和1份20000稀释液在4°C下培养过夜。 用山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( 约216772 )和山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( ab216777号 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
ab8069染色野生型HAP1细胞中的波形蛋白(绿色)(顶部面板)和VIM敲除HAP1的细胞(底部面板)。 细胞用100%甲醇固定(5分钟),用0.1%Triton X-100渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后用ab8069以0.5μg/ml和 公元202272年 (兔单克隆抗体[EP1332Y]转化为α-管蛋白(Alexa Fluor®594)),在+4°C下以1/250稀释过夜,然后在室温下用 ab150117号 (山羊对小鼠IgG的二级抗体(Alexa Fluor®488)),浓度为2μg/ml(绿色)。 核DNA用DAPI标记为蓝色。 使用共聚焦显微镜(Leica Microsystems,TCS SP8)拍摄图像。 -
Leica Biosystems BOND上福尔马林固定石蜡包埋的人类正常肾脏*切片中Vimentin染色的IHC图像 ® RX仪器。 用柠檬酸钠缓冲液(pH6,表位检索溶液1)进行热介导抗原检索预处理20分钟。 然后在室温下用ab8069(0.5 ug/ml)孵育切片15分钟,并使用HRP共轭紧凑聚合物系统进行检测。 DAB被用作显色剂。 然后用苏木精对切片进行复染,并用DPX固定。 插入的二级对照图像取自无一级抗体的相同分析。 对于其他IHC染色系统(自动化和非自动化),客户应优化可变参数,如抗原回收条件、初级抗体浓度和抗体孵育时间。 *组织取自人类研究组织库,由NIHR剑桥生物医学研究中心支持。 -
流式细胞术重叠直方图显示野生型HAP1(绿线)和VIM敲除的HAP1细胞用ab8069(红线)染色。 用80%甲醇固定细胞(5分钟),然后用0.1%PBS-Triton X-100渗透15分钟。然后将细胞培养在含有10%正常山羊血清的1x PBS中,以阻止非特异性蛋白-蛋白质相互作用,然后用抗体(ab8069)(1x10 6 100µl,0.04µg/ml),在22°C下保持30分钟。 二级抗体山羊抗鼠IgG H&L(Alexa Fluor ® 488,预吸附)( ab150117号 )于2000年1月在22°C下使用30分钟。 同种对照抗体为小鼠IgG1和kappa( 约170190 )在与主要抗体相同的浓度和条件下使用(野生型HAP1-黑线VIM敲除HAP1–灰线)。 未标记样本也用作对照(为了简单起见,未显示此行)。 使用50 mW蓝光激光器(488nm)和525/40带通滤波器采集了超过5000个事件。 该抗体也可用于在相同条件下使用的用4%甲醛固定(10分钟)/用0.1%PBS Triton X-100透化15分钟的HAP1细胞。 -
所有车道: 1µg/ml时的抗维生素A抗体[V9]-细胞骨架标记物(ab8069) 车道1: 野生型HAP1全细胞裂解物 车道2: VIM(波形蛋白)敲除HAP1全细胞裂解物 3号车道: HeLa全细胞裂解物 车道4: MOLT4全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 预测的带宽大小: 54千帕 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在57 kDa下观察到ab8069。 红色-装载控制, 约181602 ,在37 kDa下观察到。 在野生型HAP1细胞中,当VIM(Vimentin)敲除细胞中信号丢失时,ab8069显示出与Vimentin特异性反应。 对野生型和VIM(Vimentin)敲除样品进行SDS-PAGE分析。 Ab8069和 约181602 (兔抗GAPDH负荷对照)分别在4℃、1μg/ml和1/10000稀释度下培养过夜。 用山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床 约216772 和山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床 ab216777号 二级抗体在成像前在室温下以1/10000稀释1小时。 -
所有车道: 抗维生素A抗体[V9]-细胞骨架标记物(ab8069) 车道1: A549细胞全细胞裂解物 车道2: TGF-β处理A549细胞的全细胞裂解物 3号车道: 过度表达JARID2的A549细胞的全细胞裂解物 车道4: TGF-β处理过表达JARID2的A549细胞的全细胞裂解物 预测的带宽大小: 54千Da -
所有车道: 1µg/ml时的抗维生素A抗体[V9]-细胞骨架标记物(ab8069) 车道1: HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)全细胞裂解液 车道2: MOLT4(人淋巴细胞白血病细胞系)全细胞裂解液 每条泳道10µg的裂解物/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗鼠IgG H&L(HRP)预吸附( 约97040 )稀释1/5000 使用ECL技术开发。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 54千帕 观察到的频带大小: 57千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 20分钟 -
ab8069染色HeLa细胞中的波形蛋白。 细胞用4%甲醛固定(10分钟),用0.1%Triton X-100透化5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS吐温中封闭1小时。 然后将细胞在+4°C下与ab8069以1/100稀释度(以绿色显示)孵育过夜 公元195889年 ,小鼠单克隆抗α-管蛋白(Alexa Fluor ® 594),浓度为2µg/ml(以红色显示)。 用DAPI标记细胞核DNA(以蓝色显示)。 使用共聚焦显微镜(Leica Microsystems,TCS SP8)拍摄图像。 -
ab8069免疫细胞化学/免疫荧光法检测人卵巢浆液性腺癌细胞系SKOV-3中的波形蛋白。 样品用4%PFA固定在PBS pH 7.4中,然后用0.2%皂苷渗透30分钟。 使用1%BSA/PBS进行1小时的阻断步骤。 然后将样品与ab8069在1%BSA/PBS中以1/200稀释度孵育1小时。 二级抗体为山羊抗鼠Alexa 488(绿色),稀释1/1000,1%BSA/PBS 1小时。 然后,样品在1%BSA/PBS中与阴茎倍体蛋白(肌动蛋白染色用红色)孵育45分钟,并在PBS中用DAPI(细胞核染色用蓝色)复染45分钟。 -
ab8069用免疫细胞化学/免疫荧光法(ICC/IF)染色大鼠胶质细胞中的波形蛋白。 用甲醛固定细胞,并在25°C下用1%BSA封闭10分钟。 样品与一级抗体(1/200)在4°C下孵育10小时。 Alexa Fluor公司 ® 用555结合的抗鼠IgG多克隆(1/300)作为二级抗体。 -
用免疫组织化学方法(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)对人口腔组织切片中的波形蛋白进行ab8069染色。 用多聚甲醛固定组织并用 约64226 在25°C下进行蛋白质阻断5分钟; 抗原回收是在pH6缓冲液中通过热调解进行的。 样品与一级抗体(10%NGS中的1/1000)在4°C下孵育16小时。 使用未稀释的生物素化山羊抗兔多克隆IgG作为二级抗体。 -
当ab8069用于 鼠标 肾 福尔马林固定石蜡包埋组织,使用MOM检测试剂盒, ab127055号 使用压力锅热介导抗原回收和柠檬酸钠缓冲液(pH6)对切片进行30分钟的预处理。 在室温下,用ab8069以5µg/ml的浓度孵育切片15分钟。 DAB被用作显色剂。 切片用苏木精复染并用DPX固定。 对于其他IHC染色系统(自动化和非自动化),客户应优化可变参数,如抗原回收条件、初级抗体浓度和抗体孵育时间。 -
叠加直方图显示用ab8069染色的SV40LT-SMC细胞(红线)。 用4%甲醛固定细胞(10分钟),然后用0.1%PBS-Triton X-100渗透20分钟。然后在1x PBS/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸中培养细胞,以阻止非特异性蛋白-蛋白质相互作用,然后再接种抗体(ab8069,0.1μg/1x10 6 电池)在22ºC下保持30分钟。 使用的二级抗体是Alexa Fluor ® 488山羊抗小鼠IgG(H&L)( 第150113页 )在22ºC下,1/2000稀释30分钟。 同型对照抗体(黑线)为小鼠IgG1[ICIGG1]( ab91353型 ,0.1微克/1x10 6 电池)在相同条件下使用。 未标记样本(蓝线)也用作对照。 使用20mW氩离子激光器(488nm)和525/30带通滤波器采集了超过5000个事件。 该抗体在80%甲醇(5分钟)固定/0.1%PBS-Triton X-100渗透20分钟的SV40LT-SMC细胞中发出阳性信号。 -
重叠直方图显示用ab8069染色的MDA-MB-231细胞(红线)。 用4%甲醛固定细胞(10分钟),然后用0.1%PBS-Triton X-100渗透20分钟。然后在1x PBS/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸中培养细胞,以阻止非特异性蛋白-蛋白质相互作用,随后抗体(ab8069,1μg/1x10 6 电池)在22ºC下保持30分钟。 使用的二级抗体是Alexa Fluor ® 488山羊抗鼠IgG(H&L)( 第150113页 )在22ºC下,1/2000稀释30分钟。 同型对照抗体(黑线)为小鼠IgG1[ICIGG1]( ab91353型 ,1μg/1x10 6 电池)在相同条件下使用。 未标记样本(蓝线)也用作对照。 使用20mW氩离子激光器(488nm)和525/30带通滤波器采集了超过5000个事件。 该抗体在用80%甲醇固定(5分钟)/用0.1%PBS-Triton X-100渗透20分钟的MDA-MB-231细胞中发出阳性信号。
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文献 (152)
松村G 等。 无细胞原位组织工程血管监测的评估方法:犬下腔静脉癌模型中生长和发育的证据。 公共科学图书馆一号 17:e0267274(2022)。 公共医学:35436313 Pakharukova车型年款 等。 与猫科狸殖吸虫感染相关的基因表达的全球变化揭示了哺乳动物宿主反应的时间异质性。 食品水性寄生虫 27:e00159(2022)。 公共医学:35542180 卡卡拉M 等。 Ephrin B激活成纤维细胞中Src家族激酶诱导前列腺癌基质重塑。 癌症(巴塞尔) 14:不适用(2022年)。 公共医学:35565468 乌斯曼S 等。 N-末端标记对De Novo Vimentin中间纤维组装的影响。 国际分子科学杂志 23:不适用(2022年)。 公共医学:35683030 黄L 等。 CRISPR/Cas9诱导的miR-24敲除降低原代山羊乳腺上皮细胞中的胆固醇和单不饱和脂肪酸含量。 食品 11:不适用(2022年)。 公共医学:35885255