主要功能和细节
小鼠单克隆抗体[20B12AF2]对VDAC1/Porin+VDAC3 适用于:WB、ICC/IF、Flow Cyt 敲除已验证 反应对象:小鼠、大鼠、奶牛、人类 同位素:IgG2b
概述
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产品名称 抗-VDAC1/Porin+VDAC3[20B12AF2] -
描述 小鼠单克隆抗体 [20B12AF2]至VDAC1/Porin+VDAC3 -
宿主 鼠标 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 老鼠、老鼠、奶牛、人类 预测可用于: 绵羊、山羊、猫、狗、猪、果蝇、鱼、鹌鹑、普通狨猴、狗鱼、猫鲨 -
免疫原 重组全长蛋白。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:从人、牛、大鼠和小鼠心脏分离的线粒体。 HepG2细胞裂解物。 ICC/IF:HeLa细胞。 人成纤维细胞。 流式细胞术:HepG2细胞。
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常规说明 该抗体克隆[20B12AF2]由Abcam制造。 如果您需要在不同的缓冲液配方或不同的结合物中使用此抗体进行实验,请联系 orders@abcam.com 或者您可以找到更多信息 在这里 . 多年来,生命科学行业一直面临着再现性危机。 Abcam正在通过我们的一系列重组单克隆抗体和用于金标准验证的敲除编辑细胞系引领解决这一问题。 购买前请检查此产品是否符合您的需求。 如果您有任何问题、特殊要求或疑虑,请在购买之前向我们发送查询和/或联系我们的支持团队。 以下是本产品的推荐替代品,以及出版物、客户评论和问答
性能
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形式 液体 -
存放说明 运输温度为4°C。 储存于+4°C。 请勿冻结。 -
存储溶液 pH值:7.50 防腐剂:0.02%叠氮化钠 成分:0.36%HEPES,0.88%氯化钠 -
浓度信息加载。。。 -
纯度 IgG分数 -
纯化说明 通过SDS-PAGE判断接近均匀性。 用无血清培养基中生长的杂交瘤体外产生抗体,然后通过生化分离纯化。 -
克隆 单克隆 -
克隆编号 20B12AF2型 -
同种型 IgG2b -
轻链类型 卡帕 -
研究领域
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兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
KO细胞系 -
KO细胞裂解物 -
阳性对照 -
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应用
靶标
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细胞定位 VDAC1/孔蛋白:线粒体外膜。 细胞膜。 VDAC3:线粒体外膜。 -
数据库链接 Entrez基因: 282119 奶牛 Entrez基因: 282716 奶牛 Entrez基因: 7416 人类 Entrez基因: 7419 人类 Entrez基因: 22333 鼠标 Entrez基因: 22335 鼠标 Entrez基因: 397010 清管器 Entrez基因: 397651 清管器
查看所有内容
图片
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所有车道: 抗-VDAC1/Porin+VDAC3抗体[20B12AF2](ab14734),稀释度为1/1000 车道1: 野生型Hap1细胞裂解物 车道2: VDAC1敲除Hap1细胞裂解物 3号车道: 野生型HEK-293T细胞裂解物 车道4: VDAC1敲除HEK-293T细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在31 kDa下观察到ab14734。 红色-装载控制, 约181602 在37 kDa时观察到。 与VDAC1非常接近的低频段可能是VDAC3。 在野生型HEK-293T细胞中,ab14734与VDAC1/Porin+VDAC3反应。 敲除细胞系时观察到信号丢失 约255444 (敲除细胞裂解物 约263839 )已使用。 对野生型和VDAC1/孔蛋白敲除样品进行SDS-PAGE分析。 ab14734和抗-GAPDH抗体[EPR16891]-负载控制( 约181602 )分别在4°C下以1/1000稀释度和1/20000稀释度培养过夜。 用山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附和山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附二级抗体,在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
ab14734用ICC/IF(免疫细胞化学/免疫荧光)染色人HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)细胞中的VDAC1/Porin+VDAC3。 用多聚甲醛固定细胞,用0.1%Triton X-100渗透3分钟,用0.2%血清在22°C下封闭60分钟。 样品与一级抗体(1/200在0.5%BSA和0.02%Triton X100在PBS中)在4°C下孵育16小时。 FITC-结合的山羊抗鼠IgG多克隆被用作次级抗体,稀释度为1/200。 -
所有车道: 抗-VDAC1/Porin+VDAC3抗体[20B12AF2](ab14734),稀释度为1/1000 车道1: N-GST标记的重组人VDAC1(aa1至283)蛋白与NFDM/TBST 车道2: N-GST标记的重组人VDAC2(aa 1至294)蛋白与NFDM/TBST 3号车道: N-GST标记的重组人VDAC3(aa 1至283)蛋白与NFDM/TBST 每车道0.01微克的裂解液/蛋白质。 每条通道5%的阻断肽。 观察到的频带大小: 33千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 10秒 稀释缓冲液:5%NFDM/TBST N-GST标记的重组人VDAC1蛋白可用作 约132481 N-GST标记的重组人VDAC2蛋白可作为 约152793 -
所有车道: 抗-VDAC1/Porin+VDAC3抗体[20B12AF2](ab14734),稀释度为1/1000 车道1: 野生型HAP1全细胞裂解物 车道2: VDAC1敲除HAP1全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 观察到的频带大小: 33千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 5秒 阻塞和稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 -
所有车道: 抗-VDAC1/Porin+VDAC3抗体[20B12AF2](ab14734),稀释度为1/1000 车道1: 用NFDM/TBST裂解HEK-293(人胚胎肾上皮细胞)全细胞 车道2: HAP1(野生型对照人慢性粒细胞白血病近单倍体细胞系)全细胞裂解物与NFDM/TBST 3号车道: 用NFDM/TBST裂解MEF(小鼠胚胎成纤维细胞)全细胞 车道4: NFDM/TBST大鼠脑组织裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 每条通道5%的阻断肽。 观察到的频带大小: 33千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 5秒 稀释缓冲液:5%NFDM/TBST -
(A) 抗-VDAC1/Porin+VDAC3抗体识别VDAC1和VDAC3,但不识别VDAC2。 用抗-VDAC1/Porin+VDAC3(上图)或抗Tom20抗体(下图)通过蛋白质印迹分析来自野生型MEFs和VDAC1/3-/-MEFs的裂解物。 (B) 抗-VDAC1/Porin+VDAC3抗体不能识别VDAC1/3-/-MEFs中的VDAC2。 HA标记的VDAC1、2或3在VDAC1/3-/-MEFs中表达,用抗HA抗体免疫沉淀,用抗-HA抗体或抗-VDAC1/Porin+VDAC3抗体进行western blotting分析(顶部面板)。 抗-VDAC1/Porin+VDAC3抗体识别HA-VDAC1和HA-VDAC3,但识别不到HA-VDAC2。 注意,HA-VDAC3的迁移分子量低于HA-VDAC1和HA-VDAC2。 分子量以kDa表示。 -
MA-10细胞裂解物亚细胞组分中内源性VDAC1/孔蛋白和VDAC3的免疫印迹分析。 VDAC1/孔蛋白和VDAC3被用作线粒体标记蛋白。 车道1: 全细胞裂解物 车道2: 细胞质部分 3号车道: 富含线粒体的部分 -
所有车道: 抗-VDAC1/Porin+VDAC3抗体[20B12AF2](ab14734) 车道1: 15µg时从人心脏分离的线粒体 车道2: 6µg牛心脏分离线粒体 3号车道: 大鼠心脏分离线粒体30µg 车道4: 30µg时从小鼠心脏分离的线粒体 车道5: 30µg的HepG2(人肝细胞癌细胞系)细胞裂解物 观察到的频带大小: 37千道尔顿 为什么实际的频带大小与预测的不同? 小鼠样本(第4道)中的额外条带是由于次级抗体与心脏组织中残留的小鼠血液发生反应,因为很难完全清除这些小器官中的血液。 -
重叠直方图显示用ab14734(红线)染色的HepG2(人肝癌细胞系)细胞。 用4%多聚甲醛固定细胞(10分钟),然后用0.1%PBS-Tween渗透20分钟。然后在1x PBS/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸中培养细胞,以阻断非特异性蛋白-蛋白质相互作用,然后用抗体(ab14734,1µg/1x10 6 电池)在22ºC下保持30分钟。 使用的二级抗体是DyLight ® 488山羊抗鼠IgG(H+L)( 约96879 )1/500稀释30分钟,22ºC。 同型对照抗体(黑线)为小鼠IgG2b[PLPV219]( 约91366 ,2微克/1x10 6 电池)在相同条件下使用。 采集了超过5000个事件。 在相同条件下使用80%甲醇(5分钟)/0.1%PBS-Tween渗透固定的HepG2细胞中,该抗体发出阳性信号。 -
使用0.2µg/ml的ab14734对人成纤维细胞进行免疫荧光(红色)。 用DAPI(蓝色)标记细胞核。 -
1/500稀释的抗-VDAC1/Porin+VDAC3抗体[20B12AF2](ab14734)+10µg MCF7(人乳腺癌细胞系)细胞裂解物 次要 HRP-结合羊抗鼠多克隆1/5000稀释 使用ECL技术开发。 在还原条件下进行。 暴露时间: 3分钟 0.5%TBS-吐温+5%NaN3在4ºC下放置16小时。 -
所有车道: 1/5000稀释的抗-VDAC1/Porin+VDAC3抗体[20B12AF2](ab14734) 1-2车道: 大鼠脑细胞裂解物(匀浆) 3-4车道: 大鼠脑细胞裂解物(线粒体) 每车道30µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: HRP结合羊抗鼠IgG 使用ECL技术开发。 在还原条件下进行。 观察到的频带大小: 39千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 5分钟
实验方案
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载
文献 (584)
科西克B 等。 爱维治改善1型糖尿病雄性小鼠模型的骨骼肌线粒体呼吸和功能性有氧能力。 应用物理营养元 49:265-272 (2024). 工作分解结构 ; 鼠标 . 公共医学:37913525 珍妮A 等。 ESYT1将内质网与线粒体相连,是线粒体脂质和钙稳态所必需的。 生命科学联盟 7:不适用(2024年)。 公共医学:37931956 波特Y 等。 褪黑素减轻瘦素缺乏诱导肥胖中肌肉生物能量学和蛋白质质量控制系统的损伤。 抗氧化剂(巴塞尔) 12:不适用(2023年)。 公共医学:38001815 杨毅(Yang Y) 等。 亲环素D诱导的线粒体损伤导致小鼠脑出血后轴突损伤。 神经再生研究 18:849-855 (2023). 公共医学:36204853 马萨诸塞州金格里奇 等。 人类疾病基因CLEC16A编码的一个内在紊乱的蛋白质区域调节着有丝分裂。 自噬 19:525-543 (2023). 公共医学:35604110