主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 小鼠单克隆[E379]与NF-kB p65嵌合 适用人群:IHC-P、WB 敲除已验证 反应对象:人类
概述
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产品名称 -
描述 中国 [E379]至NF-kB p65-嵌合 -
宿主 鼠标 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 人类 不与反应: 老鼠,老鼠 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:野生型HAP1全细胞裂解物。 HeLa全细胞裂解物。 IHC-P:人类扁桃体组织。 人类卵巢癌组织。
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常规说明 ab307840是一种小鼠单克隆嵌合抗体。 该抗体克隆由Abcam制造。 如果您需要为您的实验定制缓冲配方或共轭物,请联系 orders@abcam.com . 该产品是一种重组单克隆抗体,具有以下优点: -高批次一致性和再现性 -提高敏感性和特异性 -长期供应安全 -无动物制作
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性能
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形式 液体 -
存放说明 运输温度为4°C。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 长期储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.2 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:40%甘油(甘油,甘油),0.05%牛血清白蛋白,59%PBS -
正在加载浓度信息。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆 单克隆 -
克隆编号 E379型 -
同种型 IgG2a抗体 -
研究领域
应用
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靶标
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功能 NF-kappa-B是一种多效性转录因子,存在于几乎所有细胞类型中,参与炎症、免疫、分化、细胞生长、肿瘤发生和凋亡等多种生物过程。 NF-kappa-B是由类Rel结构域蛋白RELA/p65、RELB、NFKB1/p105、NFKB1/p50、Rel和NFKB2/p52形成的同二聚体或异二聚体复合物,其中异二聚物p65-p50复合物最为丰富。 二聚体结合在其靶基因DNA中的kappa-B位点,并且单个二聚体对不同的kappa-B位点有不同的偏好,它们可以以不同的亲和力和特异性结合。 不同的二聚体组合分别作为转录激活物或阻遏物。 NF-kappa-B受翻译后修饰和亚细胞分隔的各种机制以及与其他辅因子或辅抑制因子的相互作用控制。 NF-kappa-B复合物被保存在细胞质中,处于与NF-kampa-B抑制剂家族成员复合的非活性状态。 在传统的激活途径中,IκB被IκB激酶(IKKs)磷酸化以响应不同的激活剂,随后被降解,从而释放出转移到细胞核的活性NF-κ-B复合物。 NF-kappa-B异二聚体p65-p50和p65-c-Rel复合物是转录激活物。 NF-kappa-B p65-p65复合物似乎参与了侵袭素介导的IL-8表达激活。 I-κB对NF-κB的抑制作用主要通过与p65的相互作用发挥。 p65显示一个弱的DNA结合位点,该位点可能直接参与NF-kappa-B复合体中的DNA结合。 通过与DDX1的关联与NF-kappa-B启动子区域的染色质关联。 -
序列相似性 包含1个RHD(Rel-like)域。 -
结构域 9aaTAD基序是存在于大量酵母和动物转录因子中的反式激活结构域。 -
翻译后修饰 泛素化,导致其蛋白酶体降解。 NF-kappa-B响应终止需要降解。 SETD6在Lys-310处单甲基化。 Lys-310的单甲基化被EHMT1的ANK重复序列识别,并促进靶基因受抑制染色质的形成,导致NF-kappa-B转录因子活性的下调。 Ser-311的磷酸化破坏了与EHMT1的相互作用,但未阻止Lys-310的单甲基化,并减轻了靶基因的抑制。 Ser-311的磷酸化破坏与EHMT1的相互作用并促进转录因子活性(通过相似性)。 Ser-536上的磷酸化刺激Lys-310上的乙酰化以及与CBP的相互作用; 磷酸化和乙酰化形式显示出增强的转录活性。 可逆乙酰化; 乙酰化似乎由CBP介导,而脱乙酰化则由HDAC3介导。 Lys-122处的乙酰化增强了DNA结合并损害了与NFKBIA的结合。在不影响DNA结合和NFKBIA结合的情况下,Lys-310处的乙酰基化是完整转录活性所必需的。 乙酰化还可以降低DNA结合并导致核出口。 与BRMS1的相互作用促进“Lys-310”的脱乙酰化。 -
细胞定位 核心。 细胞质。 核,但在细胞质中也发现了与抑制剂(I-kappa-B)复合的非活性形式。 TNF-α诱导后在细胞核中用RELA染色。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
别名 禽网状内皮增生病病毒(vrel)癌基因同源物A抗体 MGC131774抗体 NF-κB p65delta3抗体
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所有车道: 抗-NF-kB p65抗体[E379]-小鼠IgG2a(嵌合)(ab307840),1/1000稀释 车道1: 野生型HAP1(人慢性粒细胞白血病近单倍体细胞系)细胞裂解物 车道2: NF-kB p65敲除HAP1细胞裂解物 3号车道: HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞系)全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 1/10000稀释的过氧化物酶偶联山羊抗小鼠IgG(H+L) 预测的带宽大小: 60千Da 观察到的频带大小: 65千帕 为什么实际频带大小与预测的不同? 在Western blot中,ab307840被证明与NF-kB p65特异性结合。 野生型HAP1细胞裂解液中在65 kDa处观察到一条带,而NF-kB p65敲除细胞裂解液则没有观察到这种大小的信号。 样品在Bis-Tris凝胶上运行。 在Western blot中,抗GAPDH抗体( 约181602 )1/200000稀释的负载对照染色。 阻塞/稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 曝光时间:10秒。 -
对石蜡包埋的人扁桃体组织进行免疫组织化学分析,用ab307840在1/1000稀释度(0.881 ug/mL)下标记NF-kB p65,然后使用现成的LeicaDS9800(Bond®Polymer Refine Detection)。 人扁桃体染色阳性。 在LeicaDS9800试剂盒染色过程中,在室温下用ab307840孵育切片30分钟,然后用抗鼠IgG2a抗体孵育8分钟。 免疫染色在徕卡生物系统BOND®RX仪器上进行。 苏木精会签。 仅二级抗体对照:二级抗体可用于LeicaDS9800(Bond®Polymer Refine Detection)。 用柠檬酸缓冲液(pH 6.0,表位检索溶液1)进行20分钟的热介导抗原检索。 -
对石蜡包埋的人类卵巢癌组织进行免疫组织化学分析,用ab307840在1/1000稀释度(0.881 ug/mL)下标记NF-kB p65,然后使用现成的LeicaDS9800(Bond®Polymer Refine Detection)。 人卵巢癌染色阳性。 在LeicaDS9800试剂盒染色过程中,在室温下用ab307840孵育切片30分钟,然后用抗鼠IgG2a抗体孵育8分钟。 免疫染色在徕卡生物系统BOND®RX仪器上进行。 苏木精会签。 仅二级抗体对照:二级抗体可用于LeicaDS9800(Bond®Polymer Refine Detection)。 用柠檬酸缓冲液(pH 6.0,表位检索溶液1)进行20分钟的热介导抗原检索。
实验方案
数据表及文件
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